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C57BL/6JCya-Rlimem1flox/Cya 条件性基因敲除小鼠
复苏/繁育服务
产品名称:
Rlim-flox
产品编号:
S-CKO-04812
品系背景:
C57BL/6JCya
小鼠资源库
* 使用本品系发表的文献需注明:Rlim-flox mice (Strain S-CKO-04812) were purchased from Cyagen.
交付类型
周龄
性别
基因型
数量
基本信息
品系名称
C57BL/6JCya-Rlimem1flox/Cya
品系编号
CKOCMP-19820-Rlim-B6J-VA
产品编号
S-CKO-04812
基因名
Rlim
品系背景
C57BL/6JCya
基因别称
Ha1r;Rlim1;Rnf12
NCBI号
修饰方式
条件性基因敲除
品系说明
该品系是基于策略设计时的数据库信息制作而成,建议您在购买前查询最新的数据库和相关文献,以获取最准确的表型信息。
小鼠表型
MGI:1342291 Mice heterozygous for a knock-out allele exhibit female-specific embryonic lethality when the allele is inherited maternally due to disruption in X-inactivation.
质控标准
精子检测
① 冷冻前验证精子活力观察
② 冷冻验证每批次进行复苏验证
品系状态
活体
环境标准
SPF
供应地区
中国
品系详情
Rlim位于小鼠的X号染色体,采用基因编辑技术,通过高通量电转受精卵方式,获得Rlim基因条件性敲除小鼠,性成熟后取精子冻存。
Rlim-flox小鼠模型是由赛业生物(Cyagen)采用基因编辑技术构建的条件性敲除小鼠。Rlim基因位于小鼠X号染色体上,包含5个外显子,其中ATG起始密码子在3号外显子,TGA终止密码子在5号外显子。该模型的条件性敲除区域(cKO区域)位于5号外显子,包含1553个碱基对的编码序列。删除该区域将导致小鼠Rlim基因功能的丧失。Rlim-flox小鼠模型的构建过程包括利用基因编辑技术生成靶向载体,并通过PCR扩增得到同源臂和cKO区域。然后,将核糖核蛋白(RNP)和靶向载体共同注入受精卵中。随后,对出生的小鼠进行PCR和测序分析进行基因型鉴定。此外,Rlim-flox小鼠模型可用于研究Rlim基因在小鼠体内的功能。
基因研究概述
Rlim,也称为Rnf12,是一种X染色体编码的E3泛素连接酶,在哺乳动物中发挥着重要的作用。它通过介导泛素化过程参与基因表达的调控,特别是在X染色体失活(XCI)和神经认知功能方面具有显著影响。
Rlim在X染色体失活中起着关键作用。XCI是哺乳动物中性别染色体剂量补偿的一种机制,其中女性细胞中的两个X染色体中有一个会被选择性沉默。Rlim通过与Xist(X染色体失活特异性转录物)相互作用,促进Xist的转录和沉默作用,从而实现XCI。在女性小鼠的早期胚胎发育中,Rlim对于维持高水平的Xist RNA和Xist云的形成至关重要,这对于X染色体的沉默至关重要[3]。Rlim还与Rex1(Zfp42)相互作用,形成Rlim-Rex1轴,在印记形式的XCI(iXCI)中起主要调节作用,但在随机形式的XCI(rXCI)中的作用尚存在争议[2,7]。
除了在XCI中的作用,Rlim还在神经认知功能中发挥着重要作用。Rlim基因的突变或缺失与智力障碍(ID)有关,尤其是在男性中。例如,RLIM基因的复制与Xq13.2-q13.3位点相关的ID有关,这些个体表现出独特的面部特征、行为特征和癫痫发作[1]。此外,RLIM基因中的错义变异已被确定为男性X连锁ID的原因,而杂合女性通常智力正常,并且X染色体失活高度偏向[1]。在RLIM基因复制的男性中,RLIM mRNA和蛋白水平显著升高,而MDM2(RLIM的E3连接酶活性的一个靶点)的表达则下调[1]。
Rlim还在生殖系统中发挥作用。在雌性小鼠中,Rlim对于维持印记的XCI在胚胎的滋养层组织中至关重要。然而,在雄性小鼠中,Rlim在睾丸中高度表达,尤其是在圆形精子细胞和 sertoli 细胞中。Rlim基因的系统缺失导致成熟精子数量减少,精子含有过多的细胞质,导致精子活力和体外受精率降低[4]。这些结果表明Rlim在雄性生殖中的作用,特别是在精子发生过程中[4]。
除了在X染色体失活和神经认知功能中的作用,Rlim还在性别比例方面发挥作用。在胚胎中敲除母系Rlim基因导致后代中雄性比例偏多,这表明Rlim在性别决定中起着重要作用。然而,这种性别比例偏多伴随着后代数量的减少,并且不能通过超排卵来补偿[5]。
Rlim是一个RING H2锌指蛋白,作为LIM同源结构域转录因子的负性共调节因子发挥作用。它在多种组织中表达,包括大脑、心脏、肝脏和肾脏[6]。Rlim的基因座位于小鼠和人类X染色体的中央区域,由至少五个外显子和四个内含子组成[6]。
综上所述,Rlim是一种X染色体编码的E3泛素连接酶,在X染色体失活、神经认知功能和生殖系统中发挥着重要作用。它在维持性别染色体剂量补偿、调节基因表达和影响神经认知功能方面起着关键作用。Rlim的研究有助于深入理解X染色体失活、神经认知功能和生殖过程的分子机制,为相关疾病的诊断和治疗提供新的思路和策略。
参考文献:
1. Palmer, Elizabeth E, Carroll, Renee, Shaw, Marie, Field, Mike, Gecz, Jozef. 2020. RLIM Is a Candidate Dosage-Sensitive Gene for Individuals with Varying Duplications of Xq13, Intellectual Disability, and Distinct Facial Features. In American journal of human genetics, 107, 1157-1169. doi:10.1016/j.ajhg.2020.10.005. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/33159883/
2. Wang, Feng, Chander, Ashmita, Yoon, Yeonsoo, Mager, Jesse, Bach, Ingolf. 2023. Roles of the Rlim-Rex1 axis during X chromosome inactivation in mice. In Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America, 120, e2313200120. doi:10.1073/pnas.2313200120. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/38113263/
3. Wang, Feng, Shin, JongDae, Shea, Jeremy M, Rando, Oliver J, Bach, Ingolf. 2016. Regulation of X-linked gene expression during early mouse development by Rlim. In eLife, 5, . doi:10.7554/eLife.19127. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/27642011/
4. Wang, Feng, Gervasi, Maria Gracia, Bošković, Ana, Strittmatter, Lara, Bach, Ingolf. 2021. Deficient spermiogenesis in mice lacking Rlim. In eLife, 10, . doi:10.7554/eLife.63556. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/33620316/
5. Peng, Jingfeng, Hou, Yunfei, Wu, Shici, Li, Zicong, Wu, Zhenfang. 2023. Knockout of Rlim Results in a Sex Ratio Shift toward Males but Superovulation Cannot Compensate for the Reduced Litter Size. In Animals : an open access journal from MDPI, 13, . doi:10.3390/ani13061079. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/36978620/
6. Ostendorff, H P, Bossenz, M, Mincheva, A, Lichter, P, Bach, I. . Functional characterization of the gene encoding RLIM, the corepressor of LIM homeodomain factors. In Genomics, 69, 120-30. doi:. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/11013082/
7. Wang, Feng, Mehta, Poonam, Bach, Ingolf. . How does the Xist activator Rlim/Rnf12 regulate Xist expression? In Biochemical Society transactions, 52, 1099-1107. doi:10.1042/BST20230573. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/38747697/