Epha8-flox 基因敲除小鼠

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产品名称

Epha8-flox 基因敲除小鼠

产品编号

S-CKO-02226

品系全称

C57BL/6JCya-Epha8em1flox/Cya

品系背景

C57BL/6JCya

品系编号

CKOCMP-13842-Epha8-B6J-VA

品系状态

使用本品系发表的文献需注明: Epha8-flox 基因敲除小鼠 mice (Strain S-CKO-02226) were purchased from Cyagen.
交付类型
周龄
性别
基因型
数量
cKO小鼠库模型

基本信息

基因研究概述

质控标准

基因
基因全称
Eph receptor A8
基因别称
Eek,Hek3,mKIAA1459
染色体号
Chr 4 (Mouse)
转录本 ID
NCBI: NM_007939.2 | Ensembl: ENSMUST00000030420
修饰方式
条件性基因敲除
靶向范围
Exon 10~12
敲除长度
~1325 bp
品系说明
该品系是基于策略设计时的数据库信息制作而成,建议您在购买前查询最新的数据库和相关文献,以获取最准确的表型信息。
表型提示
MGI:109378Mice homozygous for this targeted mutation are viable, fertile, and grossly normal but exhibit a commissural defect, whereby tectal axons fail to project from the superior colliculus of the midbrain to the contralateral inferior colliculus and instead project to the ipsilateral cervical spinal cord.
EphA8,也称为Erythropoietin-producing hepatocellular receptor A8,是Eph受体酪氨酸激酶家族的成员之一。Eph受体酪氨酸激酶是最大的受体酪氨酸激酶亚家族,它们在胚胎发育和神经发生中发挥着至关重要的作用。EphA8受体在细胞间信号传导、细胞粘附、迁移和轴突导向等生物学过程中扮演着关键角色。

在胚胎发育过程中,EphA8基因的表达呈现从头部到尾部的梯度分布,这种表达模式可能在视顶盖投射的适当发育中发挥作用。研究表明,EphA8基因的表达受到TALE同源框转录因子的调控,如Meis和Pbx。Meis2和Pbx1/2在背侧中脑中特异性表达,而EphA8和Meis的共定位则局限于一部分细胞中。Meis2和Pbx2在体外协同结合EphA8调控序列,这对EphA8基因的转录激活至关重要[1]。

EphA8基因的结构已经被研究清楚,它由17个外显子组成,跨越约28千碱基对。EphA8基因启动子区域缺乏TATA盒,但包含多个GGGCGG序列,这是Sp1结合位点的核心序列。在神经细胞中,EphA8基因的启动子区域具有强烈的活性,而在非神经细胞中活性较低。这表明EphA8基因的启动子区域足以指导其在神经细胞中的特异性表达[2]。

EphA8基因的表达模式在胚胎发育过程中非常特定,主要局限于中脑顶盖的前部区域。为了研究EphA8基因的调控机制,研究人员构建了表达lacZ报告基因的EphA8细菌人工染色体(BAC)转基因小鼠。通过X-gal染色,发现lacZ报告基因的表达仅限于发育中的中脑前部区域,这表明EphA8 BAC DNA包含了大部分,如果不是全部的话,调控lacZ基因时空表达的调控序列[3]。

在EphA8基因敲除小鼠中,轴突追踪实验表明,来自顶盖神经元的轴突不能到达对侧下丘的目标区域。此外,EphA8基因敲除小鼠还表现出异常的轴突束,投射到颈脊髓的腹侧区域。这些结果表明,EphA8受体在哺乳动物神经系统的轴突导向中发挥着重要作用[4]。

EphA8基因的表达与多种癌症的发生和发展相关。在胃癌中,EphA8的表达水平显著高于非肿瘤组织,并且与肿瘤的分化程度、肿瘤-淋巴结-转移(TNM)分期和不良的5年生存率相关。EphA8基因的敲低可以降低胃癌细胞的增殖、侵袭和迁移能力,并下调与增殖和转移相关的蛋白表达。这些研究表明,EphA8基因在胃癌中可能作为一种致癌基因发挥作用,并可能成为新的诊断和/或治疗靶点[5]。

在乳腺癌中,EphA8的表达水平升高与肿瘤大小和TNM分期相关。EphA8基因的敲低可以增加乳腺癌细胞的凋亡水平,并降低其增殖、迁移和侵袭能力。此外,EphA8基因的敲低还可以降低AKT的磷酸化水平,并下调Bcl-2的表达水平,同时上调p53、Caspase-3和Bax的表达水平。这些结果表明,EphA8基因在乳腺癌中可能作为一种抑癌基因发挥作用,并可能成为新的预后标志物和辅助化疗策略[6]。

EphA8受体具有一个独特的细胞内Sterile Alpha Motif (SAM)结构域,这使其与其他受体酪氨酸激酶区分开来。研究表明,SASH1(SAM和SH3结构域1)是Eph受体的一个新型结合伙伴,它通过SAM-SAM结构域相互作用与EphA8受体选择性结合。EphA8和SASH1在哺乳动物细胞中共同定位和共沉淀,并且SASH1介导的EphA8激酶活性的调节依赖于SAM-SAM相互作用。这些研究结果为Eph信号通路和肿瘤抑制基因SASH1的分子基础提供了新的见解[7]。

microRNA-10a(miR-10a)通过负调节EphA8的表达来促进细胞迁移和侵袭。EphA8的过表达可以抵消miR-10a诱导的迁移和侵袭的促进作用。此外,miR-10a和EphA8通过调节上皮-间质转化(EMT)来影响细胞的迁移和侵袭。这些研究表明,miR-10a/EphA8通路在胶质瘤的进展中起着调节作用[8]。

EphA8受体通过p110γ磷脂酰肌醇-3激酶(PI 3-激酶)在不依赖其酪氨酸激酶活性的方式下调节整合素活性。EphA8受体的表达可以增强细胞对纤连蛋白的粘附,而这种粘附作用依赖于Ephrin A与受体细胞外域和跨膜区域的结合。此外,EphA8受体与p110γ PI 3-激酶相关,并且EphA8的细胞质区域可以与p110γ形成稳定的复合物。这些结果表明,EphA8受体以一种不依赖其酪氨酸激酶活性的方式将p110γ PI 3-激酶定位于质膜,从而允许对脂质底物进行信号传导,以实现整合素介导的细胞粘附[9]。

L-蛋氨酸已被证明可以抑制可卡因依赖的行为。研究表明,L-蛋氨酸可以反向调节可卡因影响下的基因和miRNA表达。与药物成瘾相关的通路仅在CS-down与MC-up基因中富集,包括GABA能突触、谷氨酸能突触、昼夜节律调节、轴突导向和钙信号通路。预测的药物成瘾相关网络由22个DEG组成,包括钙通道基因(Cacna1c、Cacna1e、Cacna1g和Cacng8)、Ephrin受体基因(Ephb6和Epha8)和ryanodine受体基因(Ryr1和Ryr2)。这些结果表明,L-蛋氨酸在对抗可卡因CPP方面具有疗效,并可能为更好地理解L-蛋氨酸对可卡因滥用的影响提供一些线索[10]。

综上所述,EphA8基因在胚胎发育、神经系统的轴突导向、细胞粘附和迁移以及多种癌症的发生和发展中发挥着重要作用。EphA8基因的表达受到多种转录因子的调控,并且与多种信号通路相互作用,如AKT信号通路和PI 3-激酶信号通路。此外,EphA8基因的表达还受到microRNA的调控。EphA8基因的研究有助于深入理解Eph信号通路和细胞粘附、迁移和轴突导向的分子机制,并为多种疾病的治疗和预防提供新的思路和策略。

参考文献:
1. Shim, Sungbo, Kim, Yujin, Shin, Jongdae, Kim, Jieun, Park, Soochul. 2006. Regulation of EphA8 gene expression by TALE homeobox transcription factors during development of the mesencephalon. In Molecular and cellular biology, 27, 1614-30. doi:. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/17178831/
2. Jeong, J, Choi, S, Gu, C, Lee, H, Park, S. . Genomic structure and promoter analysis of the mouse EphA8 receptor tyrosine kinase gene. In DNA and cell biology, 19, 291-300. doi:. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/10855796/
3. Kim, Yujin, Song, Eunsook, Choi, Soonyoung, Park, Soochul. . Engineering lacZ Reporter gene into an ephA8 bacterial artificial chromosome using a highly efficient bacterial recombination system. In Journal of biochemistry and molecular biology, 40, 656-61. doi:. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/17927897/
4. Park, S, Frisén, J, Barbacid, M. . Aberrant axonal projections in mice lacking EphA8 (Eek) tyrosine protein kinase receptors. In The EMBO journal, 16, 3106-14. doi:. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/9214628/
5. Wang, Yingjing, Zhou, Nan, Li, Peng, Wang, Xudong, Huang, Jianfei. 2019. EphA8 acts as an oncogene and contributes to poor prognosis in gastric cancer via regulation of ADAM10. In Journal of cellular physiology, 234, 20408-20419. doi:10.1002/jcp.28642. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/31026069/
6. Wang, Gui-Hua, Ni, Kan, Gu, Changjiang, Wang, Xu-Dong, Ni, Qichao. 2021. EphA8 inhibits cell apoptosis via AKT signaling and is associated with poor prognosis in breast cancer. In Oncology reports, 46, . doi:10.3892/or.2021.8134. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/34278497/
7. Ding, Yuzhen, Chen, Qiangou, Shan, Hui, Li, Jianchao, Liu, Wei. 2023. SASH1: A Novel Eph Receptor Partner and Insights into SAM-SAM Interactions. In Journal of molecular biology, 435, 168243. doi:10.1016/j.jmb.2023.168243. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/37619706/
8. Yan, Yan, Wang, Qin, Yan, Xiao-Ling, Li, Xu, Yang, Ping. 2015. miR-10a controls glioma migration and invasion through regulating epithelial-mesenchymal transition via EphA8. In FEBS letters, 589, 756-65. doi:10.1016/j.febslet.2015.02.005. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/25683004/
9. Gu, C, Park, S. . The EphA8 receptor regulates integrin activity through p110gamma phosphatidylinositol-3 kinase in a tyrosine kinase activity-independent manner. In Molecular and cellular biology, 21, 4579-97. doi:. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/11416136/
10. Wang, Yan, Yang, Lvyu, Zhou, Hansheng, Zhang, Kunlin, Zhao, Mei. 2023. Identification of miRNA-mediated gene regulatory networks in L-methionine exposure counteracts cocaine-conditioned place preference in mice. In Frontiers in genetics, 13, 1076156. doi:10.3389/fgene.2022.1076156. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/36744178/