智鼠故事 
C57BL/6JCya-Smsem1flox/Cya 条件性基因敲除小鼠
复苏/繁育服务
产品名称：
Sms-flox
产品编号：
S-CKO-05140
品系背景：
C57BL/6JCya
* 使用本品系发表的文献需注明：Sms-flox mice (Strain S-CKO-05140) were purchased from Cyagen.
交付类型
周龄
性别
基因型
数量
只
基本信息
品系名称
C57BL/6JCya-Smsem1flox/Cya
品系编号
CKOCMP-20603-Sms-B6J-VA
产品编号
S-CKO-05140
基因名
Sms
品系背景
C57BL/6JCya
基因别称
Gy；gyro；SPMSY；SpmST
NCBI号
修饰方式
条件性基因敲除
品系说明
该品系是基于策略设计时的数据库信息制作而成，建议您在购买前查询最新的数据库和相关文献，以获取最准确的表型信息。
小鼠表型
MGI:109490 Male mice hemizygous for a knock-out allele exhibit muscle weakness, decreased lean body mass and bone mineral density, lumbar lordosis, postnatal growth retardation, and male infertility.
质控标准
精子检测
① 冷冻前验证精子活力观察
② 冷冻验证每批次进行复苏验证
品系状态
活体
环境标准
SPF
供应地区
中国
品系详情
Sms位于小鼠的X号染色体，采用基因编辑技术，通过高通量电转受精卵方式，获得Sms基因条件性敲除小鼠，性成熟后取精子冻存。
Sms-flox小鼠模型是由赛业生物（Cyagen）采用基因编辑技术构建的条件性敲除小鼠。Sms基因位于小鼠X号染色体上，由11个外显子组成，其中ATG起始密码子在1号外显子，TAA终止密码子在11号外显子。条件性敲除区域（cKO区域）位于2号外显子，包含121个碱基对的编码序列。删除该区域会导致小鼠Sms基因功能的丧失。
Sms-flox小鼠模型的构建过程包括将核糖核蛋白（RNP）和靶向载体共同注入受精卵。随后，对出生的小鼠进行PCR和测序分析进行基因型鉴定。携带敲除等位基因的小鼠表现出肌肉无力、瘦体重和骨矿物质密度降低、腰椎前凸、出生后生长迟缓和雄性不育。敲除2号外显子会导致基因移码，覆盖了11.02%的编码区域。第一号内含子的大小为21796 bp，第二号内含子的大小为3496 bp。有效的cKO区域大小约为1.2 kb。
Sms-flox小鼠模型可用于研究Sms基因在小鼠体内的功能。由于生物过程的复杂性，现有技术水平无法预测loxP插入对基因转录、RNA剪接和蛋白质翻译的风险。
基因研究概述
基因Sms，全称为Smith-Magenis syndrome (SMS)，是一种复杂的遗传疾病，主要特征包括独特的身体特征、发育迟缓、认知障碍以及典型的行为特征。这种疾病由17号染色体17p11.2区域内的基因缺失或RAI1基因的突变引起。RAI1基因是一个剂量敏感基因，在许多组织中表达，并作为转录调节因子发挥作用[3]。SMS患者通常表现出轻度至中度的智力障碍，行为特征包括显著的睡眠障碍、刻板行为、适应不良行为和自伤行为[2]。
在细菌基因表达调控方面，CRISPRactivation（CRISPRa）技术已被广泛应用于真核生物，但在原核生物中应用较少。这主要是因为细菌激活因子需要精确的空间定位和距离，而基于Cas9的CRISPR工具只能结合到NGG PAM序列旁的位点。为了克服这一限制，研究人员开发了PAM独立Cas9变体SpRY，并将其与CRISPRa构建体结合使用，构建了名为SMS的CRISPRa构建体。该构建体由噬菌体蛋白MCP融合转录激活因子SoxS组成。SMS构建体在Escherichia coli中表现出PAM序列非依赖性基因上调，并成功实现了非NGG PAM位点的基因下调和多基因表达控制[1]。
此外，SMS构建体还被用于上调内源性基因和转基因，这是以前CRISPRa构建体无法实现的。此外，研究人员还发现SMS构建体与M2巨噬细胞极化相关，这可能为肿瘤治疗提供新的策略和靶点[4]。在肺癌腺癌（LUAD）中，SMS基因与患者预后和免疫治疗反应相关，SMS基因的表达与M2巨噬细胞极化相关[4]。
综上所述，基因Sms是一种复杂的遗传疾病，其发病机制涉及RAI1基因的缺失或突变。此外，SMS构建体在细菌基因表达调控和肿瘤治疗方面具有重要作用。未来，深入研究SMS的分子机制和SMS构建体的应用将为疾病的治疗和预防提供新的思路和策略。
参考文献：
1. Klanschnig, Marco, Cserjan-Puschmann, Monika, Striedner, Gerald, Grabherr, Reingard. . CRISPRactivation-SMS, a message for PAM sequence independent gene up-regulation in Escherichia coli. In Nucleic acids research, 50, 10772-10784. doi:10.1093/nar/gkac804. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/36134715/
2. Rinaldi, Berardo, Villa, Roberta, Sironi, Alessandra, Finelli, Palma, Bedeschi, Maria Francesca. 2022. Smith-Magenis Syndrome-Clinical Review, Biological Background and Related Disorders. In Genes, 13, . doi:10.3390/genes13020335. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/35205380/
3. Falco, Mariateresa, Amabile, Sonia, Acquaviva, Fabio. 2017. RAI1 gene mutations: mechanisms of Smith-Magenis syndrome. In The application of clinical genetics, 10, 85-94. doi:10.2147/TACG.S128455. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/29138588/
4. Qiu, Jianjian, Wang, Zhiping, Yu, Yilin, Li, Meifang, Lin, Cheng. 2024. Prognostic and immunological implications of glutathione metabolism genes in lung adenocarcinoma: A focus on the core gene SMS and its impact on M2 macrophage polarization. In International immunopharmacology, 132, 111940. doi:10.1016/j.intimp.2024.111940. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/38593503/
