智鼠故事 
C57BL/6JCya-Neto2em1flox/Cya 条件性基因敲除小鼠
复苏/繁育服务
产品名称：
Neto2-flox
产品编号：
S-CKO-16039
品系背景：
C57BL/6JCya
* 使用本品系发表的文献需注明：Neto2-flox mice (Strain S-CKO-16039) were purchased from Cyagen.
交付类型
周龄
性别
基因型
数量
只
基本信息
品系名称
C57BL/6JCya-Neto2em1flox/Cya
品系编号
CKOCMP-74513-Neto2-B6J-VA
产品编号
S-CKO-16039
基因名
Neto2
品系背景
C57BL/6JCya
基因别称
BTCL2；5530601C23Rik
NCBI号
修饰方式
条件性基因敲除
品系说明
该品系是基于策略设计时的数据库信息制作而成，建议您在购买前查询最新的数据库和相关文献，以获取最准确的表型信息。
小鼠表型
MGI:1921763 Mice homozygous for a null mutation show normal brain morphology and kainate receptor mediated excitatory postsynaptic currents.
质控标准
精子检测
① 冷冻前验证精子活力观察
② 冷冻验证每批次进行复苏验证
品系状态
活体
环境标准
SPF
供应地区
中国
品系详情
Neto2位于小鼠的8号染色体，采用基因编辑技术，通过高通量电转受精卵方式，获得Neto2基因条件性敲除小鼠，性成熟后取精子冻存。
Neto2-flox小鼠模型由赛业生物（Cyagen）采用基因编辑技术构建的条件性基因敲除小鼠。Neto2基因位于小鼠8号染色体上，由9个外显子组成，其中ATG起始密码子在1号外显子，TAA终止密码子在9号外显子。条件性敲除区域（cKO区域）位于第5号到6号外显子之间，包含152个碱基对的编码序列。删除该区域会导致小鼠Neto2基因功能的丧失。
Neto2-flox小鼠模型的构建过程包括将核糖核蛋白（RNP）和靶向载体共同注入受精卵。随后，对出生的小鼠进行PCR和测序分析进行基因型鉴定。携带敲除等位基因的小鼠表现出正常的脑形态和海人酸受体介导的兴奋性突触后电流。敲除第5号到6号外显子会导致基因移码，并覆盖9.16%的编码区域。第4号内含子插入5'-loxP位点的长度为6102个碱基对，第6号内含子插入3'-loxP位点的长度为15234个碱基对。有效的cKO区域长度约为0.8千碱基对。
基因研究概述
Neto2，也称为Neuropilin and tolloid-like 2，是一种在神经元特异性过程中发挥作用的单次跨膜蛋白。它在多种癌症中表达上调，包括食管癌、结直肠癌、骨肉瘤、黑色素瘤和胃癌等，与肿瘤的进展、侵袭和转移相关[1,2,4,5,6]。Neto2作为谷氨酸受体家族中一种重要的辅助亚基，对神经元发育、突触可塑性和神经系统疾病等生理和病理过程具有调节作用[3]。此外，Neto2还参与了细胞信号转导，影响癌症的发生和发展。
Neto2在食管癌中的作用已被研究报道。研究发现，Neto2的表达水平与食管癌患者的肿瘤临床分期和淋巴结转移状态相关。功能分析显示，Neto2能够促进食管癌细胞增殖并抑制细胞凋亡，增强肿瘤生长。此外，敲低Neto2的表达显著抑制了肿瘤细胞的迁移和侵袭，并调节了上皮-间质转化(EMT)相关标记物的表达。机制研究表明，Neto2的过表达能够增加ERK、PI3K/AKT和核因子红系-2相关因子2(Nrf2)的磷酸化水平，而沉默Neto2则降低了这些靶标的磷酸化水平。这些数据表明，Nrf2是Neto2介导的肿瘤发生中PI3K/AKT和ERK信号通路的关键下游事件，并在Neto2介导的肿瘤发生中发挥重要作用。因此，Neto2作为一种致癌基因，可能成为食管癌患者的新型治疗靶点或预后生物标志物[1]。
在结直肠癌中，Neto2的表达上调也与肿瘤进展、侵袭和转移相关。研究发现，Neto2的表达与结直肠癌的临床分期、侵袭深度、淋巴结转移和肿瘤大小呈正相关，而与总生存率和无病生存率呈负相关。机制研究表明，Neto2能够通过激活PI3K/Akt/NF-κB/Snail轴促进结直肠癌细胞侵袭和转移。此外，研究还发现TNFRSF12A作为Neto2激活PI3K/Akt/NF-κB/Snail轴的介质。因此，Neto2可以作为结直肠癌患者的一个新型预后指标和潜在的治疗靶点[6]。
在骨肉瘤中，Neto2的表达上调也与肿瘤进展相关。研究发现，Neto2的表达在骨肉瘤组织和细胞系中均上调。功能分析显示，Neto2的过表达能够促进骨肉瘤细胞的增殖、集落形成、侵袭和EMT，并激活PI3K/AKT信号通路。相反，Neto2的下调则导致相反的效果。此外，使用AKT抑制剂可以减弱Neto2对骨肉瘤细胞的影响。因此，Neto2作为一种致癌基因，通过激活PI3K/AKT通路促进骨肉瘤的发生和发展[4,5,6]。
在黑色素瘤中，Neto2的表达上调也与肿瘤进展相关。研究发现，Neto2的表达在黑色素瘤临床组织中上调，并与黑色素瘤患者的预后不良相关。干扰Neto2的表达显著抑制了黑色素瘤细胞的增殖、恶性生长、迁移和侵袭，并下调了钙离子(Ca2+)水平和钙信号通路中关键基因的表达。相反，Neto2的过表达具有相反的效果。重要的是，使用CaMKII抑制剂KN93抑制CaMKII/CREB活性可以抑制Neto2诱导的增殖和黑色素瘤转移。因此，Neto2在黑色素瘤进展中发挥重要作用，靶向Neto2可能有效改善黑色素瘤的治疗[5]。
Neto2在胃癌中的作用也被研究报道。研究发现，Neto2的表达在胃癌组织中上调，并与胃癌的临床分期、侵袭深度、淋巴结转移和肿瘤大小呈正相关，而与总生存率和无病生存率呈负相关。机制研究表明，Neto2能够通过激活PI3K/Akt/NF-κB/Snail轴促进胃癌细胞侵袭和转移。此外，研究还发现TNFRSF12A作为Neto2激活PI3K/Akt/NF-κB/Snail轴的介质。因此，Neto2可以作为胃癌患者的一个新型预后指标和潜在的治疗靶点[6]。
综上所述，Neto2作为一种重要的神经元特异性蛋白和细胞信号转导分子，在多种癌症的发生和发展中发挥重要作用。Neto2的表达上调与食管癌、结直肠癌、骨肉瘤、黑色素瘤和胃癌等肿瘤的进展、侵袭和转移相关。Neto2通过调节PI3K/AKT、ERK和钙信号通路等细胞信号通路，影响肿瘤细胞的增殖、凋亡、迁移和侵袭等生物学行为。因此，Neto2可能成为这些癌症患者的新型治疗靶点或预后生物标志物。
参考文献：
1. Xu, Jia-Cheng, Chen, Tian-Yin, Liao, Le-Tai, Zhou, Ping-Hong, Zhang, Yi-Qun. 2021. NETO2 promotes esophageal cancer progression by inducing proliferation and metastasis via PI3K/AKT and ERK pathway. In International journal of biological sciences, 17, 259-270. doi:10.7150/ijbs.53795. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/33390848/
2. Fedorova, Maria S, Snezhkina, Anastasiya V, Pudova, Elena A, Dmitriev, Alexey A, Kudryavtseva, Anna V. 2017. Upregulation of NETO2 gene in colorectal cancer. In BMC genetics, 18, 117. doi:10.1186/s12863-017-0581-8. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/29297384/
3. Han, Liwei, Howe, James R, Pickering, Darryl S. 2016. Neto2 Influences on Kainate Receptor Pharmacology and Function. In Basic & clinical pharmacology & toxicology, 119, 141-8. doi:10.1111/bcpt.12575. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/26928870/
4. Jia, Yutao, Liu, Yang, Han, Zhihua, Tian, Rong. 2021. Identification of potential gene signatures associated with osteosarcoma by integrated bioinformatics analysis. In PeerJ, 9, e11496. doi:10.7717/peerj.11496. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/34123594/
5. Zhu, Susi, Zhang, Xu, Guo, Yeye, Chen, Xiang, Peng, Cong. 2023. NETO2 promotes melanoma progression via activation of the Ca2+/CaMKII signaling pathway. In Frontiers of medicine, 17, 263-274. doi:10.1007/s11684-022-0935-0. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/36738427/
6. Wang, Xuepeng, Bian, Zhenyu, Hou, Changju, Jiang, Wu, Zhu, Liulong. 2020. Neuropilin and tolloid-like 2 regulates the progression of osteosarcoma. In Gene, 768, 145292. doi:10.1016/j.gene.2020.145292. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/33157203/
