Btk（Bruton's tyrosine kinase）是一种非受体酪氨酸激酶，在B细胞的发展和功能中起着至关重要的作用。Btk基因最初被发现与X连锁无丙种球蛋白血症（XLA）有关，XLA是一种由于Btk基因突变导致的原发性免疫缺陷病，导致患者缺乏成熟B细胞和循环免疫球蛋白，从而无法产生体液免疫反应。Btk在B细胞抗原受体（BCR）信号传导途径下游发挥作用，参与调节B细胞的存活、增殖和功能。

Btk在多种B细胞恶性肿瘤中起着致癌信号传导的关键作用。最近的研究表明，Btk的小分子抑制剂在动物模型和临床试验中显示出良好的抗肿瘤活性。特别是口服不可逆的Btk抑制剂依鲁替尼（ibrutinib）在复发/难治性慢性淋巴细胞白血病（CLL）和套细胞淋巴瘤（MCL）患者中表现出高反应率，包括具有高风险基因病变的患者。由于依鲁替尼通常耐受性良好且具有持久的单药疗效，因此它于2016年被迅速批准用于CLL患者的一线治疗。迄今为止，依鲁替尼在各种其他B细胞恶性肿瘤中的疗效正在积累证据。Btk抑制不仅限于其经典的BCR信号传导作用，还涉及B细胞内在的信号传导途径，这些途径对于细胞存活、增殖或在淋巴组织中的滞留至关重要。此外，Btk还在几种髓细胞群体中发挥作用，这些群体是肿瘤微环境的重要组成部分。因此，目前对Btk抑制作为抗癌疗法的研究兴趣浓厚，不仅在B细胞恶性肿瘤中，在实体瘤中也有应用潜力。Btk抑制作为单一疗法的效果显著，但可能产生耐药性，这促使人们开发组合疗法以改善临床反应。文献综述了Btk在B细胞分化和B细胞恶性肿瘤中的作用，并强调了Btk抑制在癌症治疗中的重要性[1]。

基因治疗是治疗XLA的一种潜在方法。使用同源重组技术，研究者构建了一种针对Btk基因的基因治疗载体，用于治疗XLA。该载体包含Btk外显子6-19的基因组序列和一个由巨细胞病毒启动子驱动的绿色荧光蛋白-潮霉素抗性基因盒。使用人类男性前B急性淋巴细胞白血病细胞系Nalm-6作为受体细胞，研究者测量了基因靶向的同源重组效率。在两个独立实验中，从107个潮霉素抗性稳定克隆中鉴定出10个具有Btk基因同源重组的克隆。随后，研究者使用脐带血CD34⁺细胞作为基因靶向的受体细胞。在含有细胞因子和潮霉素的培养基中生长，研究者分离出了一些生长的克隆。研究者发现，在755个潮霉素抗性克隆中，Btk基因的靶向发生率为4个。重要的是，在生长选择培养基中，从同源重组的CD34⁺细胞分化而来的CD19⁺淋巴祖细胞中也观察到了基因靶向。该研究结果表明，使用HD-Ad.AAV BTK载体通过同源重组在造血干细胞中进行Btk基因治疗具有潜力[2]。

Btk在肺癌中的作用也逐渐受到关注。研究者通过计算方法分析了来自TCGA数据库的551例肺癌腺癌（LUAD）病例中的肿瘤微环境（TME）成分。差异表达基因（DEGs）通过COX回归分析和蛋白质-蛋白质相互作用（PPI）网络构建进行了分析。通过单变量COX和PPI的交集分析，Btk被确定为预测因子。进一步分析发现，Btk表达与LUAD患者的临床病理特征（临床分期、远处转移）呈负相关，与生存期呈正相关。基因集富集分析（GSEA）显示，Btk高表达组的基因主要富集在免疫相关活动中，而Btk低表达组的基因则富集在代谢途径中。CIBERSORT分析TICs的比例表明，B细胞记忆和CD8⁺T细胞与Btk表达呈正相关，提示Btk可能负责维持TME的免疫优势状态。因此，Btk的水平可能有助于预测LUAD患者的预后，并特别提示TME从免疫优势状态转变为代谢活性状态，为LUAD的治疗提供了新的见解[3]。

Btk基因的突变也与B细胞缺陷相关。研究者描述了22个新的Btk基因变异，这些变异与B细胞缺陷和低丙种球蛋白血症相关。遗传数据与Btk蛋白表达和临床及家族病史相关联，以全面评估这些新变异在Btk基因中的临床病理意义。对于一种新的错义变异p.Cys502Tyr，进行了位点特异性诱变，以确定序列变化对蛋白表达和稳定性的影响。遗传数据应尽可能与蛋白和/或临床和免疫学数据相关联，以确定基因序列改变的临床意义[4]。

在慢性淋巴细胞白血病（CLL）中，Btk突变对治疗的影响也是一个研究热点。研究者回顾性分析了609例接受Btk抑制剂治疗的CLL患者，其中85例在治疗期间或之后进行了下一代测序（NGS）。结果显示，在进展期的患者中，17p缺失、复杂核型和既往治疗（包括Btki）的发生率更高。在57个基因中发现了216个变异，其中进展组（PD组）的变异更多（158个变异，70.3%为致病性，P<0.001）。进展组中致病性变异的发生率更高（70.3%，P<0.001），包括32个Btk（BTK C481S/F/R/Y，L528W和T474I/L）和4个PLCG2突变。值得注意的是，在一线依鲁替尼耐药患者中发现了一个高变异等位基因频率（VAF）的L528W突变。TP53、SF3B1和NOTCH2突变在进展组中更为常见（P<0.01，P<0.05，P<0.05）。此外，MAPK通路基因突变在进展组中更为常见，且VAF更高（P=0.041）。在进展的pirtobrutinib患者中发现了T474突变，Btk L528W突变可能同时出现在共价和非共价Btki治疗中。这些结果还表明，RAS/RAF/MAPK通路基因突变可能有助于Btki耐药性[5]。

Btk的发现和依鲁替尼的开发为白血病的管理提供了新的思路。Btk是一种细胞质蛋白酪氨酸激酶，其相关基因在20世纪90年代初通过定位克隆技术被分离出来。由于受影响患者的表型为缺乏B淋巴细胞和浆细胞，进而无法产生体液免疫反应，因此预期Btk抑制剂对自身免疫性疾病等抗体介导的病理状态具有有益作用。与SRC家族的细胞质激酶不同，Btk的结构改变不会导致其持续活化形式，且在白血病或淋巴瘤中也没有发现此类突变。2007年，第一个有效的抑制剂依鲁替尼被报道，并很快在美国和欧洲获得批准，用于治疗三种B细胞恶性肿瘤，即套细胞淋巴瘤、慢性淋巴细胞白血病和瓦登斯特伦巨球蛋白血症。近年来，已经开发了其他抑制剂，其中acalabrutinib的选择性更高，且最近显示临床不良反应较少。抗肿瘤机制与Btk突变无关，而是通过抑制肿瘤在淋巴器官中的定植来实现，这使得这些药物具有高度的多功能性。Btk是人类10种携带半胱氨酸的激酶之一，半胱氨酸位于腺苷三磷酸结合裂隙中。这使得这些化合物具有高度的优势，因为它们可以与共价、不可逆的抑制剂结合。这种特性可能至关重要，并为Btk修饰药物的未来发展带来了良好的前景[6]。

总之，Btk在B细胞的发展和功能中发挥着重要作用，并且与多种B细胞恶性肿瘤的发生发展密切相关。Btk抑制剂作为一种新的抗癌疗法，已经在CLL和MCL等疾病中显示出良好的疗效。然而，耐药性的产生仍然是一个挑战，需要进一步研究以克服耐药性并提高治疗效果。此外，Btk在肺癌等实体瘤中的作用也逐渐受到关注，为癌症的治疗提供了新的思路和策略。未来研究可以进一步探索Btk在肿瘤发生发展中的作用机制，以及Btk抑制剂在癌症治疗中的应用潜力。