Maf-flox 基因敲除小鼠

Maf基因家族是一类在脊椎动物发育和细胞分化过程中发挥重要作用的转录因子，其成员包括L-Maf、MafB和c-Maf等。这些转录因子含有高度保守的酸性转录激活结构域（AD）和介导DNA结合活性的碱性亮氨酸拉链（bZIP）区域。研究发现，L-Maf、c-Maf和MafB在脊椎动物晶状体发育中起着关键作用。在瞬时转染实验中，MafB和c-Maf比L-Maf激活了更高水平的报告基因，而L-Maf在激活αA-晶状体蛋白启动子和诱导内源性δ-晶状体蛋白基因表达方面与MafB和c-Maf相当或更有效。这些结果表明，尽管它们的DNA结合性质相似，但L-Maf、MafB和c-Maf通过复杂的相互作用与识别启动子中的顺式元件的多个因子，调节不同的靶基因集。L-Maf的AH区域在诱导内源性δ-晶状体蛋白基因方面具有独特的作用[1]。

Maf家族的转录因子在多种器官和组织的发育过程中表达，并参与多种发育和细胞分化过程。研究发现，c-maf和mafB在软骨发育过程中肥大软骨细胞中表达强烈，而连接组织生长因子（CTGF）也在肥大软骨细胞中表达。腺病毒介导的c-maf基因导入小鼠成纤维细胞系C3H10T1/2中，强烈诱导了CTGF的表达。CTGF可以被TGF-β通过SMAD通路诱导，但是c-Maf不能诱导TGF-β，TGF-β也不能诱导c-Maf，这表明Maf激活CTGF是TGF-β非依赖性的。报告基因转染分析表明，c-Maf刺激了CTGF报告基因的表达。Lc-Maf，c-Maf的一个包含在羧基末端额外10个氨基酸的剪接变体，比c-Maf更能诱导CTGF报告基因的表达。染色质免疫沉淀分析表明，c-Maf结合到CTGF基因的启动子区域，表明Maf直接激活了CTGF基因。这些数据表明，CTGF基因是c-Maf和Lc-Maf在软骨发育过程中的一个靶基因[2]。

c-Maf是一种bZip转录因子，在发育和细胞分化过程中表达。最近，一项c-maf敲除小鼠模型的研究发现，晶状体发育异常。为了研究c-maf基因表达在分化过程中的调节机制，研究者克隆并功能性地表征了大鼠c-maf（maf-2）基因。大鼠c-maf基因是一个无内含子基因，长度为3.5 kb。瞬时转染分析显示，Pax6，晶状体发育的主转录因子，强烈激活了c-maf启动子构建体。内源性c-maf也被Pax6表达载体激活。电泳迁移率变动分析和DNase I足迹分析表明，至少有三个Pax6结合位点位于大鼠c-maf基因的5'-侧翼和非编码区域。c-maf基因也被其自身产物c-Maf通过MARE（Maf识别元件）显著激活，这表明c-maf基因的表达受到正反馈调节。原位杂交组织化学检测Pax6和c-Maf在E14晶状体中的表达显示，两种mRNA都在晶状体赤道处表达，晶状体上皮细胞正在分化成晶状体纤维细胞。这些结果表明，Pax6/c-Maf转录因子级联在晶状体发育中发挥作用[3]。

ABCA4基因的变异与一系列表型相关，从早发性孟德尔视网膜营养不良到晚发性复杂疾病如年龄相关性黄斑变性（AMD）。尽管在确定因果遗传变异方面取得了实质性进展，但即使对ABCA4的整个开放阅读框和剪接位点进行完整的测序，也只有60%-70%的病例中发现双等位基因突变；20%-25%的病例中有一个突变，而在10%-15%的病例中没有发现突变。为了确定单等位基因ABCA4疾病中缺失的因果变异，研究者在一个主要由欧洲血统（n=643）组成的家族性ABCA4疾病队列中进行了直接测序和分析。通过临床和视网膜影像数据评估患者表型。研究者发现，一个之前被认为是良性的ABCA4等位基因c.5603A>T（p.Asn1868Ile），由于其在大群体中的高次要等位基因频率（MAF，约7%），在疾病中占10%，占单等位基因病例中缺失因果等位基因的50%以上，占晚发性病例的约80%，并且将ABCA4疾病与AMD区分开来。它导致了一个独特的临床表型，特征是症状的晚期发作（第4个十年）和黄斑中心凹的保存（85%）。还确定了涉及该变体和另一个c.2588G>C（p.Gly863Ala）等位基因的基因内修饰效应。这些发现证实了频繁的错义变异及其表型结果作为ABCA4疾病，特别是晚发性表型的显著贡献，并建议对ABCA4变异的诊断筛查和评估进行重大修订[4]。

肝肿瘤起始细胞（TICs）参与肝肿瘤发生、转移、耐药性和复发，但其调节机制尚不清楚。研究者发现了一种功能性的环状RNA，称为circRNA激活MAFF（cia-MAF），在肝癌和肝TICs中表达丰富。cia-MAF-KO原代细胞和cia-maf-KO肝肿瘤中TICs的比例降低，肝肿瘤发生、自我更新和转移能力受损。相比之下，cia-MAF过表达促进了肝TIC的传播、自我更新和转移。机制上，cia-MAF结合到MAFF启动子，招募TIP60复合物到MAFF启动子，最终促进MAFF表达。cia-MAF功能的丧失减弱了TIP60复合物与MAFF启动子的结合。MAFF在肝肿瘤和肝TICs中高度表达，其反义寡核苷酸（ASO）在MAFA/MAFG基因拷贝数改变（CNAs）的情况下具有治疗肝癌的潜力。这项研究揭示了肝TIC调节的额外层次以及circRNA的功能，并为消除肝TIC提供了额外的靶点，特别是对于没有MAFA/MAFG基因CNAs的肝肿瘤[5]。

Maf家族的转录因子在多种器官和组织的发育过程中表达，并参与多种发育和细胞分化过程。研究发现，c-maf和mafB在软骨发育过程中肥大软骨细胞中表达强烈，而连接组织生长因子（CTGF）也在肥大软骨细胞中表达。腺病毒介导的c-maf基因导入小鼠成纤维细胞系C3H10T1/2中，强烈诱导了CTGF的表达。CTGF可以被TGF-β通过SMAD通路诱导，但是c-Maf不能诱导TGF-β，TGF-β也不能诱导c-Maf，这表明Maf激活CTGF是TGF-β非依赖性的。报告基因转染分析表明，c-Maf刺激了CTGF报告基因的表达。Lc-Maf，c-Maf的一个包含在羧基末端额外10个氨基酸的剪接变体，比c-Maf更能诱导CTGF报告基因的表达。染色质免疫沉淀分析表明，c-Maf结合到CTGF基因的启动子区域，表明Maf直接激活了CTGF基因。这些数据表明，CTGF基因是c-Maf和Lc-Maf在软骨发育过程中的一个靶基因[2]。

肝肿瘤起始细胞（TICs）参与肝肿瘤发生、转移、耐药性和复发，但其调节机制尚不清楚。研究者发现了一种功能性的环状RNA，称为circRNA激活MAFF（cia-MAF），在肝癌和肝TICs中表达丰富。cia-MAF-KO原代细胞和cia-maf-KO肝肿瘤中TICs的比例降低，肝肿瘤发生、自我更新和转移能力受损。相比之下，cia-MAF过表达促进了肝TIC的传播、自我更新和转移。机制上，cia-MAF结合到MAFF启动子，招募TIP60复合物到MAFF启动子，最终促进MAFF表达。cia-MAF功能的丧失减弱了TIP60复合物与MAFF启动子的结合。MAFF在肝肿瘤和肝TICs中高度表达，其反义寡核苷酸（ASO）在MAFA/MAFG基因拷贝数改变（CNAs）的情况下具有治疗肝癌的潜力。这项研究揭示了肝TIC调节的额外层次以及circRNA的功能，并为消除肝TIC提供了额外的靶点，特别是对于没有MAFA/MAFG基因CNAs的肝肿瘤[5]。

c-Maf是一种bZip转录因子，在发育和细胞分化过程中表达。最近，一项c-maf敲除小鼠模型的研究发现，晶状体发育异常。为了研究c-maf基因表达在分化过程中的调节机制，研究者克隆并功能性地表征了大鼠c-maf（maf-2）基因。大鼠c-maf基因是一个无内含子基因，长度为3.5 kb。瞬时转染分析显示，Pax6，晶状体发育的主转录因子，强烈激活了c-maf启动子构建体。内源性c-maf也被Pax6表达载体激活。电泳迁移率变动分析和DNase I足迹分析表明，至少有三个Pax6结合位点位于大鼠c-maf基因的5'-侧翼和非编码区域。c-maf基因也被其自身产物c-Maf通过MARE（Maf识别元件）显著激活，这表明c-maf基因的表达受到正反馈调节。原位杂交组织化学检测Pax6和c-Maf在E14晶状体中的表达显示，两种mRNA都在晶状体赤道处表达，晶状体上皮细胞正在分化成晶状体纤维细胞。这些结果表明，Pax6/c-Maf转录因子级联在晶状体发育中发挥作用[3]。

ABCA4基因的变异与一系列表型相关，从早发性孟德尔视网膜营养不良到晚发性复杂疾病如年龄相关性黄斑变性（AMD）。尽管在确定因果遗传变异方面取得了实质性进展，但即使对ABCA4的整个开放阅读框架和剪接位点进行完整的测序，也只有60%-70%的病例中发现双等位基因突变；20%-25%的病例中有一个突变，而在10%-15%的病例中没有发现突变。为了确定单等位基因ABCA4疾病中缺失的因果变异，研究者在一个主要由欧洲血统（n=643）组成的家族性ABCA4疾病队列中进行了直接测序和分析。通过临床和视网膜影像数据评估患者表型。研究者发现，一个之前被认为是良性的ABCA4等位基因c.5603A>T（p.Asn1868Ile），由于其在大群体中的高次要等位基因频率（MAF，约7%），在疾病中占10%，占单等位基因病例中缺失因果等位基因的50%以上，占晚发性病例的约80%，并且将ABCA4疾病与AMD区分开来。它导致了一个独特的临床表型，特征是症状的晚期发作（第4个十年）和黄斑中心凹的保存（85%）。还确定了涉及该变体和另一个c.2588G>C（p.Gly863Ala）等位基因的基因内修饰效应。这些发现证实了频繁的错义变异及其表型结果作为ABCA4疾病，特别是晚发性表型的显著贡献，并建议对ABCA4变异的诊断筛查和评估进行重大修订[4]。

肝肿瘤起始细胞（TICs）参与肝肿瘤发生、转移、耐药性和复发，但其调节机制尚不清楚。研究者发现了一种功能性的环状RNA，称为circRNA激活MAFF（cia-MAF），在肝癌和肝TICs中表达丰富。cia-MAF-KO原代细胞和cia-maf-KO肝肿瘤中TICs的比例降低，肝肿瘤发生、自我更新和转移能力受损。相比之下，cia-MAF过表达促进了肝TIC的传播、自我更新和转移。机制上，cia-MAF结合到MAFF启动子，招募TIP60复合物到MAFF启动子，最终促进MAFF表达。cia-MAF功能的丧失减弱了TIP60复合物与MAFF启动子的结合。MAFF在肝肿瘤和肝TICs中高度表达，其反义寡核苷酸（ASO）在MAFA/MAFG基因拷贝数改变（CNAs）的情况下具有治疗肝癌的潜力。这项研究揭示了肝TIC调节的额外层次以及circRNA的功能，并为消除肝TIC提供了额外的靶点，特别是对于没有MAFA/MAFG基因CNAs的肝肿瘤[5]。

c-Maf是一种bZip转录因子，在发育和细胞分化过程中表达。最近，一项c-maf敲除小鼠模型的研究发现，晶状体发育异常。为了研究c-maf基因表达在分化过程中的调节机制，研究者克隆并功能性地表征了大鼠c-maf（maf-2）基因。大鼠c-maf基因是一个无内含子基因，长度为3.5 kb。瞬时转染分析显示，Pax6，晶状体发育的主转录因子，强烈激活了c-maf启动子构建体。内源性c-maf也被Pax6表达载体激活。电泳迁移率变动分析和DNase I足迹分析表明，至少有三个Pax6结合位点位于大鼠c-maf基因的5'-侧翼和非编码区域。c-maf基因也被其自身产物c-Maf通过MARE（Maf识别元件）显著激活，这表明c-maf基因的表达受到正反馈调节。原位杂交组织化学检测Pax6和c-Maf在E14晶状体中的表达显示，两种mRNA都在晶状体赤道处表达，晶状体上皮细胞正在分化成晶状体纤维细胞。这些结果表明，Pax6/c-Maf转录因子级联在晶状体发育中发挥作用[3]。

ABCA4基因的变异与一系列表型相关，从早发性孟德尔视网膜营养不良到晚发性复杂疾病如年龄相关性黄斑变性（AMD）。尽管在确定因果遗传变异方面取得了实质性进展，但即使对ABCA4的整个开放阅读框架和剪接位点进行完整的测序，也只有60%-70%的病例中发现双等位基因突变；20%-25%的病例中有一个突变，而在10%-15%的病例中没有发现突变。为了确定单等位基因ABCA4疾病中缺失的因果变异，研究者在一个主要由欧洲血统（n=643）组成的家族性ABCA4疾病队列中进行了直接测序和分析。通过临床和视网膜影像数据评估患者表型。研究者发现，一个之前被认为是良性的ABCA4等位基因c.5603A>T（p.Asn1868Ile），由于其在大群体中的高次要等位基因频率（MAF，约7%），在疾病中占10%，占单等位基因病例中缺失因果等位基因的50%以上，占晚发性病例的约80%，并且将ABCA4疾病与AMD区分开来。它导致了一个独特的临床表型，特征是症状的晚期发作（第4个十年）和黄斑中心凹的保存（85%）。还确定了涉及该变体和另一个c.2588G>C（p.Gly863Ala）等位基因的基因内修饰效应。这些发现证实了频繁的错义变异及其表型结果作为ABCA4疾病，特别是晚发性表型的显著贡献，并建议对ABCA4变异的诊断筛查和评估进行重大修订[4]。

肝肿瘤起始细胞（TICs）参与肝肿瘤发生、转移、耐药性和复发，但其调节机制尚不清楚。研究者发现了一种功能性的环状RNA，称为circRNA激活MAFF（cia-MAF），在肝癌和肝TICs中表达丰富。cia-MAF-KO原代细胞和cia-maf-KO肝肿瘤中TICs的比例降低，肝肿瘤发生、自我更新和转移能力受损。相比之下，cia-MAF过表达促进了肝TIC的传播、自我更新和转移。机制上，cia-MAF结合到MAFF启动子，招募TIP60复合物到MAFF启动子，最终促进MAFF表达。cia-MAF功能的丧失减弱了TIP60复合物与MAFF启动子的结合。MAFF在肝肿瘤和肝TICs中高度表达，其反义寡核苷酸（ASO）在MAFA/MAFG基因拷贝数改变（CNAs）的情况下具有治疗肝癌的潜力。这项研究揭示了肝TIC调节的额外层次以及circRNA的功能，并为消除肝TIC提供了额外的靶点，特别是对于没有MAFA/MAFG基因CNAs的肝肿瘤[5]。

c-Maf是一种bZip转录因子，在发育和细胞分化过程中表达。最近，一项c-maf敲除小鼠模型的研究发现，晶状体发育异常。为了研究c-maf基因表达在分化过程中的调节机制，研究者克隆并功能性地表征了大鼠c-maf（maf-2）基因。大鼠c-maf基因是一个无内含子基因，长度为3.5 kb。瞬时转染分析显示，Pax6，晶状体发育的主转录因子，强烈激活了c-maf启动子构建体。内源性c-maf也被Pax6表达载体激活。电泳迁移率变动分析和DNase I足迹分析表明，至少有三个Pax6结合位点位于大鼠c-maf基因的5'-侧翼和非编码区域。c-maf基因也被其自身产物c-Maf通过MARE（Maf识别元件）显著激活，这表明c-maf基因的表达受到正反馈调节。原位杂交组织化学检测Pax6和c-Maf在E14晶状体中的表达显示，两种mRNA都在晶状体赤道处表达，晶状体上皮细胞正在分化成晶状体纤维细胞。这些结果表明，Pax6/c-Maf转录因子级联在晶状体发育中发挥作用[3]。

ABCA4基因的变异与一系列表型相关，从早发性孟德尔视网膜营养不良到晚发性复杂疾病如年龄相关性黄斑变性（AMD）。尽管在确定因果遗传变异方面取得了实质性进展，但即使对ABCA4的整个开放阅读框架和剪接位点进行完整的测序，也只有60%-70%的病例中发现双等位基因突变；20%-25%的病例中有一个突变，而在10%-15%的病例中没有发现突变。为了确定单等位基因ABCA4疾病中缺失的因果变异，研究者在一个主要由欧洲血统（n=643）组成的家族性ABCA4疾病队列中进行了直接测序和分析。通过临床和视网膜影像数据评估患者表型。研究者发现，一个之前被认为是良性的ABCA4等位基因c.5603A>T（p.Asn1868Ile），由于其在大群体中的高次要等位基因频率（MAF，