智鼠故事 
C57BL/6JCya-Pld6em1flox/Cya 条件性基因敲除小鼠
复苏/繁育服务
产品名称：
Pld6-flox
产品编号：
S-CKO-04723
品系背景：
C57BL/6JCya
* 使用本品系发表的文献需注明：Pld6-flox mice (Strain S-CKO-04723) were purchased from Cyagen.
交付类型
周龄
性别
基因型
数量
只
基本信息
品系名称
C57BL/6JCya-Pld6em1flox/Cya
品系编号
CKOCMP-194908-Pld6-B6J-VA
产品编号
S-CKO-04723
基因名
Pld6
品系背景
C57BL/6JCya
基因别称
Zuc；Gm10；mZuc；mitoPLD；4933433K01Rik
NCBI号
修饰方式
条件性基因敲除
品系说明
该品系是基于策略设计时的数据库信息制作而成，建议您在购买前查询最新的数据库和相关文献，以获取最准确的表型信息。
小鼠表型
MGI:2687283 Mice homozygous for a null mutation display male infertility with arrest of male meiosis and mitochondrial abnormalities.
质控标准
精子检测
① 冷冻前验证精子活力观察
② 冷冻验证每批次进行复苏验证
品系状态
在研小鼠
环境标准
SPF
供应地区
中国
品系详情
Pld6位于小鼠的11号染色体，采用基因编辑技术，通过高通量电转受精卵方式，获得Pld6基因条件性敲除小鼠，性成熟后取精子冻存。
Pld6-flox小鼠模型是由赛业生物（Cyagen）采用基因编辑技术构建的条件性敲除小鼠。Pld6基因位于小鼠11号染色体上，由两个外显子组成，其中ATG起始密码子在1号外显子，TGA终止密码子在2号外显子。条件性敲除区域（cKO区域）位于1号外显子，包含约678个碱基对的编码序列。删除该区域会导致小鼠Pld6基因功能的丧失。此外，对于携带敲除等位基因的小鼠，它们表现出雄性不育，伴随着雄性减数分裂的停止和线粒体异常。Pld6-flox小鼠模型的生成过程包括将核糖核蛋白（RNP）和靶向载体共同注入受精卵。随后，对出生的小鼠进行PCR和测序分析进行基因型鉴定。该模型可用于研究Pld6基因在小鼠体内的功能，尤其是在雄性不育和线粒体功能方面的作用。
基因研究概述
Pld6，也称为Phospholipase D family member 6，是一种重要的磷酸酯酶，属于磷酸酯酶D家族。磷酸酯酶D家族是一类能够催化磷脂酰胆碱（PC）或磷脂酰乙醇胺（PE）水解生成磷脂酸（PA）和醇的酶。Pld6在多种生物学过程中发挥重要作用，包括细胞信号转导、细胞骨架重组、细胞生长和分化等。
Pld6在生殖系统中具有重要作用。在牛睾丸组织中，Pld6基因的表达显著高于六个月大的牛犊，并且Pld6蛋白在牛生精细胞中表达，与生精细胞标记物DEAD box helicase 4（DDX4，也称为VASA）相似。这表明Pld6可能参与了牛的生精过程[1]。在斑马鱼中，pld6被鉴定为一种新的生殖细胞特异性基因，pld6敲除突变体发育成不育的雄性，其生殖细胞干细胞和祖细胞（GSPCs）无法分化和发生凋亡，导致生殖腺发育和生殖细胞发生缺陷[2]。
Pld6在piRNA通路中发挥重要作用。piRNA通路产生一类26-30核苷酸（nt）的小RNA，对精子的发生和转座子抑制至关重要。在小鼠生长卵母细胞中，当MILI（或PIWIL2）基因被敲除时，几乎所有的piRNA都会消失。PLD6（或ZUCCHINI或MITOPLD）基因的缺失导致piRNA水平降低到野生型的50%，表明PLD6参与了piRNA的生物合成。此外，还发现了一种新的21-23核苷酸的小RNA，称为spiRNA，具有与piRNA 10核苷酸互补性，其产生依赖于MILI，独立于DICER[3]。
Pld6与2型糖尿病的发生有关。在2型糖尿病患者中，PLD6基因的表达显著高于对照组。此外，PLD6、CHRAC1和PDCD5基因的表达与2型糖尿病的发生也有关[4]。
Pld6与精子的成熟和男性生育能力有关。在精母细胞中，Gyk-like蛋白Gykl1和Gk2与Pld6相互作用，并诱导Pld6和磷脂酸（PA）依赖性线粒体聚集。PLD6的缺失导致精子功能障碍和男性不育[5]。
Pld6与溃疡性结肠炎（UC）的发生有关。在UC患者中，PLD6基因的表达与免疫细胞浸润有关。PLD6基因的表达与中性粒细胞水平呈负相关[6]。
Pld6与乳腺上皮细胞和乳腺癌中YAP/TAZ的功能有关。MYC激活一组基因的表达，间接抑制YAP/TAZ共激活因子，这些因子维持这些细胞的克隆形成能力。PLD6是MYC活性的介导因子，它改变线粒体融合和分裂动力学，激活AMPK，进而抑制YAP/TAZ。小鼠模型和人类病理数据表明，MYC增强AMPK并抑制YAP/TAZ活性在乳腺肿瘤中[7]。
Pld6与piRNA生物合成有关。MOV10L1是piRNA生物合成所必需的生殖细胞特异性RNA解旋酶。在MOV10L1 N端区域发现的yama突变导致单氨基酸替换V229E。yama突变导致减数分裂停滞、转座子的去抑制和男性不育，因为pre-pachytene piRNA生物合成缺陷。此外，通过将MOV10L1突变的影响限制在生殖细胞发育的后期阶段，导致pachytene piRNA的缺乏，piRNA前体的积累，piRNA途径蛋白在精母细胞中的极性聚集，以及精母细胞的发生停滞。机制上，MOV10L1中V229E替换减少了其与PLD6（一种生成piRNA中间体5'端的内切酶）的相互作用[8]。
PLD6是一种重要的磷酸酯酶，在多种生物学过程中发挥重要作用。Pld6在生殖系统中具有重要作用，参与牛的生精过程和斑马鱼GSPCs的维持和分化。Pld6在piRNA通路中发挥重要作用，参与piRNA的生物合成。Pld6与2型糖尿病的发生有关，与精子的成熟和男性生育能力有关，与UC的发生有关，与乳腺上皮细胞和乳腺癌中YAP/TAZ的功能有关，与piRNA生物合成有关。Pld6的研究有助于深入理解其在生殖、发育和疾病发生中的重要作用，为疾病的治疗和预防提供新的思路和策略。
参考文献：
1. Yang, Rui, Zhang, Boyang, Zhu, Wenqian, Tang, Bo, Zhang, Xueming. 2023. Expression of Phospholipase D Family Member 6 in Bovine Testes and Its Molecular Characteristics. In International journal of molecular sciences, 24, . doi:10.3390/ijms241512172. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/37569546/
2. Zhang, Ru, Tu, Yi-Xuan, Ye, Ding, Chen, Zhen-Xia, Sun, Yonghua. 2022. A Germline-Specific Regulator of Mitochondrial Fusion is Required for Maintenance and Differentiation of Germline Stem and Progenitor Cells. In Advanced science (Weinheim, Baden-Wurttemberg, Germany), 9, e2203631. doi:10.1002/advs.202203631. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/36257818/
3. Kabayama, Yuka, Toh, Hidehiro, Katanaya, Ami, Nakano, Toru, Sasaki, Hiroyuki. . Roles of MIWI, MILI and PLD6 in small RNA regulation in mouse growing oocytes. In Nucleic acids research, 45, 5387-5398. doi:10.1093/nar/gkx027. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/28115634/
4. Dawood, Ali Adel, Omer, Zayd Kays, Al-Omari, Alyaa Farouk. 2024. Association of overexpression of PLD6, CHRAC1 and PDCD5 with type 2 diabetes mellitus. In Medicinski glasnik : official publication of the Medical Association of Zenica-Doboj Canton, Bosnia and Herzegovina, 21, 286-294. doi:10.17392/1739-21-02. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/39526719/
5. Chen, Yuxi, Liang, Puping, Huang, Yan, Songyang, Zhou, Huang, Junjiu. 2017. Glycerol kinase-like proteins cooperate with Pld6 in regulating sperm mitochondrial sheath formation and male fertility. In Cell discovery, 3, 17030. doi:10.1038/celldisc.2017.30. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/28852571/
6. Chen, H-L, Liu, Y-H, Tan, C-H. . Age-related genes affecting the immune cell infiltration in ulcerative colitis revealed by weighted correlation network analysis and machine learning. In European review for medical and pharmacological sciences, 27, 8447-8462. doi:10.26355/eurrev_202309_33768. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/37782162/
7. von Eyss, Björn, Jaenicke, Laura A, Kortlever, Roderik M, Kempa, Stefan, Eilers, Martin. . A MYC-Driven Change in Mitochondrial Dynamics Limits YAP/TAZ Function in Mammary Epithelial Cells and Breast Cancer. In Cancer cell, 28, 743-757. doi:10.1016/j.ccell.2015.10.013. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/26678338/
8. Guan, Yongjuan, Keeney, Scott, Jain, Devanshi, Wang, P Jeremy. 2021. yama, a mutant allele of Mov10l1, disrupts retrotransposon silencing and piRNA biogenesis. In PLoS genetics, 17, e1009265. doi:10.1371/journal.pgen.1009265. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/33635934/
