智鼠故事 
C57BL/6JCya-Ccl2em1flox/Cya 条件性基因敲除小鼠
复苏/繁育服务
产品名称：
Ccl2-flox
产品编号：
S-CKO-04952
品系背景：
C57BL/6JCya
* 使用本品系发表的文献需注明：Ccl2-flox mice (Strain S-CKO-04952) were purchased from Cyagen.
交付类型
周龄
性别
基因型
数量
只
基本信息
品系名称
C57BL/6JCya-Ccl2em1flox/Cya
品系编号
CKOCMP-20296-Ccl2-B6J-VA
产品编号
S-CKO-04952
基因名
Ccl2
品系背景
C57BL/6JCya
基因别称
JE；HC11；MCAF；MCP1；MCP-1；Scya2；Sigje；SMC-CF
NCBI号
修饰方式
条件性基因敲除
品系说明
该品系是基于策略设计时的数据库信息制作而成，建议您在购买前查询最新的数据库和相关文献，以获取最准确的表型信息。
小鼠表型
MGI:98259 Mice homozygous for a knock-out allele exhibit defective macrophage recruitment, abnormal choroid morphology, photoreceptor degeneration, and altered response to injury, infection, alcohol, and a high fat diet.
质控标准
精子检测
① 冷冻前验证精子活力观察
② 冷冻验证每批次进行复苏验证
品系状态
在研小鼠
环境标准
SPF
供应地区
中国
品系详情
Ccl2位于小鼠的11号染色体，采用基因编辑技术，通过高通量电转受精卵方式，获得Ccl2基因条件性敲除小鼠，性成熟后取精子冻存。
Ccl2-flox小鼠模型是由赛业生物（Cyagen）采用基因编辑技术构建的条件性敲除小鼠。Ccl2基因位于小鼠11号染色体上，由三个外显子组成，其中ATG起始密码子在1号外显子，TAG终止密码子在3号外显子。条件性敲除区域（cKO区域）位于2号外显子到3号外显子之间，包含371个碱基对的编码序列。删除该区域会导致小鼠Ccl2基因功能的丧失。Ccl2-flox小鼠模型的构建过程包括将基因编辑技术生成的靶向载体注入受精卵。随后，对出生的小鼠进行PCR和测序分析进行基因型鉴定。此外，对于携带敲除等位基因的小鼠，表现出缺陷的巨噬细胞招募，异常脉络膜形态，光感受器退化，以及对应激、感染、酒精和高脂肪饮食的反应改变。该模型可用于研究Ccl2基因在小鼠体内的功能，以及其在疾病发生发展中的作用。
基因研究概述
CCL2，也称为单核细胞趋化蛋白-1（MCP-1），是一种在多种生物学过程中发挥重要作用的细胞因子。CCL2属于CC趋化因子家族，主要由单核细胞、巨噬细胞、树突状细胞和内皮细胞等细胞类型表达。CCL2的主要功能是趋化单核细胞和巨噬细胞，参与炎症反应、免疫调节和肿瘤发生等过程。
CCL2在肿瘤发生和进展中起着关键作用。肿瘤相关巨噬细胞（TAMs）是肿瘤微环境中最丰富的炎症浸润细胞，与淋巴转移密切相关。研究表明，CCL2在LN阳性膀胱癌中表达上调，并与淋巴转移和预后相关。LNMAT1是一种长链非编码RNA，其通过表观遗传激活CCL2的表达，进而招募巨噬细胞进入肿瘤，促进淋巴转移。此外，CCL2还通过VEGF-C的分泌促进淋巴管生成，从而促进淋巴转移[1]。
在肿瘤发生过程中，肿瘤需要逃避免疫系统，因此会破坏参与抗原处理和呈递的基因或上调抑制性免疫检查点基因。研究发现，在存在适应性免疫系统的肿瘤模型中，肿瘤抑制基因（TSGs）的丢失显著富集，这表明肿瘤需要避免适应性免疫系统，从而促进肿瘤发生[2]。
肿瘤相关巨噬细胞（TAMs）通过其免疫抑制活动强烈影响结直肠癌（CRC）的进展。HMGA2是一种癌基因，在CRC细胞中异常过表达。研究发现，HMGA2在癌细胞中促进巨噬细胞招募和M2极化，其机制是通过直接结合STAT3启动子激活其转录，进而诱导CCL2的分泌。此外，HMGA2表达与患者预后呈正相关，提示HMGA2可能成为CRC治疗的新靶点[3]。
在肺结核患者中，CCL2基因多态性与疾病的易感性和抵抗性相关。研究发现，CCL2基因启动子区的-2518A/G多态性与男性患者的肺结核易感性相关，而女性患者则表现出对肺结核的抵抗力[4]。
p53是一种重要的转录因子，参与调控多种炎症基因的表达。研究发现，p53蛋白与CCL2基因的5'非翻译区（5'UTR）结合，并抑制CCL2的诱导。此外，p53的衍生物（p53pep170）也能够下调CCL2的启动子活性，这表明p53及其衍生物是CCL2基因表达的重要调节因子[5]。
miRNA是一种非编码RNA，参与调控基因表达。研究发现，miR-33能够抑制CCL2的表达，其机制是通过与CCL2基因的3'非翻译区（3'UTR）结合，从而抑制CCL2的转录和翻译。此外，miR-33的表达水平与OA患者的CCL2水平呈负相关，提示miR-33在OA的发生发展中发挥重要作用[6]。
CCL2基因多态性与前列腺癌的侵袭性和转移性相关。研究发现，CCL2基因的-1811A/G、-2835A/C和+3726T/C多态性与前列腺癌的侵袭性和转移性相关。此外，CCL2基因的H5单倍型频率在D'Amico良好风险特征的患者中更高，提示CCL2基因多态性与前列腺癌的进展和转移相关[7]。
CCL2和FCGR2A基因多态性与登革热病毒感染患者的血小板减少症相关。研究发现，CCL2基因的c.-2518A>G多态性与登革热病毒感染患者的血小板减少症相关，而FCGR2A基因的p.R131H多态性与血小板减少症无关[8]。
综上所述，CCL2在多种生物学过程中发挥重要作用，包括炎症反应、免疫调节和肿瘤发生等。CCL2在肿瘤微环境中通过招募巨噬细胞和促进淋巴转移等机制促进肿瘤的发生和进展。此外，CCL2基因的多态性与多种疾病的易感性和抵抗性相关。因此，CCL2可能成为治疗多种疾病的新靶点，为疾病的治疗和预防提供新的思路和策略。
参考文献：
1. Chen, Changhao, He, Wang, Huang, Jian, Dong, Wen, Lin, Tianxin. 2018. LNMAT1 promotes lymphatic metastasis of bladder cancer via CCL2 dependent macrophage recruitment. In Nature communications, 9, 3826. doi:10.1038/s41467-018-06152-x. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/30237493/
2. Martin, Timothy D, Patel, Rupesh S, Cook, Danielle R, Haigis, Kevin M, Elledge, Stephen J. 2021. The adaptive immune system is a major driver of selection for tumor suppressor gene inactivation. In Science (New York, N.Y.), 373, 1327-1335. doi:10.1126/science.abg5784. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/34529489/
3. Wang, Xin, Wang, Jian, Zhao, Jiahui, Chen, Jing, Wu, Jingjing. 2022. HMGA2 facilitates colorectal cancer progression via STAT3-mediated tumor-associated macrophage recruitment. In Theranostics, 12, 963-975. doi:10.7150/thno.65411. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/34976223/
4. Singh, B, Chitra, J, Selvaraj, P. 2013. CCL2, CCL3 and CCL4 gene polymorphisms in pulmonary tuberculosis patients of South India. In International journal of immunogenetics, 41, 98-104. doi:10.1111/iji.12085. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/23998687/
5. Tang, X, Asano, M, O'Reilly, A, Yang, Y, Amar, S. . p53 is an important regulator of CCL2 gene expression. In Current molecular medicine, 12, 929-43. doi:. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/22804246/
6. Wei, Meng, Xie, Qingyun, Zhu, Jun, Mo, Liweng, Wang, Shuai. 2016. MicroRNA-33 suppresses CCL2 expression in chondrocytes. In Bioscience reports, 36, . doi:10.1042/BSR20160068. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/27129293/
7. Sun, Tong, Mary, Lee Gwo-Shu, Oh, William K, Pienta, Kenneth J, Kantoff, Philip W. 2010. Inherited variants in the chemokine CCL2 gene and prostate cancer aggressiveness in a Caucasian cohort. In Clinical cancer research : an official journal of the American Association for Cancer Research, 17, 1546-52. doi:10.1158/1078-0432.CCR-10-2015. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/21135144/
8. Alagarasu, Kalichamy, Bachal, Rupali V, Damle, Indraneel, Shah, Paresh S, Cecilia, Dayaraj. 2015. Association of FCGR2A p.R131H and CCL2 c.-2518 A>G gene variants with thrombocytopenia in patients with dengue virus infection. In Human immunology, 76, 819-22. doi:10.1016/j.humimm.2015.09.042. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/26429304/
