智鼠故事 
C57BL/6NCya-Creld2em1/Cya 基因敲除小鼠
复苏/繁育服务
产品名称：
Creld2-KO
产品编号：
S-KO-15720
品系背景：
C57BL/6NCya
* 使用本品系发表的文献需注明：Creld2-KO mice (Strain S-KO-15720) were purchased from Cyagen.
交付类型
周龄
性别
基因型
数量
只
基本信息
品系名称
C57BL/6NCya-Creld2em1/Cya
品系编号
KOCMP-76737-Creld2-B6N-VA
产品编号
S-KO-15720
基因名
Creld2
品系背景
C57BL/6NCya
基因别称
5730592L21Rik
NCBI号
修饰方式
全身性基因敲除
品系说明
该品系是基于策略设计时的数据库信息制作而成，建议您在购买前查询最新的数据库和相关文献，以获取最准确的表型信息。
小鼠表型
MGI:1923987 Male mice homozygous for a knock-out allele show increased susceptibility to hepatic steatosis after pharmacological ER stress induction, increased susceptibility to age-related hepatic steatosis, and decreased susceptibility to diet-induced hepatic steatosis. Females mice do not develop hepatic steatosis with progressing age.
质控标准
精子检测
① 冷冻前验证精子活力观察
② 冷冻验证每批次进行复苏验证
品系状态
活体
环境标准
SPF
供应地区
中国
品系详情
Creld2位于小鼠的15号染色体，采用基因编辑技术，通过应用高通量电转受精卵方式，获得Creld2基因敲除小鼠，性成熟后取精子冻存。
Creld2-KO小鼠模型是由赛业生物（Cyagen）采用基因编辑技术构建的全基因组敲除小鼠。Creld2基因位于小鼠15号染色体上，包含10个外显子，其中ATG起始密码子位于1号外显子，TGA终止密码子位于10号外显子。赛业生物（Cyagen）选择了第5到9号外显子作为目标区域，该区域包含594个碱基对的编码序列。敲除该区域会导致Creld2基因功能的丧失，从而为研究Creld2基因在生物体内的功能提供了条件。
Creld2-KO小鼠模型的构建过程包括将核糖核蛋白（RNP）和靶向载体共同注入受精卵。随后，对出生的小鼠进行PCR和测序分析进行基因型鉴定。经过基因型鉴定，确认了Creld2基因的敲除。携带敲除等位基因的雄性小鼠在药物性内质网应激诱导后表现出更高的肝脂肪变性易感性，并且在年龄相关的肝脂肪变性方面也表现出更高的易感性，但在饮食诱导的肝脂肪变性方面表现出较低的易感性。雌性小鼠在年龄增长过程中不会发展成肝脂肪变性。
Creld2-KO小鼠模型可用于研究Creld2基因在小鼠体内的功能，特别是其在肝脂肪变性发生发展中的作用。通过研究携带敲除等位基因的小鼠，研究人员可以进一步了解Creld2基因在肝脂肪变性发生发展中的机制和功能。
基因研究概述
Creld2，全称为Cysteine-rich with EGF-like domains 2，是富含半胱氨酸和表皮生长因子（EGF）样结构域的蛋白质家族的第二位成员。这个家族的第一个成员是Creld1，也称为AVSD2基因，其突变与心脏房室隔缺损（AVSD）有关。Creld2在发育过程中被广泛表达，并在成熟组织中持续表达。最近的研究发现，Creld2的一个特定异构体（Creld2beta）作为α4β2烟碱型乙酰胆碱受体的表达调节因子，这表明Creld2家族在发育事件和细胞功能中具有广泛多样的生物学作用[1]。
Creld2的基因定位在22号染色体上的q13区域，而不是GenBank报道的p13区域。比较基因组分析显示，其上游序列在多种物种中高度保守，具有特征性标志，表明存在一个启动子区域。功能分析表明，该区域具有启动子活性。由于Creld2的广泛表达，该区域富含GC，缺乏TATA框。总体而言，Creld2在成年内分泌组织中的表达水平最高。然而，Creld2的替代剪接非常广泛，已证实多种剪接变异体在大多数正常胎儿和成年组织中表达。已确认的剪接变异体编码5种不同的Creld2异构体，其组成差异显著，表明Creld2的功能多样化且尚未完全理解[1]。
Creld2是一种内质网（ER）驻留的伴侣蛋白，具有钙结合特性。Creld2是一种ER应激调节基因，与骨骼发育异常的发病机制有关，并且在软骨细胞和成骨细胞的分化中发挥重要作用。尽管Creld2在骨骼发育和骨形成中已确立作用，但其在破骨细胞中的作用目前尚不清楚。研究表明，Creld2在破骨细胞分化过程中发挥新的作用，调节钙释放和钙调神经磷酸酶（calcineurin）-NFAT信号通路。Creld2的过表达损害了破骨细胞的分化，这是由于钙调神经磷酸酶的活性降低，进而导致活化T细胞核因子（NFATc1）的去磷酸化受阻，防止其核定位和激活作为破骨细胞生成转录因子。这些结果表明，Creld2在调节破骨细胞分化过程中钙通量方面具有新的抑制作用，这对于我们理解骨重塑和骨骼疾病的发生机制具有重要意义[2]。
Creld2是一种新的内质网应激诱导基因。内质网应激反应在维持各种细胞功能方面发挥着重要作用，并可能导致许多组织功能障碍。研究发现，在神经2a细胞中，Creld2的mRNA由内质网应激诱导剂硫磺菌素（Tg）诱导。在Creld2的启动子区域，发现了一个典型的内质网应激反应元件（ERSE），这在多种物种中高度保守。通过荧光素酶报告分析，证明了小鼠Creld2中的ERSE是功能性的，并响应Tg和ATF6过表达。小鼠Creld2启动子中ATF6或NF-Y结合位点的突变显着降低了其基础活性和对内质网应激刺激的反应性。这些研究表明，Creld2可能是调节各种内质网应激相关疾病的发生和进展的新型介质[3]。
小鼠Creld2和ALG12基因排列成双向（头对头）基因对，并由一个共同的启动子调控。这个短的非基因间区域包含一个内质网应激反应元件（ERSE）序列，在人类、大鼠和小鼠基因组中高度保守。微阵列分析显示，在神经2a细胞中，Creld2和ALG12 mRNA的表达在ER应激诱导剂硫磺菌素的诱导下呈时间依赖性增加。其他内质网应激诱导剂，如羊毛甾醇和曲古霉素，也增加了这些mRNA的表达。这些发现表明，小鼠Creld2和ALG12基因是独特的双向基因对，它们可能受到ATF6和多个其他转录因子的联合调控[4]。
Creld2和CDNF（脑源性神经营养因子）都是内质网驻留蛋白，具有相似的C末端序列。研究表明，Creld2的分泌可以通过CDNF的过表达来促进。此外，CDNF的C末端序列对其分泌具有影响，而Creld2的C末端序列则对其与内质网伴侣蛋白的结合具有影响。这些结果表明，Creld2和CDNF的分泌和功能可能受到其C末端序列的调节[5]。
Creld2的基因表达受到α4β2烟碱型乙酰胆碱受体激活的调控。尼古丁可以上调Creld2的表达，而α4β2受体的拮抗剂则可以抑制这种上调。Creld2的表达也与尼古丁的炎症抑制作用有关，这表明Creld2可能参与调节尼古丁的生物学效应[6]。
Creld2在神经2a细胞中的表达在ER应激诱导剂处理后增加。Creld2缺陷的神经2a细胞对ER应激更加敏感，这表明Creld2在维持内质网稳态和调节细胞对ER应激的反应方面发挥着重要作用[7]。
Creld2的表达受到多种因素的调控，包括ATF6和ATF4。ATF6和ATF4是内质网应激反应的关键转录因子，它们通过结合到Creld2启动子上的特定位点来调节Creld2的表达。此外，Creld2与ER相关蛋白降解（ERAD）底物α1-抗胰蛋白酶截断突变体NHK相互作用，这表明Creld2可能参与ERAD通路[8]。
Creld2和Armet（ER应激相关基因）是内质网应激反应的组成部分。它们在内质网应激过程中被上调，并与突变蛋白相互作用，如突变型matrilin-3。Creld2具有蛋白二硫键异构酶（PDI）样活性，这表明它可能参与调节蛋白质折叠和内质网稳态[9]。
Creld2的表达与子宫体子宫内膜癌（UCEC）的预后相关。研究表明，Creld2的表达水平可以用于预测UCEC患者的生存率，并可能有助于寻找新的治疗方法[10]。
综上所述，Creld2是一种重要的内质网应激诱导基因，参与调节蛋白质折叠、钙通量和内质网稳态。Creld2在骨骼发育、破骨细胞分化和细胞对内质网应激的反应中发挥重要作用。Creld2的表达受到多种因素的调控，包括转录因子和蛋白质相互作用。Creld2的研究对于理解内质网应激和骨骼疾病的发生机制具有重要意义，并为疾病的治疗和预防提供了新的思路和策略。
参考文献：
1. Maslen, Cheryl L, Babcock, Darcie, Redig, Jennifer K, Akkari, Yassmine M, Olson, Susan B. 2006. CRELD2: gene mapping, alternate splicing, and comparative genomic identification of the promoter region. In Gene, 382, 111-20. doi:. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/16919896/
2. Duxfield, Adam, Munkley, Jennifer, Briggs, Michael D, Dennis, Ella P. 2022. CRELD2 is a novel modulator of calcium release and calcineurin-NFAT signalling during osteoclast differentiation. In Scientific reports, 12, 13884. doi:10.1038/s41598-022-17347-0. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/35974042/
3. Oh-hashi, Kentaro, Koga, Hisashi, Ikeda, Shun, Hirata, Yoko, Kiuchi, Kazutoshi. 2009. CRELD2 is a novel endoplasmic reticulum stress-inducible gene. In Biochemical and biophysical research communications, 387, 504-10. doi:10.1016/j.bbrc.2009.07.047. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/19615339/
4. Oh-Hashi, Kentaro, Koga, Hisashi, Ikeda, Shun, Hirata, Yoko, Kiuchi, Kazutoshi. 2010. Role of an ER stress response element in regulating the bidirectional promoter of the mouse CRELD2 - ALG12 gene pair. In BMC genomics, 11, 664. doi:10.1186/1471-2164-11-664. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/21106106/
5. Norisada, Junpei, Hirata, Yoko, Amaya, Fumimasa, Kiuchi, Kazutoshi, Oh-hashi, Kentaro. 2016. A Comparative Analysis of the Molecular Features of MANF and CDNF. In PloS one, 11, e0146923. doi:10.1371/journal.pone.0146923. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/26820513/
6. Hosur, Vishnu, Leppanen, Scott, Abutaha, Adham, Loring, Ralph H. 2009. Gene regulation of alpha4beta2 nicotinic receptors: microarray analysis of nicotine-induced receptor up-regulation and anti-inflammatory effects. In Journal of neurochemistry, 111, 848-58. doi:10.1111/j.1471-4159.2009.06373.x. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/19732285/
7. Oh-Hashi, Kentaro, Fujimura, Keito, Norisada, Junpei, Hirata, Yoko. 2018. Expression analysis and functional characterization of the mouse cysteine-rich with EGF-like domains 2. In Scientific reports, 8, 12236. doi:10.1038/s41598-018-30362-4. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/30111858/
8. Hinaga, Shohei, Kandeel, Mahmoud, Oh-Hashi, Kentaro. 2024. Molecular characterization of the ER stress-inducible factor CRELD2. In Cell biochemistry and biophysics, 82, 1463-1475. doi:10.1007/s12013-024-01300-1. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/38753249/
9. Hartley, Claire L, Edwards, Sarah, Mullan, Lorna, Boot-Handford, Raymond P, Briggs, Michael D. 2013. Armet/Manf and Creld2 are components of a specialized ER stress response provoked by inappropriate formation of disulphide bonds: implications for genetic skeletal diseases. In Human molecular genetics, 22, 5262-75. doi:10.1093/hmg/ddt383. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/23956175/
10. Zhou, Pei, Wu, Caiyun, Ma, Cong, Zhou, Ping, Wei, Zhaolian. 2022. Identification of an endoplasmic reticulum stress-related gene signature to predict prognosis and potential drugs of uterine corpus endometrial cancer. In Mathematical biosciences and engineering : MBE, 20, 4018-4039. doi:10.3934/mbe.2023188. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/36899615/
