Ccl7-flox 基因敲除小鼠

CCL7，也称为MCP-3（Monocyte Chemotactic Protein 3），是一种重要的趋化因子，属于C-C趋化因子家族。CCL7在多种生物学过程中发挥着关键作用，包括免疫细胞募集、炎症反应、肿瘤发生和发展等。CCL7通过与多种趋化因子受体结合，如CCR1、CCR2、CCR3、CCR5和CCR10，介导免疫细胞向炎症部位迁移和浸润。CCL7的生物学功能多样，既可以促进炎症反应，也可以抑制炎症反应，具体取决于不同的病理生理环境和细胞类型。

CCL7在非小细胞肺癌（NSCLC）的免疫治疗中发挥着重要作用。研究发现，CCL7在NSCLC肿瘤组织中高表达，与肿瘤微环境（TME）中常规树突状细胞1（cDC1）的浸润和NSCLC患者的总生存期呈正相关。CCL7通过募集cDC1到TME，促进T细胞扩增，从而增强抗肿瘤免疫。CCL7缺乏会损害TME中cDC1的浸润和CD8+和CD4+ T细胞的扩增，从而促进肿瘤生长。CCL7的给予可以单独或与抗PD-1联合使用，显著抑制肿瘤生长并延长KP和KL小鼠的生存期。这些发现表明，CCL7可能作为NSCLC免疫治疗的生物标志物和辅助因子[1]。

CCL7在肺损伤中也发挥着重要作用。研究发现，p21在受到辐射和博来霉素（BLM）处理的肺上皮细胞系中促进CCL7的表达，从而促进巨噬细胞的趋化。p21的表达与损伤肺组织中巨噬细胞的浸润呈正相关。p21促进CCL7的释放，并有助于巨噬细胞在体外趋化，这为更好地理解肺损伤中的炎症反应提供了新的见解[2]。

CCL7在肿瘤免疫逃逸中也发挥着重要作用。研究发现，FMRP在肿瘤中异常高表达，通过抑制CCL7的表达来抑制免疫攻击。FMRP缺乏的肿瘤被活化的T细胞浸润，损害肿瘤生长并增强小鼠的存活率。FMRP的免疫抑制作用是多因素的，包括抑制CCL7的表达和上调三种免疫调节因子。FMRP的癌症网络与癌症患者的预后不良和治疗效果相关[3]。

CCL7在银屑病的治疗中也发挥着重要作用。研究发现，CS草药对可以显著改善银屑病病变，减少皮肤病变中炎症细胞的浸润和角质形成细胞的增殖。网络药理学预测TNF、JNK、IL-6和IL-1β可能是CS的潜在靶点。RNA测序数据揭示CS可以显著调节与Th17反应相关的基因和信号通路，如IL-36、IL-1β、CCL2、CXCL16、角蛋白14、角蛋白5、抗菌肽S100A8和S100A9以及MAPK、mTOR和其他信号通路。进一步实验数据证实，CS治疗显著降低了CCL2、CCL7、IL1F6、IL-17、IL-23、IL-1β、TNF-α和IL-6等炎症细胞因子和因子的表达，并抑制了p38和ERK1/2的磷酸化。这表明CS通过抑制MAPK信号通路发挥其治疗作用。此外，代谢组学分析显示，CS治疗改善了七个代谢途径，包括苯丙氨酸、酪氨酸、丙酮酸代谢、肉碱代谢等。四种关键代谢物（L-精氨酸、L-苯丙氨酸、L-肉碱、O-乙酰肉碱）和九个差异基因（CMA1、PCBD2、TPSAB1、TPSB2等）被鉴定出来，这些代谢物和基因影响了氨基酸代谢、肉碱代谢和其他途径，导致Th17细胞在银屑病病变中的浸润。CS可以通过减少由MAPK通路介导的细胞因子和趋化因子的表达，改善氨基酸和肉碱代谢，从而减轻IMQ诱导的银屑病样皮炎[4]。

CCL7在胰腺癌的神经周围侵袭中也发挥着重要作用。研究发现，TIMP1和CCL7在胰腺癌细胞和施万细胞（SCs）之间形成旁分泌反馈回路。胰腺癌细胞衍生的TIMP1通过CD63/PI3K/AKT信号通路促进SCs增殖和迁移。SCs分泌的CCL7增强胰腺癌细胞的迁移、侵袭和TIMP1的表达，通过CCR2/STAT3信号通路。当在体外和体内敲低TIMP1时，PDAC细胞和SCs之间的PNI被阻断。TIMP1、CCL7和SC相关标记与PDAC患者的PNI和预后相关。SCs通过TIMP1-CCL7旁分泌反馈回路与PDAC细胞合作，促进PNI。在PDAC细胞中敲低TIMP1抑制PNI。开发破坏TIMP1-CCL7反馈回路的策略可能有助于抑制PDAC中的PNI[5]。

CCL7在肠道炎症中也发挥着重要作用。研究发现，FBXW7在炎症肠道中的表达增加与IBD的严重程度显著相关。巨噬细胞FBXW7缺乏保护小鼠免受DSS和TNBS诱导的结肠炎。FBXW7缺乏导致结肠CX3CR1hi驻留巨噬细胞产生趋化因子CCL2和CCL7减少，并减少结肠炎结肠组织中CX3CR1int促炎巨噬细胞的积聚。接受AAV-shFbxw7给药的小鼠表现出显著的生存率提高和结肠炎减轻。机制筛选表明，FBXW7通过降解组蛋白-赖氨酸N-甲基转移酶EZH2来抑制H3K27me3修饰，并促进巨噬细胞中Ccl2和Ccl7的表达。总的来说，我们的结果表明，FBXW7降解EZH2并增加CX3CR1hi巨噬细胞中的Ccl2/Ccl7，这促进CX3CR1int促炎巨噬细胞被招募到局部结肠组织。靶向FBXW7可能代表一种潜在的肠道炎症干预治疗方法[6]。

CCL7在利什曼原虫感染后的皮肤炎症中也发挥着重要作用。研究发现，CCL7在感染后1-2周在皮肤中特异性上调，但其对L. major的控制作用尚不清楚。CCL7缺陷小鼠感染L. major导致感染皮肤在感染后2周出现意外的炎症增加。观察到免疫细胞亚群的广泛增加，但主要由中性粒细胞的浸润主导。增加的中性粒细胞招募与感染皮肤中IL-17基因谱的增强相关。CCL7在体外直接拮抗中性粒细胞的迁移，并且在体内添加CCL7可以特异性地减少感染皮肤中的中性粒细胞浸润，揭示了CCL7在限制L. major感染期间中性粒细胞招募方面的意外作用。CCL7缺陷小鼠中增强的中性粒细胞浸润改变了L. major感染宿主细胞的平衡，增加了感染中性粒细胞与单核细胞/巨噬细胞的比率。为了确定CCL7缺乏对L. major控制的影响，我们分析了感染部位皮肤、引流淋巴结和脾脏的寄生虫负荷。CCL7缺陷小鼠支持与野生型C57BL/6小鼠相当的强健的皮肤寄生虫控制。相比之下，CCL7缺乏导致脾脏中寄生虫传播增加和寄生虫控制不良。我们的研究表明，CCL7在利什曼原虫感染期间负性调节皮肤炎症，特别是中性粒细胞。我们提出，CCL7介导的早期免疫反应在皮肤中的抑制可能限制了寄生虫的传播能力，而不会损害皮肤控制[7]。

CCL7在冠状动脉性心脏病（CHD）的发生中也发挥着重要作用。研究发现，CCL7基因转录本的3'非翻译区的一个单核苷酸变异，rs17735770，与男性群体中降低的心血管风险相关。该变异改变了局部mRNA结构，包括miR-23ab结合位点的增加，导致CCL7的翻译增加。rs17735770基因变异导致CCL7表达增加，CCL7作为CCR2的潜在拮抗剂在炎症部位发挥作用，可能在动脉粥样硬化的发展中发挥重要作用[8]。

CCL7在大脑缺血后的神经炎症中也发挥着重要作用。研究发现，L-乳酸通过HIF-1α介导的CCL7信号通路调节小鼠脑缺血后的小胶质细胞炎症反应。L-乳酸补充减少了梗死体积、神经元凋亡和神经功能障碍。L-乳酸降低了CD86、iNOS、IL-6、TNF-α的表达，并升高了精氨酸酶-1、CD206、Ym1、TGF-β和IL-10的表达。一致地，L-乳酸抑制了NF-κB信号通路。此外，L-乳酸上调了HIF-1α在小胶质细胞中的表达，而HIF-1α抑制剂逆转了L-乳酸对脑损伤和神经炎症的影响。此外，CCL7被鉴定为L-乳酸在OGD处理的BV2细胞中下调的炎症基因。还发现，在大鼠脑缺血再灌注损伤后24小时，梗死周围CCL7高表达，而L-乳酸处理抑制了CCL7的表达。然而，HIF-1α抑制剂逆转了L-乳酸处理对CCL7表达的影响。最后，补充重组CCL7逆转了L-乳酸治疗后MCAO后减轻的神经炎症和神经保护作用。我们得出结论，L-乳酸通过HIF-1α介导的CCL7/NF-κB信号通路调节小胶质细胞炎症反应，并减轻脑缺血损伤。L-乳酸治疗的有益作用可能涉及HIF-1α介导的CCL7/NF-κB信号通路的抑制[9]。

CCL7在骨关节炎（OA）的发病机制中也发挥着重要作用。研究发现，CCL2/CCR2信号通路而不是CCL5/CCR5信号通路介导单核细胞募集、炎症和软骨破坏。缺乏CCL2或CCR2但不是CCL5或CCR5的小鼠在OA中受到保护，并且其关节中局部单核细胞/巨噬细胞数量减少。在OA患者的滑膜液中，CCR2配体（CCL2、CCL7和CCL8）的水平升高，而CCR5配体（CCL3、CCL4和CCL5）的水平没有升高。我们发现，CCR2+细胞在人类OA滑膜中丰富，并且CCR2+巨噬细胞排列、侵入并与OA软骨的侵蚀相关。进一步地，阻断CCL2/CCR2信号通路显著减轻了小鼠OA中的巨噬细胞积聚、滑膜炎和软骨损伤。我们的研究结果表明，通过CCL2/CCR2募集的单核细胞，而不是通过CCL5/CCR5募集的单核细胞，传播OA中的炎症和组织损伤。选择性靶向CCL2/CCR2系统代表了一种有希望的OA治疗方法[10]。

综上所述，CCL7在多种生物学过程中发挥着重要作用，包括免疫细胞募集、炎症反应、肿瘤发生和发展、肺损伤、肠道炎症、皮肤炎症、心血管疾病和神经炎症。CCL7通过与多种趋化因子受体结合，介导免疫细胞向炎症部位的迁移和浸润，从而影响炎症反应的强度和持续时间。CCL7的生物学功能多样，既可以促进炎症反应，也可以抑制炎症反应，具体取决于不同的病理生理环境和细胞类型。CCL7的研究有助于深入理解趋化因子在免疫和炎症反应中的作用机制，为相关疾病的治疗和预防提供新的思路和策略。