智鼠故事 
C57BL/6JCya-T2em1flox/Cya 条件性基因敲除小鼠
复苏/繁育服务
产品名称：
T2-flox
产品编号：
S-CKO-05697
品系背景：
C57BL/6JCya
* 使用本品系发表的文献需注明：T2-flox mice (Strain S-CKO-05697) were purchased from Cyagen.
交付类型
周龄
性别
基因型
数量
只
基本信息
品系名称
C57BL/6JCya-T2em1flox/Cya
品系编号
CKOCMP-21331-T2-B6J-VA
产品编号
S-CKO-05697
基因名
T2
品系背景
C57BL/6JCya
基因别称
brachyury2
NCBI号
修饰方式
条件性基因敲除
品系说明
该品系是基于策略设计时的数据库信息制作而成，建议您在购买前查询最新的数据库和相关文献，以获取最准确的表型信息。
小鼠表型
MGI:104658 Homozygotes for mutations at this locus fail to form an organized caudal notochord and die as embryos. Heterozygotes exhibit an abnormal tail phenotype.
质控标准
精子检测
① 冷冻前验证精子活力观察
② 冷冻验证每批次进行复苏验证
品系状态
在研小鼠
环境标准
SPF
供应地区
中国
品系详情
T2位于小鼠的17号染色体，采用基因编辑技术，通过高通量电转受精卵方式，获得T2基因条件性敲除小鼠，性成熟后取精子冻存。
T2-flox小鼠模型由赛业生物（Cyagen）利用基因编辑技术构建，旨在研究T2基因在小鼠体内的功能。T2基因位于小鼠17号染色体上，由11个外显子组成，其中ATG起始密码子在1号外显子，TAA终止密码子在11号外显子。条件性敲除区域（cKO区域）位于2号外显子至3号外显子之间，包含约2207个碱基对的编码序列。删除该区域会导致小鼠T2基因功能的丧失。T2-flox小鼠模型的构建过程包括将核糖核蛋白（RNP）和靶向载体共同注入受精卵。随后，对出生的小鼠进行PCR和测序分析进行基因型鉴定。此外，携带突变等位基因的纯合子小鼠无法形成有序的尾部脊索，并在胚胎期死亡。杂合子小鼠则表现出异常的尾部表型。该模型可用于研究T2基因在小鼠体内的功能。
基因研究概述
基因T2是一个具有多重功能和不同表达模式的基因，它在生物医学领域的研究中占有重要地位。在进化过程中，基因复制是一个重要的现象，一些基因在复制后被保留下来，而另一些则被丢失。基因复制保留的机制尚不完全清楚，但基因复制保留假说认为，基因的功能和相互作用伙伴的数量等因素决定了复制基因被保留的可能性。此外，一些基因在基因组复制事件后更容易受到剂量平衡效应的影响，从而更有可能被长时间保留。
在植物研究中，BnaMAX1基因在油菜植物中具有冗余功能，与拟南芥MAX1基因相似，调节植物高度和腋生芽的生长。通过CRISPR/Cas9系统编辑两个BnaMAX1同源基因，可以有效地改善植物结构并增加产量。研究结果表明，同时敲除所有四个BnaMAX1等位基因导致半矮化和增加分枝的表型，并增加每个植物的产量[1]。
在病毒研究中，基因T2是禽传染性支气管炎病毒（IBV）的一个基因，该病毒是一种重要的家禽病原体。通过对IBV菌株CU-T2的基因3、4和5进行序列分析，发现这些基因与其他IBV菌株的序列同源性在84.1-96.4%之间。此外，研究还表明，基因T2的进化过程是一个复杂且尚未完全理解的过程[2]。
在动物模型研究中，Cre-loxP系统是一种强大的工具，可以用于条件基因表达。在耳朵研究中，Cre-loxP技术被用于研究听觉和前庭器官中的基因表达。Atoh1-CreER(TM)和Atoh1-CreER(T2)是两种不同的Cre-loxP小鼠模型，它们在听觉和前庭器官中的表达模式不同。此外，研究还发现了一种新的Cre-loxP小鼠模型Fgfr3-iCreER(T2)，它可以在耳蜗支持细胞中诱导Cre活性[3]。
在黑色素细胞研究中，Tyr::CreERT2系统是一种强大的工具，可以用于研究黑色素细胞转化。通过测序两个Tyr::CreERT2转基因小鼠模型，可以确定它们的整合位点，并设计PCR引物进行基因分型。此外，研究还讨论了两种转基因小鼠模型的优势[4]。
在发育生物学研究中，T-box基因是一类编码转录因子的基因，在发育过程中发挥重要作用。As-T2是一种T-box基因，与Tbx6亚家族相似，并与胚胎肌肉细胞分化相关。As-T2在尾芽胚胎的肌肉细胞和尾部尖端中表达，并在肌肉特异性肌球蛋白重链基因和肌动蛋白基因的异位表达中发挥作用[5]。
在细菌研究中，基因T2编码DNA-(腺嘌呤-N6)甲基转移酶（Dam），能够甲基化含有胞嘧啶和羟甲基胞嘧啶的DNA。T2 dam基因与T4 dam基因相比，在Dam编码区域有22个核苷酸差异，其中4个导致3个编码差异。此外，T2 dam基因在5'端有一个536个碱基对的插入，该插入与T4或大肠杆菌DNA没有同源性[6]。
在病毒研究中，基因T2的早期基因在T2和T4两种相关噬菌体之间的杂交后代中被部分排除。这是由于T2中的六个排除敏感位点被完全排除。然而，在T2基因56附近的排除敏感位点中，一个突变(exr(56)1)使得该位点对排除具有部分抗性[7]。
综上所述，基因T2在植物、病毒、动物模型、黑色素细胞和细菌研究中发挥着重要作用。它参与了植物结构的改善、病毒基因转录的调控、耳朵和黑色素细胞的发育以及DNA甲基化等生物学过程。基因T2的研究对于深入理解基因复制保留机制、病毒基因调控、细胞分化和DNA甲基化等方面具有重要意义。
参考文献：
1. Zheng, Ming, Zhang, Liang, Tang, Min, Wang, Hanzhong, Hua, Wei. 2019. Knockout of two BnaMAX1 homologs by CRISPR/Cas9-targeted mutagenesis improves plant architecture and increases yield in rapeseed (Brassica napus L.). In Plant biotechnology journal, 18, 644-654. doi:10.1111/pbi.13228. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/31373135/
2. Jia, W, Naqi, S A. . Sequence analysis of gene 3, gene 4 and gene 5 of avian infectious bronchitis virus strain CU-T2. In Gene, 189, 189-93. doi:. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/9168126/
3. Cox, Brandon C, Liu, Zhiyong, Lagarde, Marcia M Mellado, Zuo, Jian. 2012. Conditional gene expression in the mouse inner ear using Cre-loxP. In Journal of the Association for Research in Otolaryngology : JARO, 13, 295-322. doi:10.1007/s10162-012-0324-5. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/22526732/
4. Aktary, Zackie, Corvelo, Andre, Estrin, Camille, Larue, Lionel. 2019. Sequencing two Tyr::CreERT2 transgenic mouse lines. In Pigment cell & melanoma research, 33, 426-434. doi:10.1111/pcmr.12842. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/31679174/
5. Mitani, Y, Takahashi, H, Satoh, N. . An ascidian T-box gene As-T2 is related to the Tbx6 subfamily and is associated with embryonic muscle cell differentiation. In Developmental dynamics : an official publication of the American Association of Anatomists, 215, 62-8. doi:. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/10340757/
6. Miner, Z, Hattman, S. . Molecular cloning, sequencing, and mapping of the bacteriophage T2 dam gene. In Journal of bacteriology, 170, 5177-84. doi:. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/3053648/
7. Okker, R J, Pees, E, Bom, V. . Partial exclusion of bacteriophage T2 by bacteriophage T4: an exclusion-resistant mutation in gene 56 of T2. In The Journal of general virology, 53, 13-9. doi:. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/7276910/
