智鼠故事 
C57BL/6JCya-Lin9em1flox/Cya 条件性基因敲除小鼠
复苏/繁育服务
产品名称：
Lin9-flox
产品编号：
S-CKO-15513
品系背景：
C57BL/6JCya
* 使用本品系发表的文献需注明：Lin9-flox mice (Strain S-CKO-15513) were purchased from Cyagen.
交付类型
周龄
性别
基因型
数量
只
基本信息
品系名称
C57BL/6JCya-Lin9em1flox/Cya
品系编号
CKOCMP-72568-Lin9-B6J-VA
产品编号
S-CKO-15513
基因名
Lin9
品系背景
C57BL/6JCya
基因别称
TGS；Bara；TGS1；Lin-9；mLin-9；2700022J23Rik
NCBI号
修饰方式
条件性基因敲除
品系说明
该品系是基于策略设计时的数据库信息制作而成，建议您在购买前查询最新的数据库和相关文献，以获取最准确的表型信息。
小鼠表型
MGI:1919818 Mice homozygous for a knock-out allele show increased body weight. Mice homozygous for a gene-trap allele die shortly after implantation with defects in early embryogenesis. Homozygous deletion in adult mice causes premature death, intestinal epithelium atrophy, and abnormal mitosis.
质控标准
精子检测
① 冷冻前验证精子活力观察
② 冷冻验证每批次进行复苏验证
品系状态
活体
环境标准
SPF
供应地区
中国
品系详情
Lin9位于小鼠的1号染色体，采用基因编辑技术，通过高通量电转受精卵方式，获得Lin9基因条件性敲除小鼠，性成熟后取精子冻存。
赛业生物（Cyagen）构建了一种名为Lin9-flox的基因编辑小鼠模型，编号为S-CKO-15513。该模型通过基因编辑技术，构建了Lin9基因的条件性敲除。Lin9基因位于小鼠1号染色体上，由15个外显子组成，其中ATG起始密码子位于1号外显子，TGA终止密码子位于15号外显子。在构建过程中，赛业生物（Cyagen）选择3号外显子作为条件性敲除区域（cKO区域），该区域包含95个碱基对的编码序列。删除该区域将导致小鼠Lin9基因功能的丧失。
Lin9-flox小鼠模型的构建过程包括将核糖核蛋白（RNP）和靶向载体共同注入受精卵。随后，对出生的小鼠进行PCR和测序分析进行基因型鉴定。携带敲除等位基因的小鼠表现出增重的现象。而携带基因捕获等位基因的小鼠在植入后不久就会死亡，存在早期胚胎发育缺陷。成年小鼠的纯合子缺失会导致早逝，肠道上皮萎缩和异常有丝分裂。此外，外显子3的敲除会导致基因移码，覆盖了编码区域的5.84%。在构建过程中，5'-loxP位点插入位于第二个内含子，大小为2408个碱基对；3'-loxP位点插入位于第三个内含子，大小为1025个碱基对。有效的cKO区域大小约为1.9千碱基对，且该区域没有其他已知基因。
Lin9-flox小鼠模型可用于研究Lin9基因在小鼠体内的功能。
基因研究概述
LIN9是一种在多种生物过程中发挥重要作用的基因，它在细胞周期、细胞分裂和信号通路等方面起着关键的调控作用。LIN9是DREAM复合体的一部分，该复合体在细胞周期调控中扮演着重要角色。在哺乳动物细胞中，LIN9是DREAM复合体的保守核心亚基，其功能对于早期胚胎发育和成年小鼠的存活至关重要。LIN9的缺失会导致细胞增殖的丧失，并在有丝分裂和细胞分裂过程中出现多种缺陷，这是由于LIN9对于表达大量有丝分裂基因（如Plk1、Aurora A和Kif20a）的必要性。LIN9的缺失会导致细胞周期分布的改变，使细胞在G2和M期积累，并增加多倍体细胞。全基因组表达研究表明，LIN9的缺失会导致有丝分裂基因的下调和分化特异性基因的上调。ChIP-on-chip实验表明，有丝分裂基因是LIN9的直接靶标，而谱系特异性标记则间接受LIN9调控。重要的是，LIN9的缺失不会改变多能性标记SOX2、OCT4和Nanog的表达，并且LIN9缺失的ESCs保留了碱性磷酸酶活性。综上所述，LIN9对于ESCs的增殖和基因组稳定性至关重要，它通过激活在有丝分裂和细胞分裂中发挥重要功能的基因来实现这一点[2]。
LIN9的表达与多种癌症的发生和发展密切相关。在肺腺癌（LUAD）中，LIN9的表达显著升高，主要影响细胞周期、分裂和信号通路。LIN9的高表达与Th2细胞的浸润呈正相关，而与浆细胞样树突状细胞的浸润呈负相关。此外，LIN9与年龄较大和临床分期较晚相关，对总生存期、无进展生存期和疾病特异性生存期构成风险。LIN9在女性、年龄超过65岁的患者以及临床N1-3和M1分期的患者中具有良好的诊断价值。LIN9的高表达增强了LUAD细胞的增殖、迁移和侵袭能力。高表达的LIN9可能通过细胞周期调节和染色体修饰来促进LUAD的发生，并促进LUAD细胞的恶性特征，对于受影响的患者具有重要的预后价值[1]。
在乳腺癌中，LIN9的表达也与化疗耐药性相关。LIN9的表达上调与乳腺癌患者接受化疗后较差的总生存期相关。在TNBC细胞系中，LIN9的表达上调与对紫杉醇的耐药性相关。敲低LIN9的表达或用BET抑制剂JQ1处理紫杉醇耐药的TNBC细胞，可以增强这些细胞对紫杉醇的敏感性。机制研究表明，耐药细胞系中LIN9表达下调会减少肿瘤细胞的活力，促进多核细胞形成并诱导肿瘤细胞凋亡，这可能是通过直接调节微管结合蛋白CCSAP实现的。因此，LIN9的高表达可能导致TNBC患者较差的临床结局和紫杉醇耐药性，而针对LIN9表达的治疗可能为紫杉醇耐药的TNBC患者提供可逆的治疗方法[3]。
此外，LIN9与NIMA相关激酶2（NEK2）协同作用，共同调节有丝分裂的保真度。LIN9的表达在65%的TNBC患者中升高，且在获得紫杉醇耐药性后进一步升高。通过遗传或抑制LIN9的表达可以恢复对紫杉醇的敏感性，这是通过诱导有丝分裂进展错误和细胞凋亡来实现的。此外，LIN9的表达与NEK2的表达呈正相关，NEK2在有丝分裂中心体分离中发挥重要作用。NEK2的高表达与接受紫杉醇和蒽环类药物治疗后残留疾病患者的低生存率相关，这表明NEK2在调节紫杉醇敏感性方面发挥作用。因此，LIN9/NEK2通路是可治疗的，可以作为克服紫杉醇耐药性的靶点，以改善患者对这种核心化疗药物的响应[4]。
LIN9在多种癌症中发挥着重要作用，包括LUAD和TNBC。LIN9的表达与肿瘤的发生、发展和预后密切相关。LIN9的过表达与LUAD细胞的增殖、迁移和侵袭能力增强相关，并可能导致LUAD的发生。在TNBC中，LIN9的表达上调与化疗耐药性相关，且LIN9/NEK2通路是可治疗的，可以作为克服紫杉醇耐药性的靶点。LIN9的研究对于深入理解肿瘤的发生机制和治疗策略具有重要意义。
参考文献：
1. Hou, Qinghua, Zhong, Yanfeng, Liao, Mengying, Li, Xiaoqing, Liu, Jixian. 2024. Upregulation of the tumor suppressor gene LIN9 enhances tumorigenesis and predicts poor prognosis of lung adenocarcinoma. In Heliyon, 10, e35012. doi:10.1016/j.heliyon.2024.e35012. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/39157309/
2. Esterlechner, Jasmina, Reichert, Nina, Iltzsche, Fabian, Finkernagel, Florian, Gaubatz, Stefan. 2013. LIN9, a subunit of the DREAM complex, regulates mitotic gene expression and proliferation of embryonic stem cells. In PloS one, 8, e62882. doi:10.1371/journal.pone.0062882. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/23667535/
3. Lai, Hongna, Wang, Rui, Li, Shunying, Li, Yudong, Liu, Yujie. 2019. LIN9 confers paclitaxel resistance in triple negative breast cancer cells by upregulating CCSAP. In Science China. Life sciences, 63, 419-428. doi:10.1007/s11427-019-9581-8. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/31420851/
4. Roberts, Melyssa S, Sahni, Jennifer M, Schrock, Morgan S, Summers, Matthew K, Keri, Ruth A. 2020. LIN9 and NEK2 Are Core Regulators of Mitotic Fidelity That Can Be Therapeutically Targeted to Overcome Taxane Resistance. In Cancer research, 80, 1693-1706. doi:10.1158/0008-5472.CAN-19-3466. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/32054769/
