智鼠故事 
C57BL/6JCya-Vcpkmtem1flox/Cya 条件性基因敲除小鼠
复苏/繁育服务
产品名称：
Vcpkmt-flox
产品编号：
S-CKO-05284
品系背景：
C57BL/6JCya
* 使用本品系发表的文献需注明：Vcpkmt-flox mice (Strain S-CKO-05284) were purchased from Cyagen.
交付类型
周龄
性别
基因型
数量
只
基本信息
品系名称
C57BL/6JCya-Vcpkmtem1flox/Cya
品系编号
CKOCMP-207965-Vcpkmt-B6J-VA
产品编号
S-CKO-05284
基因名
Vcpkmt
品系背景
C57BL/6JCya
基因别称
Gm71；VCP-KMT；Mettl21d；Mettl221d
NCBI号
修饰方式
条件性基因敲除
品系说明
该品系是基于策略设计时的数据库信息制作而成，建议您在购买前查询最新的数据库和相关文献，以获取最准确的表型信息。
小鼠表型
MGI:2684917 Mice homozygous for a knock-out allele exhibit no abnormal phenotype.
质控标准
精子检测
① 冷冻前验证精子活力观察
② 冷冻验证每批次进行复苏验证
品系状态
活体
环境标准
SPF
供应地区
中国
品系详情
Vcpkmt位于小鼠的12号染色体，采用基因编辑技术，通过高通量电转受精卵方式，获得Vcpkmt基因条件性敲除小鼠，性成熟后取精子冻存。
Vcpkmt-flox小鼠是由赛业生物（Cyagen）采用基因编辑技术构建的条件性基因敲除小鼠。Vcpkmt基因位于小鼠12号染色体上，包含6个外显子，ATG起始密码子位于1号外显子，TGA终止密码子位于6号外显子。条件性敲除区域（cKO区域）位于4至6号外显子，包含240个碱基对的编码序列。删除该区域会导致小鼠Vcpkmt基因功能的丧失。
Vcpkmt-flox小鼠模型的构建过程包括使用BAC克隆RP23-76H7作为模板，通过PCR技术生成同源臂和cKO区域。随后，将构建的靶向载体和核糖核蛋白（RNP）共同注入受精卵中，经过胚胎发育和基因型鉴定，最终得到Vcpkmt-flox小鼠模型。
此外，对于携带敲除等位基因的小鼠，没有观察到异常表型。4至6号外显子覆盖了编码区域的34.65%。3号内含子的大小为1038个碱基对。有效的cKO区域大小约为3.8千碱基对。这一策略是基于现有数据库中的遗传信息设计的。由于生物过程的复杂性，目前技术无法预测loxP插入对基因转录、RNA剪接和蛋白质翻译的潜在风险。
Vcpkmt-flox小鼠模型可用于研究Vcpkmt基因在小鼠体内的功能，特别是在条件性敲除区域对基因功能的影响。通过基因编辑技术构建的Vcpkmt-flox小鼠模型为研究人员提供了一个重要的工具，用于研究Vcpkmt基因在小鼠发育和生理过程中的作用。
基因研究概述
Vcpkmt，也称为Valosin-containing protein (VCP) lysine methyltransferase，是一种重要的蛋白质甲基转移酶。VCP是一种保守的ATP酶，参与多种细胞过程，包括蛋白质折叠、细胞分裂、细胞凋亡和DNA损伤修复。VCPKMT能够将甲基转移到VCP蛋白的赖氨酸315位点上，从而影响VCP的功能和活性。
Vcpkmt基因在所有组织中广泛表达，并在细胞质中定位。Vcpkmt的缺失会导致VCP的赖氨酸315位点甲基化完全消失。Vcpkmt-/-小鼠在发育和生存方面没有明显的病理表型，其体重、寿命和急性耐力与野生型小鼠相当。这些结果表明，VCPKMT是VCP赖氨酸315位点甲基化的必需酶，但在非应激条件下，VCPKMT不是发育和生存所必需的[1]。
在肿瘤研究中，Vcpkmt基因的表达与肿瘤的生物学特性有关。例如，在舌鳞状细胞癌中，Vcpkmt基因的表达与阳性手术切缘相关。Vcpkmt基因表达升高与肿瘤的高级别、增殖水平和肿瘤间质中较少的成纤维细胞和内皮细胞相关。这些发现为舌鳞状细胞癌的生物标志物识别和精确手术提供了有趣的视角[2]。
此外，Vcpkmt基因的突变与马凡综合征样综合征有关。在一个近亲结婚的家庭中，两个患有马凡综合征样综合征的兄弟姐妹被发现携带Vcpkmt基因的纯合突变。这些突变导致了VCP蛋白的功能障碍，可能参与了这种遗传性疾病的发生[3]。
除了在肿瘤和遗传性疾病中的作用外，Vcpkmt基因还与神经退行性疾病相关。例如，在土耳其萨卡里亚市，患有肌萎缩侧索硬化症（ALS）的患者被发现携带Vcpkmt基因的突变。这些突变可能导致VCP蛋白的功能异常，进而导致神经退行性疾病的发生[4]。
综上所述，Vcpkmt基因在多种生物学过程中发挥重要作用，包括细胞过程、肿瘤发生和神经退行性疾病。Vcpkmt基因的突变和表达异常与多种疾病的发生和发展密切相关。进一步研究Vcpkmt基因的功能和机制，有助于深入理解这些疾病的发病机制，并为疾病的治疗和预防提供新的思路和策略。
参考文献：
1. Fusser, Markus, Kernstock, Stefan, Aileni, Vinay Kumar, Falnes, Pål Ø, Klungland, Arne. 2015. Lysine Methylation of the Valosin-Containing Protein (VCP) Is Dispensable for Development and Survival of Mice. In PloS one, 10, e0141472. doi:10.1371/journal.pone.0141472. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/26544960/
2. Saidak, Zuzana, Pascual, Caroline, Bouaoud, Jebrane, Page, Cyril, Galmiche, Antoine. 2019. A three-gene expression signature associated with positive surgical margins in tongue squamous cell carcinomas: Predicting surgical resectability from tumour biology? In Oral oncology, 94, 115-120. doi:10.1016/j.oraloncology.2019.05.020. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/31178206/
3. Bizzari, Sami, El-Bazzal, Lara, Nair, Pratibha, Delague, Valerie, Mégarbané, André. 2020. Recessive marfanoid syndrome with herniation associated with a homozygous mutation in Fibulin-3. In European journal of medical genetics, 63, 103869. doi:10.1016/j.ejmg.2020.103869. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/32006683/
4. Kotan, Dilcan, Özözen Ayas, Zeynep, Tunca, Ceren, Akçimen, Fulya, Başak, A Nazlı. 2020. Phenotypic and genotypic features of patients diagnosed with ALS in the city of Sakarya, Turkey. In Acta neurologica Belgica, 120, 1411-1418. doi:10.1007/s13760-020-01441-z. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/32671691/
