智鼠故事 
C57BL/6JCya-Brafem1flox/Cya 条件性基因敲除小鼠
复苏/繁育服务
产品名称：
Braf-flox
产品编号：
S-CKO-00808
品系背景：
C57BL/6JCya
* 使用本品系发表的文献需注明：Braf-flox mice (Strain S-CKO-00808) were purchased from Cyagen.
交付类型
周龄
性别
基因型
数量
只
基本信息
品系名称
C57BL/6JCya-Brafem1flox/Cya
品系编号
CKOCMP-109880-Braf-B6J-VA
产品编号
S-CKO-00808
基因名
Braf
品系背景
C57BL/6JCya
基因别称
B-raf；Braf2；Braf-2；C230098H17；D6Ertd631e；9930012E13Rik
NCBI号
修饰方式
条件性基因敲除
品系说明
该品系是基于策略设计时的数据库信息制作而成，建议您在购买前查询最新的数据库和相关文献，以获取最准确的表型信息。
小鼠表型
MGI:88190 Homozygous null embryos die during organogenesis, are smaller, have enlarged blood vessels, hemorrhaging, poor circulation, slow heartbeat and abnormal endothelial cell development. Mice homozygous for a targeted allele activated in neurons exhibit impaired neuronal differentiation.
质控标准
精子检测
① 冷冻前验证精子活力观察
② 冷冻验证每批次进行复苏验证
品系状态
活体
环境标准
SPF
供应地区
中国
品系详情
Braf位于小鼠的6号染色体，采用基因编辑技术，通过高通量电转受精卵方式，获得Braf基因条件性敲除小鼠，性成熟后取精子冻存。
Braf-flox小鼠是由赛业生物（Cyagen）采用基因编辑技术构建的条件性基因敲除小鼠。Braf基因位于小鼠6号染色体上，由22个外显子组成，其中ATG起始密码子在1号外显子，TAG终止密码子在22号外显子。条件性敲除区域（cKO区域）位于5号外显子，包含104个碱基对的编码序列。删除该区域会导致小鼠Braf基因功能的丧失。构建Braf-flox小鼠模型的过程包括将核糖核蛋白（RNP）和靶向载体共同注入受精卵。随后，对出生的小鼠进行PCR和测序分析进行基因型鉴定。需要注意的是，纯合子敲除胚胎在器官形成过程中会死亡，表现为体型较小、血管扩张、出血、血液循环不良、心跳缓慢以及内皮细胞发育异常。对于神经元中激活的靶向等位基因的纯合子小鼠，会表现出神经元分化受损。5号外显子涵盖了编码区的4.31%。5'-loxP位点的插入区域位于第四个内含子，大小为11028个碱基对；3'-loxP位点的插入区域位于第五个内含子，大小为1139个碱基对。有效的cKO区域大小约为0.6千碱基对。这个策略是基于现有数据库中的遗传信息设计的。由于生物过程的复杂性，现有技术水平的限制，loxP插入对基因转录、RNA剪接和蛋白质翻译的风险无法完全预测。
基因研究概述
BRAF基因，即V-raf murine sarcoma viral oncogene homolog B1，是Raf基因家族成员之一，编码丝氨酸/苏氨酸激酶，参与调节细胞生长、分化和生存等过程。BRAF基因突变与多种癌症的发生发展密切相关，如结直肠癌、黑色素瘤、肺癌和胆管癌等。
在结直肠癌中，BRAF基因突变主要发生在15号外显子，导致V600E突变，即缬氨酸被谷氨酸取代，激活下游的RAS/RAF/MEK/ERK-MAPK信号通路，促进细胞增殖和肿瘤生长[1]。研究表明，BRAF突变与结直肠癌的预后密切相关，突变患者生存期较短[2]。此外，BRAF突变还可以作为抗EGFR治疗的负性预测因子[2]。
黑色素瘤中，BRAF突变也主要发生在15号外显子，V600E突变是黑色素瘤中最常见的突变之一[3]。研究表明，BRAF突变与黑色素瘤的预后密切相关，突变患者生存期较短[3]。BRAF抑制剂 vemurafenib 可有效治疗 BRAF 突变的黑色素瘤患者[4]。
肺癌中，BRAF基因突变发生率相对较低，主要发生在15号外显子，V600E突变是肺癌中最常见的突变之一[5]。研究表明，BRAF突变与肺癌的预后密切相关，突变患者生存期较短[5]。BRAF抑制剂可能对 BRAF 突变的肺癌患者具有治疗潜力[5]。
胆管癌中，BRAF基因突变发生率相对较高，主要发生在15号外显子，V600E突变是胆管癌中最常见的突变之一[6]。研究表明，BRAF突变与胆管癌的发生发展密切相关，突变患者生存期较短[6]。BRAF抑制剂可能对 BRAF 突变的胆管癌患者具有治疗潜力[6]。
综上所述，BRAF基因突变与多种癌症的发生发展密切相关，突变类型主要为V600E突变。BRAF突变可以激活下游的RAS/RAF/MEK/ERK-MAPK信号通路，促进细胞增殖和肿瘤生长。BRAF突变与癌症的预后密切相关，突变患者生存期较短。BRAF抑制剂可能对 BRAF 突变的癌症患者具有治疗潜力。
参考文献：
1. You, Z, Xu, L L, Li, X F, DU, J, Sun, L S. . [BRAF gene mutations in ameloblastic fibromas]. In Beijing da xue xue bao. Yi xue ban = Journal of Peking University. Health sciences, 51, 4-8. doi:10.19723/j.issn.1671-167X.2019.01.002. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/30773536/
2. Afrăsânie, Vlad-Adrian, Marinca, Mihai Vasile, Alexa-Stratulat, Teodora, Miron, Lucian, Rusu, Cristina. 2019. KRAS, NRAS, BRAF, HER2 and microsatellite instability in metastatic colorectal cancer - practical implications for the clinician. In Radiology and oncology, 53, 265-274. doi:10.2478/raon-2019-0033. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/31553708/
3. Uhlitz, Florian, Bischoff, Philip, Peidli, Stefan, Blüthgen, Nils, Morkel, Markus. 2021. Mitogen-activated protein kinase activity drives cell trajectories in colorectal cancer. In EMBO molecular medicine, 13, e14123. doi:10.15252/emmm.202114123. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/34409732/
4. Huang, Dongdong, Sun, Wenjie, Zhou, Yuwei, Wu, Yihua, Zhang, Honghe. . Mutations of key driver genes in colorectal cancer progression and metastasis. In Cancer metastasis reviews, 37, 173-187. doi:10.1007/s10555-017-9726-5. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/29322354/
5. Li, Wei, Xu, Han, Xiao, Tengfei, Brown, Myles, Liu, X Shirley. . MAGeCK enables robust identification of essential genes from genome-scale CRISPR/Cas9 knockout screens. In Genome biology, 15, 554. doi:. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/25476604/
6. Philpott, Charlotte, Tovell, Hannah, Frayling, Ian M, Cooper, David N, Upadhyaya, Meena. 2017. The NF1 somatic mutational landscape in sporadic human cancers. In Human genomics, 11, 13. doi:10.1186/s40246-017-0109-3. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/28637487/
