智鼠故事 
C57BL/6JCya-Vwfem1flox/Cya 条件性基因敲除小鼠
复苏/繁育服务
产品名称：
Vwf-flox
产品编号：
S-CKO-06645
品系背景：
C57BL/6JCya
* 使用本品系发表的文献需注明：Vwf-flox mice (Strain S-CKO-06645) were purchased from Cyagen.
交付类型
周龄
性别
基因型
数量
只
基本信息
品系名称
C57BL/6JCya-Vwfem1flox/Cya
品系编号
CKOCMP-22371-Vwf-B6J-VA
产品编号
S-CKO-06645
基因名
Vwf
品系背景
C57BL/6JCya
基因别称
VWD；F8VWF；C630030D09；6820430P06Rik；B130011O06Rik
NCBI号
修饰方式
条件性基因敲除
品系说明
该品系是基于策略设计时的数据库信息制作而成，建议您在购买前查询最新的数据库和相关文献，以获取最准确的表型信息。
小鼠表型
MGI:98941 Homozygous null mutants exhibit hemostatic and thrombotic defects similar to human von Willebrand disease. Mutants have prolonged bleeding time, newborns occasionally show fatal intra-abdominal bleeding and some adults have detectable fecal occult blood.
质控标准
精子检测
① 冷冻前验证精子活力观察
② 冷冻验证每批次进行复苏验证
品系状态
活体
环境标准
SPF
供应地区
中国
品系详情
Vwf位于小鼠的6号染色体，采用基因编辑技术，通过高通量电转受精卵方式，获得Vwf基因条件性敲除小鼠，性成熟后取精子冻存。
Vwf-flox小鼠模型是由赛业生物（Cyagen）采用基因编辑技术构建的条件性敲除小鼠。Vwf基因位于小鼠6号染色体上，由52个外显子组成，其中ATG起始密码子在2号外显子，TGA终止密码子在52号外显子。条件性敲除区域（cKO区域）位于6号外显子，包含125个碱基对的编码序列。删除该区域会导致小鼠Vwf基因功能的丧失。
Vwf-flox小鼠模型的构建过程包括将核糖核蛋白（RNP）和靶向载体共同注入受精卵。随后，对出生的小鼠进行PCR和测序分析进行基因型鉴定。携带敲除等位基因的小鼠表现出与人类冯·维勒布兰德病相似的止血和血栓形成缺陷。突变体有延长的出血时间，新生小鼠偶尔出现致命的腹腔内出血，一些成年小鼠有可检测的粪便隐血。
此外，6号外显子的敲除会导致基因的移码，并覆盖编码区域的1.48%。第五个内含子的大小为4161 bp，第六个内含子的大小为17792 bp。有效的cKO区域大小约为1.4 kb。cKO区域没有其他已知的基因。
发表文献
Free Radical Biology and Medicine
2023.11
* 使用本品系发表的文献需注明：Vwf-flox mice (Strain S-CKO-06645) were purchased from Cyagen.
基因研究概述
Vwf基因编码的是血管性血友病因子（von Willebrand factor，vWF），它是一种重要的血浆蛋白，参与血液凝固过程，特别是在止血和血栓形成中发挥关键作用。vWF是一种多聚糖蛋白，由内皮细胞合成并储存于Weibel-Palade小体中。当血管受损时，vWF会被释放到血液中，与血小板表面的糖蛋白 Ib-α (GpIb-α) 结合，促进血小板在受损部位的聚集，从而形成血小板血栓，起到初步止血的作用。此外，vWF还可以结合并稳定因子VIII，这是一种重要的凝血因子，在血液凝固的后续阶段中发挥作用。因此，vWF的缺乏或功能异常会导致出血性疾病，称为血管性血友病（von Willebrand disease，VWD）。
Vwf基因位于人类12号染色体上，包含52个外显子，跨越约178千碱基对。vWF基因的突变是VWD的主要原因。VWD是一种遗传性出血性疾病，其特点是出血时间延长、血小板功能异常和因子VIII水平降低。VWD有不同的亚型，包括1型、2型和3型，每种亚型都有其特定的分子缺陷和临床表现。
Vwf基因的突变可以导致vWF蛋白的结构和功能异常，从而影响其与GpIb-α的结合能力、多聚体大小和稳定性。例如，2B型VWD是由vWF基因第28外显子中的突变引起的，这些突变导致vWF与GpIb-α的亲和力增加，导致血小板聚集和血栓形成。2M型VWD则是由vWF基因的突变导致vWF与GpIb-α的结合能力降低，从而影响血小板聚集和血栓形成。3型VWD是最严重的一种，通常是由于vWF基因的完全或几乎完全缺失导致的，导致血浆中vWF水平极低或检测不到。
除了VWD，vWF基因的变异还与一些其他疾病相关。例如，研究发现vWF基因启动子区域的单核苷酸多态性（SNPs）与血浆vWF抗原（vWF:Ag）水平相关，这表明vWF基因的遗传变异可能影响vWF的表达和分泌[1]。此外，vWF基因的表达还与乳腺癌的化疗耐药性相关。研究发现，vWF基因的表达在化疗后乳腺癌细胞中上调，并且与化疗引起的乳腺癌细胞逃逸和迁移有关[2]。
在治疗方面，基因治疗是一种很有前景的方法。研究发现，将vWF基因转移到肝脏细胞中可以部分纠正VWD小鼠的凝血功能障碍[3]。此外，一些药物也可以通过抑制vWF的活性来治疗VWD。例如，贝母碱可以抑制vWF的表达和功能，从而减少出血[2]。
总之，vWF基因是一个重要的基因，其突变和表达异常与多种疾病相关。深入研究vWF基因的功能和调控机制对于理解出血性疾病的发病机制和开发新的治疗方法具有重要意义。
参考文献：
1. Keightley, A M, Lam, Y M, Brady, J N, Cameron, C L, Lillicrap, D. . Variation at the von Willebrand factor (vWF) gene locus is associated with plasma vWF:Ag levels: identification of three novel single nucleotide polymorphisms in the vWF gene promoter. In Blood, 93, 4277-83. doi:. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/10361125/
2. Zhao, Yawei, He, Meihui, Cui, Lianzhi, Zhang, Hansi, Chen, Li. 2024. Systematic screening of protein-coding gene expression identified VWF as a potential key regulator in anthracycline-based chemotherapy-exacerbated metastasis of breast cancer. In BMC cancer, 24, 1243. doi:10.1186/s12885-024-12999-9. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/39379897/
3. Wang, Lan, Rosenberg, Jonathan B, De, Bishnu P, Kaminsky, Stephen M, Crystal, Ronald G. 2012. In vivo gene transfer strategies to achieve partial correction of von Willebrand disease. In Human gene therapy, 23, 576-88. doi:10.1089/hum.2011.238. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/22482515/
