智鼠故事 
C57BL/6JCya-Rlbp1em1flox/Cya 条件性基因敲除小鼠
复苏/繁育服务
产品名称：
Rlbp1-flox
产品编号：
S-CKO-04807
品系背景：
C57BL/6JCya
* 使用本品系发表的文献需注明：Rlbp1-flox mice (Strain S-CKO-04807) were purchased from Cyagen.
交付类型
周龄
性别
基因型
数量
只
基本信息
品系名称
C57BL/6JCya-Rlbp1em1flox/Cya
品系编号
CKOCMP-19771-Rlbp1-B6J-VA
产品编号
S-CKO-04807
基因名
Rlbp1
品系背景
C57BL/6JCya
基因别称
CRALBP；3110056M11Rik
NCBI号
修饰方式
条件性基因敲除
品系说明
该品系是基于策略设计时的数据库信息制作而成，建议您在购买前查询最新的数据库和相关文献，以获取最准确的表型信息。
小鼠表型
MGI:97930 Mice homozygous for disruptions in this gene display delayed dark adaptation as well as reduced retinal degeneration.
质控标准
精子检测
① 冷冻前验证精子活力观察
② 冷冻验证每批次进行复苏验证
品系状态
活体
环境标准
SPF
供应地区
中国
品系详情
Rlbp1位于小鼠的7号染色体，采用基因编辑技术，通过高通量电转受精卵方式，获得Rlbp1基因条件性敲除小鼠，性成熟后取精子冻存。
Rlbp1-flox小鼠是由赛业生物（Cyagen）采用基因编辑技术构建的条件性敲除小鼠。Rlbp1基因位于小鼠7号染色体上，由9个外显子组成，其中ATG起始密码子在3号外显子，TGA终止密码子在9号外显子。条件性敲除区域（cKO区域）位于5号外显子，包含205个碱基对的编码序列。删除该区域会导致小鼠Rlbp1基因功能的丧失。Rlbp1-flox小鼠模型的构建过程包括将靶向载体和基因编辑技术共同应用于小鼠胚胎。随后，对出生的小鼠进行PCR和测序分析进行基因型鉴定。携带敲除等位基因的小鼠表现出延迟暗适应和减少的视网膜变性。此外，敲除5号外显子会导致基因移码，并覆盖21.56%的编码区域。5'-loxP位点的插入位于第四个内含子，长度为1774个碱基对，而3'-loxP位点的插入位于第五个内含子，长度为1495个碱基对。有效的cKO区域长度约为2.4千碱基对。该策略基于现有数据库中的遗传信息设计，但由于生物过程的复杂性，无法预测loxP插入对基因转录、RNA剪接和蛋白质翻译的影响。Rlbp1-flox小鼠模型可用于研究Rlbp1基因在小鼠体内的功能，并探索其在视网膜变性和暗适应中的作用。
基因研究概述
RLBP1，也称为视网膜醛结合蛋白1，是一种在视网膜色素上皮（RPE）和视网膜Müller细胞中发现的蛋白质。它在视觉循环中起着关键作用，通过充当11-顺式视黄醇的受体，从异构酶反应中接受11-顺式视黄醇。RLBP1的突变导致几种视网膜疾病，包括Bothnia营养不良、点状白斑症和纽芬兰杆-锥营养不良[1]。
在遗传性视网膜疾病（IRDs）中，RLBP1是一个重要的基因，其编码的CRALBP蛋白对于视杆细胞和视锥细胞的视觉循环至关重要。CRALBP在RPE中主要发挥作用，但也存在于视网膜Müller细胞中。RLBP1的变异导致三种不同的临床亚型：Bothnia营养不良、点状白斑症和纽芬兰杆-锥营养不良。为了研究RLBP1相关的IRD亚型，研究人员使用患者特异性诱导多能干细胞（iPSC）衍生的RPE进行建模，并确定了病理生理学标记物，这些标记物可以作为相关治疗的关键指标。此外，研究人员开发了一种AAV2/5介导的基因补充策略，并在人类模型中进行了概念验证研究，这些研究在Rlbp1-/-小鼠模型中得到了验证。更重要的是，研究人员发现了一种以前未知的较小的CRALBP亚型，它在人类和小鼠视网膜中自然且差异化表达。这种以前未知的亚型由一个替代的蛋氨酸起始位点产生。这项工作为进一步了解CRALBP表达和RLBP1相关病理生理学提供了更深入的见解，并为成功的基因补充治疗提出了重要的考虑因素[1]。
RLBP1基因的突变导致一种名为点状白斑症的视网膜疾病，其特征是眼底出现白色斑点状沉积。为了研究这种疾病，研究人员进行了一项病例研究，其中一名25岁的男性在眼底检查中出现了斑点。临床表现、多模式成像和ERG检查结果与良性家族性斑点状视网膜的诊断相符。基因分析检测到RLBP1基因，这是一个通常与更严重的视网膜疾病相关的基因。斑点状视网膜综合征和其他遗传性视网膜疾病具有复杂的基因型-表型关系，需要进一步研究以充分理解其病理生理学[2]。
为了更好地理解RLBP1基因的功能及其相关疾病，研究人员使用单细胞RNA测序（scRNA-seq）分析了糖尿病小鼠视网膜的细胞类型特异性表达。他们发现糖尿病视网膜中RLBP1表达下调，并且在小鼠模型中过表达RLBP1可以减轻糖尿病相关的神经血管退变。这些数据为糖尿病视网膜下细胞类型的详细分析提供了新的见解，揭示了可能成为治疗糖尿病视网膜病变和相关功能障碍的靶点[3]。
综上所述，RLBP1基因编码的CRALBP蛋白在视觉循环中发挥着重要作用。RLBP1的突变导致几种视网膜疾病，包括Bothnia营养不良、点状白斑症和纽芬兰杆-锥营养不良。研究人员已经使用患者特异性iPSC衍生的RPE模型来研究RLBP1相关疾病的病理生理学，并开发了一种AAV介导的基因补充策略。此外，scRNA-seq分析揭示了糖尿病视网膜中RLBP1表达下调，并且过表达RLBP1可以减轻糖尿病相关的神经血管退变。这些研究结果为进一步了解RLBP1的功能和相关疾病提供了重要的见解，并为开发有效的治疗方法提供了新的思路和策略。
参考文献：
1. Damodar, Krishna, Dubois, Gregor, Guillou, Laurent, Brabet, Philippe, Kalatzis, Vasiliki. 2024. Dual CRALBP isoforms unveiled: iPSC-derived retinal modeling and AAV2/5-RLBP1 gene transfer raise considerations for effective therapy. In Molecular therapy : the journal of the American Society of Gene Therapy, 32, 4319-4336. doi:10.1016/j.ymthe.2024.10.004. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/39385467/
2. Issa, Mohamad, Sukkarieh, Georges, Bruneau, Sebastien, Tadayoni, Ramin. 2024. A novel RLBP1 gene mutation associated to a flecked retina syndrome. In Retinal cases & brief reports, , . doi:10.1097/ICB.0000000000001574. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/38470931/
3. Niu, Tian, Fang, Junwei, Shi, Xin, Zhu, Shaopin, Liu, Kun. 2021. Pathogenesis Study Based on High-Throughput Single-Cell Sequencing Analysis Reveals Novel Transcriptional Landscape and Heterogeneity of Retinal Cells in Type 2 Diabetic Mice. In Diabetes, 70, 1185-1197. doi:10.2337/db20-0839. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/33674409/
