Myo6-flox 基因敲除小鼠

Myo6，也称为Myosin VI，是一种非典型的肌球蛋白，在哺乳动物中广泛表达。它是一种细胞内马达蛋白，负责细胞内运输、细胞骨架重塑和信号转导等多种功能。Myo6在听觉和前庭功能中发挥着至关重要的作用。Myo6的突变会导致遗传性听力丧失，包括常染色体显性或隐性遗传形式。Myo6基因突变导致听力丧失的治疗方法有限。研究发现，使用腺相关病毒（AAV）-PHP.eB载体介导的Staphylococcus aureus Cas9 (SaCas9-KKH)-single-guide RNA (sgRNA)复合物在体内递送，可以改善Myo6WT/C442Y小鼠模型中的听力丧失。在Myo6WT/C442Y小鼠中，AAV-SaCas9-KKH-Myo6-g2系统对Myo6C442Y的体内编辑效率平均为4.05%，比Myo6WT等位基因的编辑效率高约17倍。在AAV-SaCas9-KKH-Myo6-g2注射后5个月内观察到听觉功能的恢复。此外，听觉脑干反应（ABR）波I的潜伏期缩短、失真产物耳声发射（DPOAE）阈值降低、细胞存活率增加、毛细胞形态更加规则以及内向钙水平的恢复，这些在AAV-SaCas9-KKH-Myo6-g2处理的耳朵中均有所观察到。这些发现为进一步利用体内基因组编辑作为各种半显性听力丧失和其他半显性疾病的治疗方法提供了参考[1]。

常染色体显性非综合征性听力丧失（HL）通常发生在仅一个致病等位基因在疾病基因中足够表达表型的情况下。因此，大多数被诊断为常染色体显性非综合征性HL的患者都有一个听力受损的父母，尽管在所有家族史阴性的病例中都应该考虑新的突变。迄今为止，已确定超过50个基因和80个位点与常染色体显性非综合征性HL有关。DFNA22（MYO6基因）、DFNA8/12（TECTA基因）、DFNA20/26（ACTG1基因）、DFNA6/14/38（WFS1基因）、DFNA15（POU4F3基因）、DFNA2A（KCNQ4基因）和DFNA10（EYA4基因）是一些最常见的常染色体显性非综合征性HL形式。常染色体显性非综合征性HL的特点是异质性的。然而，在大多数情况下，HL往往是双侧的，在儿童到青壮年期间开始（语言后），高频（斜率听力学配置），进行性的，严重程度可变（从轻度到重度）。DFNA1（DIAPH1基因）和DFNA6/14/38（WFS1基因）是最常见的常染色体显性非综合征性HL形式，影响低频，而DFNA16（未知基因）的特点是波动性HL。长期听力测试对于早期发现听力阈值的恶化以及确保及时使用助听器或耳蜗植入物进行治疗至关重要[2]。

在欧洲，非综合征性听力丧失（NSHI）的遗传病因是异质性的，目前已知涉及超过120个基因。每个基因中突变的频率以及最常见的突变在不同的种群中有所不同。研究表明，在欧洲，最常见的常染色体隐性NSHI是DFNB1，占病例的11-57%。STRC基因的突变占隐性病例的16%，而只有少数其他基因（MYO15A、MYO7A、LOXHD1、USH2A、TMPRSS3、CDH23、TMC1、OTOF、OTOA、SLC26A4、ADGRV1和TECTA）的贡献率超过2%。关于常染色体显性NSHI，DFNA22（MYO6）和DFNA8/12（TECTA）分别是最常见的形式，分别占阐明病例的21%和18%。ACTG1和WFS1的贡献率降至9%，其次是POU4F3（6.5%）、MYO7A（5%）、MYH14和COL11A2（每个4%）。另外四个基因每个贡献2.5%，其余的基因代表性较低。X连锁听力丧失和母系遗传的NSHI在大多数国家中的贡献较小。为了促进研究之间的比较，需要对欧洲NSHI的遗传流行病学有更深入的了解，这需要标准化实验方法并根据临床特征、家族史和遗传模式对结果进行分层[3]。

研究表明，MYO6在肿瘤进展和去势抵抗性前列腺癌（CRPC）中的恩扎鲁胺（Enz）耐药性中发挥着重要作用。MYO6表达增加与AR表达在PCa细胞系和组织中呈正相关。AR直接结合MYO6基因启动子区域（-503至-283碱基对残基）并促进其转录。MYO6通过整合素β8（ITGB8）的调节激活FAK的酪氨酸397位点的磷酸化，从而促进PCa进展和Enz耐药性。值得注意的是，通过Y15（FAK的抑制剂）抑制FAK活性可以使CRPC细胞对Enz治疗重新敏感。MYO6在CRPC中具有促肿瘤和Enz耐药性的作用，提示靶向MYO6可能对ENZ耐药性CRPC的治疗有益[4]。

在儿童听力丧失中，大多数双侧感音神经性听力丧失是遗传性的，目前已知有超过120个基因和数千个不同的等位基因。主要治疗方法是助听器和耳蜗植入物。基因诊断可以告知听力丧失的进展、指示潜在的综合征特征，并建议最佳的治疗时机。研究表明，基因诊断可以整合到儿童听力丧失的精准医疗护理中，以改善治疗效果[5]。

研究表明，Myo6基因在果蝠中经历了适应性进化。Myo6基因在果蝠的肾脏中表达最高，表明该基因在肾脏功能中发挥着重要作用。这表明Myo6基因在果蝠的肾脏功能中具有重要作用，可能与受体介导的内吞作用有关，以维持蛋白质和必需营养素[6]。

研究表明，POU4F3基因突变会导致DFNA15，一种遗传性听力丧失。研究发现，突变型POU4F3对Myo6启动子的活性有显著的抑制作用。这表明突变型POU4F3可能通过抑制Myo6的表达来导致DFNA15听力丧失[7]。

综上所述，Myo6基因在听觉功能中发挥着重要作用，其突变会导致遗传性听力丧失。Myo6基因的突变可以导致常染色体显性或隐性遗传形式的听力丧失。研究发现，使用基因编辑技术可以改善Myo6突变引起的听力丧失。Myo6基因的突变与肿瘤进展和耐药性有关，提示靶向Myo6可能对肿瘤治疗有益。Myo6基因在果蝠中经历了适应性进化，表明该基因在不同物种中具有不同的功能。Myo6基因的表达受到POU4F3基因的调节，突变型POU4F3可以抑制Myo6的表达，导致听力丧失。这些研究表明，Myo6基因在听觉功能和肿瘤发生中发挥着重要作用，为听力丧失和肿瘤的治疗提供了新的思路和策略。