智鼠故事 
C57BL/6JCya-Otub2em1flox/Cya 条件性基因敲除小鼠
复苏/繁育服务
产品名称：
Otub2-flox
产品编号：
S-CKO-14075
品系背景：
C57BL/6JCya
* 使用本品系发表的文献需注明：Otub2-flox mice (Strain S-CKO-14075) were purchased from Cyagen.
交付类型
周龄
性别
基因型
数量
只
基本信息
品系名称
C57BL/6JCya-Otub2em1flox/Cya
品系编号
CKOCMP-68149-Otub2-B6J-VA
产品编号
S-CKO-14075
基因名
Otub2
品系背景
C57BL/6JCya
基因别称
OTB2；OTU2；2010015L18Rik；4930586I02Rik
NCBI号
修饰方式
条件性基因敲除
品系说明
该品系是基于策略设计时的数据库信息制作而成，建议您在购买前查询最新的数据库和相关文献，以获取最准确的表型信息。
小鼠表型
MGI:1915399 Mice homozygous or heterozygous for a null mutation show increased incidence of chemically induced tumors.
质控标准
精子检测
① 冷冻前验证精子活力观察
② 冷冻验证每批次进行复苏验证
品系状态
活体
环境标准
SPF
供应地区
中国
品系详情
Otub2位于小鼠的12号染色体，采用基因编辑技术，通过高通量电转受精卵方式，获得Otub2基因条件性敲除小鼠，性成熟后取精子冻存。
Otub2-flox小鼠是由赛业生物（Cyagen）采用基因编辑技术构建的条件性敲除小鼠。Otub2基因位于小鼠12号染色体上，由7个外显子组成，其中ATG起始密码子在2号外显子，TGA终止密码子在7号外显子。条件性敲除区域（cKO区域）位于3号外显子和4号外显子，包含215个碱基对的编码序列。删除该区域会导致小鼠Otub2基因功能的丧失。此外，5'-loxP位点的插入位于2号内含子，3'-loxP位点的插入位于4号内含子。有效的cKO区域大小约为1.4 kb。该策略是基于现有数据库中的遗传信息设计的。由于生物过程的复杂性，所有loxP插入对基因转录、RNA剪接和蛋白质翻译的风险在现有技术水平上都无法预测。Otub2-flox小鼠模型的构建过程包括将核糖核蛋白（RNP）和靶向载体共同注入受精卵。随后，对出生的小鼠进行PCR和测序分析进行基因型鉴定。该模型可用于研究Otub2基因在小鼠体内的功能。
基因研究概述
OTUB2（Otubain 2）是一种OTU家族的脱泛素化酶，它在细胞的泛素化途径中扮演着重要的角色。泛素化是一种关键的蛋白质翻译后修饰，涉及将泛素分子连接到蛋白质上，从而影响蛋白质的稳定性、功能和定位。脱泛素化酶则负责移除泛素分子，因此它们在调节细胞内的泛素化状态和相应的生物学过程方面发挥着重要作用。
OTUB2在多种癌症中表现出异常表达，并且与癌症的发生和发展密切相关。例如，在结直肠癌（CRC）中，OTUB2的表达上调，并且通过促进糖酵解过程来加剧CRC的进展。研究发现，OTUB2直接与丙酮酸激酶M2（PKM2）相互作用，抑制其泛素化，从而增强PKM2的活性并促进糖酵解。在葡萄糖饥饿压力下，OTUB2对PKM2的影响增强，从而赋予CRC细胞代谢优势[1]。此外，OTUB2的耗尽减少了葡萄糖消耗、乳酸产生和细胞ATP产生。OTUB2敲除的CRC细胞表现出增殖和迁移减弱，以及凋亡水平升高和对化疗药物敏感性增加。在体内实验中，OTUB2敲除抑制了小鼠中的肿瘤生长。
除了CRC，OTUB2在其他类型的癌症中也发挥着重要作用。例如，在卵巢癌中，OTUB2的沉默通过线粒体代谢重编程促进卵巢癌的发生。OTUB2沉默导致SNX29P2的不稳定，进而阻止了HIF-1α通过von Hippel-Lindau肿瘤抑制因子介导的降解。HIF-1α水平的升高激活了碳酸酐酶9（CA9）的转录，并通过促进糖酵解来驱动卵巢癌的进展和化疗耐药性。重要的是，CA9的药理学抑制显著抑制了肿瘤生长，并与卡铂协同作用，用于治疗OTUB2沉默的卵巢癌[2]。
在肝细胞癌（HCC）中，OTUB2的表达上调与患者的预后不良相关。OTUB2的过表达可以促进HCC细胞的恶性增殖和转移，而OTUB2的敲低则产生相反的效果。研究发现，OTUB2通过去泛素化PJA1来稳定其表达，从而促进HCC细胞的恶性表型[3]。此外，OTUB2还通过促进KDM1A介导的干细胞样特性来促进胃癌的发生。KDM1A是一种赖氨酸特异性组蛋白去甲基化酶，已知可以促进下游基因的去甲基化。OTUB2通过去泛素化增加KDM1A的表达，进而促进肿瘤的发生[4]。
在子宫内膜癌（EC）中，OTUB2的表达上调与不良预后相关。OTUB2的过表达可以促进糖酵解，并诱导子宫内膜癌细胞增殖、迁移和侵袭。OTUB2的沉默产生了相反的效果。此外，OTUB2的沉默显著抑制了PKM2的表达水平。重要的是，抑制PKM2/PI3K/AKT信号通路显著逆转了OTUB2过表达对EC的促进作用。OTUB2通过调节PKM2/PI3K/AKT信号通路来调节EC细胞的增殖和侵袭[5]。
OTUB2还在非小细胞肺癌（NSCLC）中发挥重要作用。OTUB2的表达在NSCLC组织中显著上调，并且与转移、晚期肿瘤阶段、生存率差和复发相关。OTUB2促进了NSCLC细胞生长、集落形成、迁移和侵袭活动。机制研究表明，OTUB2通过直接结合和去泛素化U2AF2来刺激Warburg效应并激活AKT/mTOR信号通路。U2AF2的表达在NSCLC组织中显著上调，并且与转移、晚期肿瘤阶段、生存率差和复发相关。重要的是，NSCLC组织中OTUB2和U2AF2的蛋白表达呈正相关。体内实验表明，OTUB2促进了NSCLC细胞的异种移植瘤生长。此外，研究结果还表明，OTUB2、U2AF2和PGK1的高表达与NSCLC患者的不良预后显著相关[6]。
OTUB2在肝癌中也有重要作用。OTUB2的表达在肝癌肿瘤组织和细胞系中显著上调，并且OTUB2表达升高预示着肝癌患者的总生存期较差。细胞水平的研究发现，OTUB2的敲低显著抑制了肝癌细胞的生长。进一步的调查发现，OTUB2的敲低显著抑制了NF-κB驱动的荧光素酶活性，并明显抑制了肝癌细胞中NF-κB p65的磷酸化，这表明OTUB2通过调节NF-κB信号通路来介导肝癌细胞生长。此外，还发现OTUB2表达较高的肝癌细胞系对NF-κB抑制剂更敏感，OTUB2的过表达可以显著降低NF-κB抑制剂在肝癌细胞中的抗肿瘤效果[7]。
在食管鳞状细胞癌（ESCC）中，circRNA6448-14/miR-455-3p/OTUB2轴刺激了糖酵解和干细胞样特征。研究发现，circRNA6448-14和OTUB2在ESCC中高表达，而miR-455-3p低表达。敲低circRNA6448-14可以防止ESCC细胞的糖酵解和干细胞样特征。此外，circRNA6448-14通过海绵化miR-455-3p增强了OTUB2的表达。OTUB2的过表达或miR-455-3p的沉默逆转了circRNA6448-14敲低对ESCC糖酵解和干细胞样特征的抑制作用[8]。
在结肠癌中，OTUB2的表达显著上调，并且与不良预后和远处肿瘤转移密切相关。功能实验表明，OTUB2的敲低减弱了结肠癌的干细胞样特征，增强了其对奥沙利铂的敏感性，抑制了上皮-间质转化（EMT）过程，最终降低了肿瘤转移的能力。相反，OTUB2的过表达产生了相反的效果。机制研究表明，OTUB2作为SP1蛋白的脱泛素化酶，特异性地与SP1蛋白结合，从而抑制SP1蛋白的K48泛素化。SP1蛋白作为GINS1的转录因子，通过结合GINS1启动子区域的1822-1830区域来增强其转录活性。GINS1表达的变化直接调节了结肠癌的干细胞样特征、化疗敏感性和EMT进展[9]。
OTUB2还在病毒触发的信号传导中发挥调节作用。OTUB1和OTUB2作为病毒触发的I型干扰素（IFN）诱导通路的负调节因子，通过去泛素化TRAF3和TRAF6来调节病毒触发的信号传导。OTUB1和OTUB2的过表达抑制了病毒诱导的IRF3和NF-κB激活、IFNB1基因的转录和细胞抗病毒反应。共免疫沉淀表明OTUB1和OTUB2与TRAF3和TRAF6相互作用，这两个E3泛素连接酶分别对于病毒触发的IRF3和NF-κB激活是必需的[10]。
综上所述，OTUB2作为一种脱泛素化酶，在多种癌症的发生和发展中发挥着重要作用。OTUB2通过调节糖酵解、干细胞样特征、化疗耐药性、EMT和病毒触发的信号传导来促进肿瘤的发生和发展。这些发现表明OTUB2可能是一个有潜力的癌症治疗靶点。
参考文献：
1. Yu, Shuyu, Zang, Weicheng, Qiu, Yuchong, Liao, Liming, Zheng, Xiaofeng. 2021. Deubiquitinase OTUB2 exacerbates the progression of colorectal cancer by promoting PKM2 activity and glycolysis. In Oncogene, 41, 46-56. doi:10.1038/s41388-021-02071-2. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/34671086/
2. Nan, Yabing, Wu, Xiaowei, Luo, Qingyu, Zhang, Lingqiang, Liu, Zhihua. 2024. OTUB2 silencing promotes ovarian cancer via mitochondrial metabolic reprogramming and can be synthetically targeted by CA9 inhibition. In Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America, 121, e2315348121. doi:10.1073/pnas.2315348121. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/38701117/
3. Hu, Gang, Yang, Jianwu, Zhang, Hongwen, Huang, Zhen, Yang, Heming. 2022. OTUB2 Promotes Proliferation and Migration of Hepatocellular Carcinoma Cells by PJA1 Deubiquitylation. In Cellular and molecular bioengineering, 15, 281-292. doi:10.1007/s12195-022-00720-4. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/35611163/
4. Liu, Guangming, Guo, Wei, Qin, Junjie, Lin, Zhiliang. 2021. OTUB2 Facilitates Tumorigenesis of Gastric Cancer Through Promoting KDM1A-Mediated Stem Cell-Like Properties. In Frontiers in oncology, 11, 711735. doi:10.3389/fonc.2021.711735. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/34646768/
5. Zhang, Qian, Zhang, Jing, Yao, Anmei, Tao, Kai, Yang, Xuemei. 2022. OTUB2 promotes the progression of endometrial cancer by regulating the PKM2-mediated PI3K/AKT signaling pathway. In Cell biology international, 47, 428-438. doi:10.1002/cbin.11950. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/36316812/
6. Li, Jing, Cheng, Dongdong, Zhu, Miaoxin, Yan, Mingxia, Yao, Ming. 2019. OTUB2 stabilizes U2AF2 to promote the Warburg effect and tumorigenesis via the AKT/mTOR signaling pathway in non-small cell lung cancer. In Theranostics, 9, 179-195. doi:10.7150/thno.29545. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/30662561/
7. Gu, Zhen-Lin, Huang, Jing, Zhen, Lin-Lin. 2020. Knockdown of otubain 2 inhibits liver cancer cell growth by suppressing NF-κB signaling. In The Kaohsiung journal of medical sciences, 36, 399-404. doi:10.1002/kjm2.12187. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/32003539/
8. Zhang, Yaowen, Zhang, Heming, Wang, Chenyu, Ren, Runchuan, Zhou, Fuyou. 2024. circRNA6448-14/miR-455-3p/OTUB2 axis stimulates glycolysis and stemness of esophageal squamous cell carcinoma. In Aging, 16, 9485-9497. doi:10.18632/aging.205879. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/38819228/
9. Zhu, Wenjie, Wu, Changlei, Liu, Zitao, Zhao, ShiMin, Huang, Jun. 2024. OTU deubiquitinase, ubiquitin aldehyde binding 2 (OTUB2) modulates the stemness feature, chemoresistance, and epithelial-mesenchymal transition of colon cancer via regulating GINS complex subunit 1 (GINS1) expression. In Cell communication and signaling : CCS, 22, 420. doi:10.1186/s12964-024-01789-2. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/39210373/
10. Li, Shu, Zheng, Hao, Mao, Ai-Ping, Tien, Po, Shu, Hong-Bing. 2009. Regulation of virus-triggered signaling by OTUB1- and OTUB2-mediated deubiquitination of TRAF3 and TRAF6. In The Journal of biological chemistry, 285, 4291-7. doi:10.1074/jbc.M109.074971. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/19996094/
