智鼠故事 
C57BL/6JCya-Rhagem1flox/Cya 条件性基因敲除小鼠
复苏/繁育服务
产品名称：
Rhag-flox
产品编号：
S-CKO-04798
品系背景：
C57BL/6JCya
* 使用本品系发表的文献需注明：Rhag-flox mice (Strain S-CKO-04798) were purchased from Cyagen.
交付类型
周龄
性别
基因型
数量
只
基本信息
品系名称
C57BL/6JCya-Rhagem1flox/Cya
品系编号
CKOCMP-19743-Rhag-B6J-VA
产品编号
S-CKO-04798
基因名
Rhag
品系背景
C57BL/6JCya
基因别称
Rh50；CD241；Rh50A
NCBI号
修饰方式
条件性基因敲除
品系说明
该品系是基于策略设计时的数据库信息制作而成，建议您在购买前查询最新的数据库和相关文献，以获取最准确的表型信息。
小鼠表型
MGI:1202713 Mice homozygous for a knock-out allele exhibit decreased ammonium and methylammonium transport in red cell ghosts, reduced basal adhesion of red blood cells to endothelial cells, a slight increase in iron levels, and decreased transferrin levels in males.
质控标准
精子检测
① 冷冻前验证精子活力观察
② 冷冻验证每批次进行复苏验证
品系状态
活体
环境标准
SPF
供应地区
中国
品系详情
Rhag位于小鼠的17号染色体，采用基因编辑技术，通过高通量电转受精卵方式，获得Rhag基因条件性敲除小鼠，性成熟后取精子冻存。
Rhag-flox小鼠模型是由赛业生物（Cyagen）采用基因编辑技术构建的条件性敲除小鼠。Rhag基因位于小鼠17号染色体上，由10个外显子组成，其中ATG起始密码子在1号外显子，TAA终止密码子在10号外显子。条件性敲除区域（cKO区域）位于2号外显子至3号外显子，包含335个碱基对的编码序列。删除该区域会导致小鼠Rhag基因功能的丧失。
Rhag-flox小鼠模型的构建过程包括将核糖核蛋白（RNP）和靶向载体共同注入受精卵。随后，对出生的小鼠进行PCR和测序分析进行基因型鉴定。携带敲除等位基因的小鼠表现出减少的铵和甲基铵在红细胞中的运输，降低的红细胞与内皮细胞的基底粘附，雄性小鼠铁水平略有增加，转铁蛋白水平降低。
Rhag-flox小鼠模型可用于研究Rhag基因在小鼠体内的功能，特别是在铵和甲基铵运输、红细胞与内皮细胞粘附、铁和转铁蛋白水平等方面的作用。
基因研究概述
基因Rhag，也称为Rh相关糖蛋白基因（Rhesus-associated glycoprotein gene），编码一种重要的红细胞膜蛋白，即RhAG。RhAG在红细胞膜中发挥关键作用，它不仅与Rh蛋白复合物的组装有关，还参与了Rh抗原的表达。RhAG的突变与多种红细胞疾病相关，包括Rhnull表型、球形红细胞症和Rh抗原表达的减弱。
RhAG的突变与Rhnull表型相关，Rhnull是一种罕见的常染色体隐性遗传病，特征是红细胞上缺乏Rh抗原的表达。参考文献3报道了一项关于中国Rhnull个体的家族研究，该研究通过分子遗传学分析发现，在RHAG基因的第5外显子上存在一个672C>A的错义突变，导致RhAG糖蛋白的跨膜区域发生丝氨酸到精氨酸的氨基酸替换。这种突变可能导致Rh抗原复合物在红细胞膜中的组装受阻，从而引起Rhnull表型[1]。
RhAG的突变还与球形红细胞症相关。参考文献6报道了一项关于RhAG基因新突变的病例研究，该研究通过基因测序发现，在RHAG基因的第236位核苷酸上存在一个G>A的突变，导致丝氨酸到天冬酰胺的氨基酸替换。这种突变可能破坏了RhAG的结构和稳定性，进而导致球形红细胞症的发生[2]。
除了与红细胞疾病相关，RhAG的突变还可能导致Rh抗原表达的减弱。参考文献7报道了一项关于RhAG基因新突变的病例研究，该研究通过基因测序发现，在RHAG基因的第572位核苷酸上存在一个G>A的突变，导致精氨酸到谷氨酰胺的氨基酸替换。这种突变可能导致RhAG蛋白的功能部分丧失，进而导致Rh抗原表达的减弱[3]。
为了更好地研究RhAG的功能和Rh抗原表达的机制，参考文献8报道了一项关于表达人类RhAG和RhD基因的小鼠模型的研究。该研究通过基因工程手段将人类RhAG和RhD基因导入小鼠中，发现人类RhAG能够与小鼠Rh蛋白形成异源复合物，并表达RhD抗原。这一研究成果为研究Rh抗原表达的机制和Rh相关疾病的发病机制提供了重要的实验模型[4]。
综上所述，基因Rhag编码的RhAG蛋白在红细胞膜中发挥重要作用，其突变与多种红细胞疾病相关，包括Rhnull表型、球形红细胞症和Rh抗原表达的减弱。通过对RhAG基因突变的研究，我们可以更深入地理解Rh抗原表达的机制和Rh相关疾病的发病机制。
参考文献：
1. Tian, Li, Song, Ning, Yao, Zhi-Qiang, Huang, Mei, Hou, Li. 2011. A family study of the Chinese Rhnull individual of the regulator type: a novel single missense mutation identified in RHAG gene. In Transfusion, 51, 2686-9. doi:10.1111/j.1537-2995.2011.03218.x. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/21682734/
2. Mu, S, Cui, Y, Wang, W, Zhu, O, Zhu, D. 2018. A RHAG point mutation selectively disrupts Rh antigen expression. In Transfusion medicine (Oxford, England), 29, 121-127. doi:10.1111/tme.12519. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/29508504/
3. Wen, Jizhi, Verhagen, Onno J H M, Jia, Shuangshuang, Ji, Yanli, van der Schoot, C Ellen. 2018. A variant RhAG protein encoded by the RHAG*572A allele causes serological weak D expression while maintaining normal RhCE phenotypes. In Transfusion, 59, 405-411. doi:10.1111/trf.14969. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/30284303/
4. Goossens, Dominique, da Silva, Nelly, Metral, Sylvain, Mouro-Chanteloup, Isabelle, Cartron, Jean-Pierre. 2013. Mice expressing RHAG and RHD human blood group genes. In PloS one, 8, e80460. doi:10.1371/journal.pone.0080460. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/24260394/
