智鼠故事 
C57BL/6JCya-Itm2aem1flox/Cya 条件性基因敲除小鼠
复苏/繁育服务
产品名称：
Itm2a-flox
产品编号：
S-CKO-03178
品系背景：
C57BL/6JCya
* 使用本品系发表的文献需注明：Itm2a-flox mice (Strain S-CKO-03178) were purchased from Cyagen.
交付类型
周龄
性别
基因型
数量
只
基本信息
品系名称
C57BL/6JCya-Itm2aem1flox/Cya
品系编号
CKOCMP-16431-Itm2a-B6J-VA
产品编号
S-CKO-03178
基因名
Itm2a
品系背景
C57BL/6JCya
基因别称
Bricd2a; E25; Itm2
NCBI号
修饰方式
条件性基因敲除
品系说明
该品系是基于策略设计时的数据库信息制作而成，建议您在购买前查询最新的数据库和相关文献，以获取最准确的表型信息。
小鼠表型
MGI:107706 Mice homozygous for a targeted allele are viable and fertile with no obvious phenotype.
质控标准
精子检测
① 冷冻前验证精子活力观察
② 冷冻验证每批次进行复苏验证
品系状态
活体
环境标准
SPF
供应地区
中国
品系详情
Itm2a位于小鼠的X号染色体，采用基因编辑技术，通过高通量电转受精卵方式，获得Itm2a基因条件性敲除小鼠，性成熟后取精子冻存。
Itm2a-flox小鼠模型是由赛业生物（Cyagen）采用基因编辑技术构建的条件性敲除小鼠。Itm2a基因位于小鼠X号染色体上，由6个外显子组成，其中ATG起始密码子在1号外显子，TGA终止密码子在6号外显子。条件性敲除区域（cKO区域）位于2号至4号外显子，包含441个碱基对的编码序列。删除该区域会导致小鼠Itm2a基因功能的丧失。Itm2a-flox小鼠模型的构建过程包括将核糖核蛋白（RNP）和靶向载体共同注入受精卵。随后，对出生的小鼠进行PCR和测序分析进行基因型鉴定。此外，对于携带敲除等位基因的小鼠，赛业生物（Cyagen）的研究表明，它们是可存活和可育的，没有明显的表型。2号至4号外显子不是移码外显子，并且覆盖了55.89%的编码区域。5'-loxP位点插入的1号内含子大小为3407个碱基对，3'-loxP位点插入的4号内含子大小为524个碱基对。有效的cKO区域大小约为2.0千碱基对。cKO区域不包含其他已知基因。
基因研究概述
Itm2a，即Integral Membrane Protein 2A，是一种跨膜蛋白，属于BRICHOS结构域蛋白家族，包括Itm2a、Itm2b和Itm2c等成员。Itm2a在造血细胞中表达，尤其在T细胞系中表达较高，并在MHC介导的正选择中被诱导表达[2]。Itm2a基因定位于X染色体上，含有6个外显子和5个内含子，其5'端调控区域含有多种转录因子的结合位点，这些转录因子在软骨或骨特异性基因的转录调控中发挥作用[4]。Itm2a基因在体内表达于骨骼肌形成的部位，如体节中的真皮肌节和肌节，以及在肢体芽中[3]。此外，Itm2a在成年肌纤维和负责再生的卫星细胞中也有表达[3]。
Itm2a基因的突变或缺失对T细胞的发育和功能影响较小，但对携带MHC I类限制性TCR的胸腺细胞发育存在部分缺陷[2]。Itm2a基因的转录调控由GATA-3等T细胞特异性转录因子介导[2]。此外，Itm2a基因的表达还受到Pax3等转录因子的调控，Pax3是神经、神经嵴和骨骼肌发育的关键调节因子[3]。Itm2a基因的缺失小鼠在骨骼肌形成或再生过程中没有明显的表型，但Itm2a基因的表达在体内和体外实验中均被证实参与了早期软骨形成过程[3][7]。
在骨和软骨细胞分化中，Itm2a基因的表达下调与多种疾病相关。例如，在强直性脊柱炎（AS）患者中，巨噬细胞中Itm2a基因的表达显著下调[1]。Itm2a基因的表达还与乳腺癌的预后相关，高表达Itm2a基因的患者预后较好[5]。此外，Itm2a基因的沉默可以挽救LMNA基因突变导致的脂肪细胞分化缺陷，这表明Itm2a基因在脂肪细胞分化中也发挥重要作用[6]。
Itm2a基因的突变或缺失与自身免疫性疾病相关。例如，在韩国儿童中，Itm2a基因的rs1751094单核苷酸多态性与自身免疫性甲状腺疾病（AITD）相关，尤其是在女性患者中[8]。此外，Itm2a基因的rs3827440位点的多态性与GD的易感性相关，并可能通过环境因素的相互作用影响GD的发病机制[9]。
综上所述，Itm2a基因在多种生物学过程中发挥作用，包括细胞分化、发育、代谢和疾病发生。Itm2a基因的表达受到多种转录因子的调控，并在骨和软骨细胞分化中发挥重要作用。Itm2a基因的突变或缺失与多种疾病相关，包括自身免疫性疾病和肿瘤。对Itm2a基因的深入研究有助于揭示其在疾病发生发展中的作用机制，为疾病的治疗和预防提供新的思路和策略。
参考文献：
1. Lari, Arezou, Gholami Pourbadie, Hamid, Jafari, Mohieddin, Jamshidi, Ahmadreza, Mahmoudi, Mahdi. 2021. Downregulation of ITM2A Gene Expression in Macrophages of Patients with Ankylosing Spondylitis. In International archives of allergy and immunology, 182, 1113-1121. doi:10.1159/000516179. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/34161951/
2. Tai, Tzong-Shyuan, Pai, Sung-Yun, Ho, I-Cheng. 2014. Itm2a, a target gene of GATA-3, plays a minimal role in regulating the development and function of T cells. In PloS one, 9, e96535. doi:10.1371/journal.pone.0096535. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/24831988/
3. Lagha, Mounia, Mayeuf-Louchart, Alicia, Chang, Ted, Buckingham, Margaret E, Relaix, Frederic. 2013. Itm2a is a Pax3 target gene, expressed at sites of skeletal muscle formation in vivo. In PloS one, 8, e63143. doi:10.1371/journal.pone.0063143. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/23650549/
4. Pittois, K, Wauters, J, Bossuyt, P, Deleersnijder, W, Merregaert, J. . Genomic organization and chromosomal localization of the Itm2a gene. In Mammalian genome : official journal of the International Mammalian Genome Society, 10, 54-6. doi:. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/9892734/
5. Zhang, Rui, Xu, Tao, Xia, Yu, Li, Xingrui, Chen, Wen. 2021. ITM2A as a Tumor Suppressor and Its Correlation With PD-L1 in Breast Cancer. In Frontiers in oncology, 10, 581733. doi:10.3389/fonc.2020.581733. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/33680917/
6. Davies, Stephanie J, Ryan, James, O'Connor, Patrick B F, O'Connor, Rosemary, McCarthy, Tommie V. 2017. Itm2a silencing rescues lamin A mediated inhibition of 3T3-L1 adipocyte differentiation. In Adipocyte, 6, 259-276. doi:10.1080/21623945.2017.1362510. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/28872940/
7. Van den Plas, Dave, Merregaert, Joseph. . In vitro studies on Itm2a reveal its involvement in early stages of the chondrogenic differentiation pathway. In Biology of the cell, 96, 463-70. doi:. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/15325075/
8. Cho, Won K, Baek, In-Cheol, Kim, Sung E, Kim, Tai-Gyu, Suh, Byung-Kyu. . Association of ITM2A rs1751094 polymorphism on X chromosome in Korean pediatric patients with autoimmune thyroid disease. In Immunity, inflammation and disease, 11, e800. doi:10.1002/iid3.800. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/36988246/
9. Ye, Xiao-Ping, Yuan, Fei-Fei, Zhang, Le-Le, Liang, Jun, Zheng, Cui-Xia. . ITM2A Expands Evidence for Genetic and Environmental Interaction in Graves Disease Pathogenesis. In The Journal of clinical endocrinology and metabolism, 102, 652-660. doi:10.1210/jc.2016-2625. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/27809695/
