智鼠故事 
C57BL/6JCya-Dtx2em1flox/Cya 条件性基因敲除小鼠
复苏/繁育服务
产品名称：
Dtx2-flox
产品编号：
S-CKO-15911
品系背景：
C57BL/6JCya
* 使用本品系发表的文献需注明：Dtx2-flox mice (Strain S-CKO-15911) were purchased from Cyagen.
交付类型
周龄
性别
基因型
数量
只
基本信息
品系名称
C57BL/6JCya-Dtx2em1flox/Cya
品系编号
CKOCMP-74198-Dtx2-B6J-VA
产品编号
S-CKO-15911
基因名
Dtx2
品系背景
C57BL/6JCya
基因别称
Deltex2；2610524D08Rik
NCBI号
修饰方式
条件性基因敲除
品系说明
该品系是基于策略设计时的数据库信息制作而成，建议您在购买前查询最新的数据库和相关文献，以获取最准确的表型信息。
小鼠表型
MGI:1921448 Mice homozygous for a knock-out allele are viable and overtly normal with no detectable abnormalities in T or B cell development.
质控标准
精子检测
① 冷冻前验证精子活力观察
② 冷冻验证每批次进行复苏验证
品系状态
活体
环境标准
SPF
供应地区
中国
品系详情
Dtx2位于小鼠的5号染色体，采用基因编辑技术，通过高通量电转受精卵方式，获得Dtx2基因条件性敲除小鼠，性成熟后取精子冻存。
Dtx2-flox小鼠模型是由赛业生物（Cyagen）利用基因编辑技术构建的条件性基因敲除小鼠。Dtx2基因位于小鼠5号染色体上，包含11个外显子，ATG起始密码子位于3号外显子，TGA终止密码子位于11号外显子。条件性敲除区域（cKO区域）位于4号外显子，包含637个碱基对的编码序列。删除该区域会导致小鼠Dtx2基因功能的丧失。
Dtx2-flox小鼠模型的构建过程包括使用基因编辑技术将核糖核蛋白（RNP）和靶向载体共同注入受精卵。出生后的小鼠进行PCR和测序分析进行基因型鉴定。结果显示，携带敲除等位基因的小鼠存活且外观正常，T细胞和B细胞发育无异常。
该模型可用于研究Dtx2基因在小鼠体内的功能。通过删除Dtx2基因的4号外显子，可以导致基因的移码突变，从而使其功能丧失。此外，敲除等位基因的覆盖范围达到34.3%的编码区域。插入5'-loxP位点的内含子3大小为1654个碱基对，插入3'-loxP位点的内含子4大小为9107个碱基对。有效的cKO区域大小约为1.1 kb。
赛业生物（Cyagen）的研究人员根据现有数据库中的遗传信息设计了这一策略。然而，由于生物过程的复杂性，目前的技术水平无法预测loxP插入对基因转录、RNA剪接和蛋白质翻译的影响。因此，在使用该模型进行研究时，应谨慎评估潜在风险。
基因研究概述
Dtx2，也称为Deltex E3泛素连接酶2，是一种在多种生物学过程中发挥重要作用的蛋白质。Dtx2属于E3泛素连接酶家族，该家族的成员在蛋白质降解和调控细胞信号通路中起着关键作用。Dtx2包含两个WWE结构域和一个RING finger结构域，这些结构域参与蛋白质-蛋白质相互作用和泛素化过程。Dtx2在多种人类组织中表达，包括心脏、肺、脑和结直肠。
在非小细胞肺癌（NSCLC）中，Dtx2的表达水平升高与不良预后相关。研究发现，Dtx2通过抑制铁死亡，促进NSCLC细胞的生长和增殖。铁死亡是一种由铁依赖的脂质过氧化引起的细胞死亡形式，在多种癌症中发挥重要作用。Dtx2通过与核受体共激活因子4（NCOA4）结合，促进其泛素化和降解，从而抑制NCOA4介导的铁蛋白吞噬和铁死亡。此外，Dtx2的敲低可以增强顺铂诱导的铁死亡，并克服NSCLC细胞的耐药性[1]。
在胶质瘤中，Dtx2的表达水平也升高，并且与不良预后相关。研究发现，Dtx2通过调节螺旋酶样转录因子（HLTF）的表达，促进胶质瘤的发展。Dtx2可以通过增加HLTF蛋白的泛素化，降低其蛋白水平，从而抑制HLTF的抑癌作用。HLTF可以抑制胶质瘤细胞的增殖和迁移。此外，Dtx2的过表达可以促进胶质瘤细胞的生长和迁移，并增加肿瘤体积和重量[2]。
在白血病中，Dtx2可以与转录因子RUNX1结合，抑制其功能。RUNX1在造血和白血病的发生发展中起着重要作用。Dtx2与RUNX1的C端区域结合，并通过泛素化过程抑制其乙酰化，从而降低其转录活性。Dtx2的过表达可以抑制RUNX1依赖性白血病细胞的生长，并导致细胞凋亡[3]。
此外，Dtx2还参与调节抗肿瘤免疫。研究发现，维生素E琥珀酸（VES）可以作为一种降解剂，促进m6A RNA去甲基化酶FTO的降解，从而抑制肿瘤生长和免疫治疗耐药性。FTO是Dtx2的底物，Dtx2通过泛素化过程促进FTO的降解。VES可以与FTO和Dtx2结合，增强FTO-DTX2相互作用，从而促进FTO的泛素化和降解。此外，VES可以增加LIF基因的m6A甲基化水平，并降低LIF mRNA的降解，从而增强T细胞介导的细胞毒性[4]。
Dtx2还参与心脏发育和心脏功能的调节。研究发现，Dtx2在人类胚胎心脏中表达，并且在18周和22.5周的人胚胎心脏中表达水平较高。Dtx2基因位于人类染色体7q11.23上，编码一个包含两个WWE结构域和一个RING finger结构域的蛋白质。Dtx2的表达可能与心脏发育和心脏功能有关[5]。
在结直肠癌中，Dtx2的表达水平升高可以促进细胞的迁移和侵袭。研究发现，Dtx2通过Notch2/Akt轴促进结直肠癌细胞的迁移和侵袭。Dtx2的过表达可以增加Notch2、NICD、p-Akt和MMP-2蛋白的表达水平，从而促进细胞的迁移和侵袭。此外，Dtx2的敲低可以降低这些蛋白的表达水平，并抑制细胞的迁移和侵袭[6]。
Dtx2还参与人类端粒酶的转录调控。研究发现，Dtx2的耗竭可以下调端粒酶逆转录酶（hTERT）的转录和端粒酶活性，导致端粒缩短、细胞生长停滞和凋亡增加。Dtx2可以与多个转录因子相互作用，并通过K63连接的泛素化促进这些转录因子与hTERT启动子的结合，从而增强hTERT的表达[7]。
在脊髓损伤修复中，Dtx2的缺乏可以促进ependymo-放射状胶质细胞的增殖和脊髓运动功能恢复。研究发现，斑马鱼dtx2基因在成年脊髓的ependymo-放射状胶质细胞中表达。Dtx2基因敲除的突变鱼在脊髓损伤后，运动功能恢复更快，并且ependymo-放射状胶质细胞增殖和运动神经元形成增加。此外，Dtx2基因敲除可以增加Notch信号下游基因的表达，并通过激活Notch-Rbpj信号通路促进ependymo-放射状胶质细胞的增殖[8]。
Dtx2还与急性髓细胞白血病中的RUNX1融合基因有关。研究发现，RUNX1基因在急性髓细胞白血病中经常发生重排。在一位急性髓细胞白血病患者中，克隆了一个由t(7;21)(q11.2;q22)产生的RUNX1融合基因。该融合基因由RUNX1基因的3'端和DTX2基因的反义序列组成。该融合基因编码的蛋白质在结构上与RUNX1a相似，并且可以抑制RUNX1的转录激活功能。此外，DTX2的反义序列可能降解野生型DTX2转录本或抑制其翻译[9]。
在胶质瘤中，BRD4可以转录激活Dtx2的表达，促进胶质瘤的进展，并预测不良预后。研究发现，Dtx2的表达水平与胶质瘤患者的生存率相关。Dtx2的过表达可以促进胶质瘤细胞的生长和迁移。此外，BRD4可以与DTX2启动子结合，并通过ChIP-seq分析和荧光素酶报告实验证明BRD4可以转录激活DTX2的表达[10]。
综上所述，Dtx2是一种重要的E3泛素连接酶，参与多种生物学过程，包括铁死亡、肿瘤发生发展、抗肿瘤免疫、心脏发育和心脏功能、脊髓损伤修复和RNA修饰。Dtx2的研究有助于深入理解其在细胞信号通路和疾病发生发展中的作用，为相关疾病的治疗和预防提供新的思路和策略。
参考文献：
1. Liu, Zhuang, Liu, Chang, Fan, Caihong, Qi, Zhi, Shen, Yanna. 2024. E3 ubiquitin ligase DTX2 fosters ferroptosis resistance via suppressing NCOA4-mediated ferritinophagy in non-small cell lung cancer. In Drug resistance updates : reviews and commentaries in antimicrobial and anticancer chemotherapy, 77, 101154. doi:10.1016/j.drup.2024.101154. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/39366066/
2. Li, Ren, Chen, Yang, Yang, Biao, Zhao, Yuanli, Guo, Geng. 2024. DTX2 promotes glioma development via regulation of HLTF. In Biology direct, 19, 2. doi:10.1186/s13062-023-00447-w. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/38163902/
3. Yonezawa, Taishi, Takahashi, Hirotaka, Hao, Yangying, Kitamura, Toshio, Goyama, Susumu. 2023. The E3 ligase DTX2 inhibits RUNX1 function by binding its C terminus and prevents the growth of RUNX1-dependent leukemia cells. In The FEBS journal, 290, 5141-5157. doi:10.1111/febs.16914. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/37500075/
4. Cui, Yan-Hong, Wei, Jiangbo, Fan, Hao, He, Chuan, He, Yu-Ying. 2024. Targeting DTX2/UFD1-mediated FTO degradation to regulate antitumor immunity. In Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America, 121, e2407910121. doi:10.1073/pnas.2407910121. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/39661064/
5. Yi, Zhengfang, Yi, Tingfang, Wu, Zirong. . cDNA cloning, characterization and expression analysis of DTX2, a human WWE and RING-finger gene, in human embryos. In DNA sequence : the journal of DNA sequencing and mapping, 17, 175-80. doi:. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/17286044/
6. Ma, Z, Zhao, X, Zhang, X, Xu, G, Liu, F. . [DTX2 overexpression promotes migration and invasion of colorectal cancer cells through the Notch2/Akt axis]. In Nan fang yi ke da xue xue bao = Journal of Southern Medical University, 43, 340-348. doi:10.12122/j.issn.1673-4254.2023.03.02. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/37087577/
7. Zhou, Zhifen, Li, Yujing, Xu, Huimin, Ma, Wenbin, Songyang, Zhou. 2022. An inducible CRISPR/Cas9 screen identifies DTX2 as a transcriptional regulator of human telomerase. In iScience, 25, 103813. doi:10.1016/j.isci.2022.103813. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/35198878/
8. Chen, Hao-Yuan, Huang, Yin-Cheng, Yeh, Tu-Hsueh, Sun, Mu-Qun, Cheng, Yi-Chuan. 2024. Dtx2 Deficiency Induces Ependymo-Radial Glial Cell Proliferation and Improves Spinal Cord Motor Function Recovery. In Stem cells and development, 33, 540-550. doi:10.1089/scd.2023.0247. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/39001828/
9. Maki, Kazuhiro, Sasaki, Ko, Sugita, Fusako, Nakamura, Yuka, Mitani, Kinuko. 2012. Acute myeloid leukemia with t(7;21)(q11.2;q22) expresses a novel, reversed-sequence RUNX1-DTX2 chimera. In International journal of hematology, 96, 268-73. doi:10.1007/s12185-012-1112-z. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/22661044/
10. Wu, Shizhong, Shen, Shang-Hang, Lu, Feng, Zeng, Guangming, Wei, De. . Bromodomain containing 4 transcriptionally activated Deltex E3 ubiquitin ligase 2 contributes to glioma progression and predicts an unfavorable prognosis. In Annals of translational medicine, 10, 313. doi:10.21037/atm-22-555. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/35434025/
