智鼠故事 
C57BL/6JCya-Skilem1flox/Cya 条件性基因敲除小鼠
复苏/繁育服务
产品名称：
Skil-flox
产品编号：
S-CKO-05073
品系背景：
C57BL/6JCya
* 使用本品系发表的文献需注明：Skil-flox mice (Strain S-CKO-05073) were purchased from Cyagen.
交付类型
周龄
性别
基因型
数量
只
基本信息
品系名称
C57BL/6JCya-Skilem1flox/Cya
品系编号
CKOCMP-20482-Skil-B6J-VA
产品编号
S-CKO-05073
基因名
Skil
品系背景
C57BL/6JCya
基因别称
sno；Skir；SnoN
NCBI号
修饰方式
条件性基因敲除
品系说明
该品系是基于策略设计时的数据库信息制作而成，建议您在购买前查询最新的数据库和相关文献，以获取最准确的表型信息。
小鼠表型
MGI:106203 Heterozygotes for a null allele develop lymphomas and show increased incidence of chemically-induced tumors while homozygotes die before implantation. Homozygotes for a different null allele are viable but show defective T cell activation and impaired mammary gland alveologenesis and lactogenesis.
质控标准
精子检测
① 冷冻前验证精子活力观察
② 冷冻验证每批次进行复苏验证
品系状态
活体
环境标准
SPF
供应地区
中国
品系详情
Skil位于小鼠的3号染色体，采用基因编辑技术，通过高通量电转受精卵方式，获得Skil基因条件性敲除小鼠，性成熟后取精子冻存。
Skil-flox小鼠是由赛业生物（Cyagen）采用基因编辑技术构建的条件性敲除小鼠。Skil基因位于小鼠3号染色体上，由7个外显子组成，其中ATG起始密码子在2号外显子，TAA终止密码子在7号外显子。条件性敲除区域（cKO区域）位于4号外显子，包含233个碱基对的编码序列。删除该区域会导致小鼠Skil基因功能的丧失。
Skil-flox小鼠模型的构建过程包括将基因编辑工具和靶向载体共同注入受精卵。随后，对出生的小鼠进行PCR和测序分析进行基因型鉴定。携带敲除等位基因的小鼠表现出淋巴瘤的发展，以及化学诱导肿瘤的发生率增加。此外，对于携带敲除等位基因的小鼠，杂合子表现出T细胞活化的缺陷，乳腺腺泡发生和泌乳的障碍，而纯合子则无法存活。4号外显子覆盖了编码区的11.51%。第一个内含子的大小为1685个碱基对，用于5'-loxP位点的插入，而第三个内含子的大小为3175个碱基对，用于3'-loxP位点的插入。有效的条件性敲除区域大小约为0.8千碱基对。
该策略基于现有数据库中的遗传信息设计。由于生物过程的复杂性，目前技术水平无法预测loxP插入对基因转录、RNA剪接和蛋白质翻译的影响。
基因研究概述
Skil基因，全称为Ski-related novel gene（SnoN），编码的蛋白质是SMAD转录共抑制因子SNON，它在细胞中起到重要的调控作用。Skil基因的表达受到转化生长因子β（TGF-β）信号通路的精细调节，当细胞受到TGF-β的短暂刺激时，SNON蛋白水平会通过蛋白酶体途径降解而下降；而当TGF-β刺激时间延长时，则会通过诱导SKIL基因的表达而增加SNON蛋白水平[2]。
在肝纤维化过程中，Skil基因的表达下调。研究发现，在肝纤维化组织中，SnoN蛋白几乎检测不到，而在正常肝组织中则广泛存在于细胞质中[1]。在胆管结扎的大鼠模型中，SnoN蛋白表达减少的同时，TGF-β1、胶原蛋白III、组织金属蛋白酶抑制剂1（TIMP-1）和纤连蛋白水平升高。进一步研究发现，SnoN蛋白与细胞质中的p-SMAD2和p-SMAD3相互作用。当SnoN过表达时，可以促进肝星状细胞（HSC）的凋亡，并降低与肝纤维化相关的蛋白质，包括胶原蛋白I、胶原蛋白III和TIMP-1的表达。相反，SnoN的下调则会抑制HSC的凋亡，增加胶原蛋白III和TIMP-1的水平，并降低基质金属蛋白酶13（MMP-13）的表达。这些结果表明，SnoN的表达下调与肝纤维化相关，并且它可能通过抑制TGF-β/SMADs信号通路依赖的胶原蛋白合成的去抑制来发挥作用[1]。
Skil基因还在其他类型的癌症中发挥作用。例如，在前列腺癌中，Skil基因的激活重排导致其表达增加，并在一定程度上与ETS基因融合的发生呈互斥关系[3]。Skil基因的过表达促进了前列腺癌细胞的侵袭性，而敲低Skil基因则导致细胞生长停滞。这表明Skil基因可能是一个潜在的致癌基因和前列腺癌的治疗靶点[3]。
在卵巢癌中，Skil基因的表达增加，并且可以调节磷脂翻转酶1（PLSCR1）的表达。PLSCR1的转录表达与Skil mRNA的表达高度相关，并且Skil可以调节PLSCR1 mRNA的水平，而不需要干扰素（IFN-2α）的存在[4]。这表明Skil基因可能在卵巢癌的发生发展中发挥重要作用。
在非小细胞肺癌（NSCLC）中，Skil基因的表达水平高于邻近的正常组织。沉默Skil基因可以抑制NSCLC细胞的恶性表型，并促进T细胞浸润。Skil基因的沉默通过下调TAZ基因的表达抑制自噬，并激活STING信号通路。沉默TAZ基因可以取消Skil基因过表达对NSCLC细胞恶性表型和自噬的影响。这表明Skil基因可能通过上调TAZ/自噬轴和抑制下游STING信号通路来促进NSCLC细胞的肿瘤发生和免疫逃逸[5]。
Skil基因的变异还与精神分裂症患者使用抗精神病药物引起的QTc间期变化相关。在一项全基因组关联研究中，发现SKIL基因中的rs186507741位点与抗精神病药物引起的QTc间期变化显著相关[6]。这表明Skil基因的变异可能影响心脏功能，并与抗精神病药物引起的副作用相关。
此外，Skil基因还与促性腺激素释放激素（GnRH）脉冲频率对卵泡刺激素β（FSHβ）基因的敏感性有关。研究发现，在慢速GnRH脉冲频率下，Skil基因的表达增加，并抑制FSHβ基因的转录活性。而在快速GnRH脉冲频率下，Skil基因的表达减少，并增加FSHβ基因的转录活性[7]。这表明Skil基因可能在调节GnRH脉冲频率对FSHβ基因的敏感性中发挥作用。
在癌症中，Skil基因还与其他基因协同作用。例如，在3q26基因座中，TLOC1和Skil基因被鉴定为癌症驱动基因[8]。TLOC1基因的过表达可以促进细胞增殖和肿瘤生长，而Skil基因的过表达则可以促进细胞侵袭。这表明Skil基因可能在癌症的发生发展中与其他基因协同作用。
在结直肠癌中，长链非编码RNA（lncRNA）SNHG14通过miR-32-5p/SKIL轴促进肿瘤的发生和转移。研究发现，SNHG14的表达在结直肠癌细胞中升高，并且可以抑制miR-32-5p的表达。SKIL基因可以与miR-32-5p结合，并且其mRNA和蛋白质表达受到SNHG14敲低或miR-32-5p过表达的调节。这表明SNHG14可以通过miR-32-5p/SKIL轴来调节结直肠癌的发生和转移[9]。
最后，在肺纤维化中，SERCA2a基因治疗可以逆转肺纤维化，并通过阻断STAT3/FOXM1信号通路和促进SNON/SKI轴来发挥作用。研究发现，SERCA2a基因治疗可以减少肺纤维化和相关的血管重塑，并降低右心室压力和肥厚。在体外实验中，SERCA2a过表达可以抑制由TGF-β1诱导的成纤维细胞增殖、迁移和成肌纤维细胞转化。这表明SERCA2a基因治疗可能是一种有潜力的肺纤维化治疗方法[10]。
综上所述，Skil基因在多种生物学过程中发挥重要作用，包括细胞分化、发育、代谢和疾病发生。Skil基因的表达受到TGF-β信号通路的精细调节，并在肝纤维化、前列腺癌、卵巢癌、NSCLC、精神分裂症、促性腺激素释放激素脉冲频率对FSHβ基因的敏感性、癌症驱动基因的协同作用、结直肠癌的发生和转移以及肺纤维化中发挥作用。Skil基因的研究有助于深入理解其生物学功能和疾病发生机制，为疾病的治疗和预防提供新的思路和策略。
参考文献：
1. Chi, Cheng, Liang, Xifeng, Cui, Tianyu, Liu, Ruixia, Yin, Chenghong. 2023. SKIL/SnoN attenuates TGF-β1/SMAD signaling-dependent collagen synthesis in hepatic fibrosis. In Biomolecules & biomedicine, 23, 1014-1025. doi:10.17305/bb.2023.9000. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/37389959/
2. Tecalco-Cruz, Angeles C, Sosa-Garrocho, Marcela, Vázquez-Victorio, Genaro, Domínguez-Hüttinger, Elisa, Macías-Silva, Marina. 2012. Transforming growth factor-β/SMAD Target gene SKIL is negatively regulated by the transcriptional cofactor complex SNON-SMAD4. In The Journal of biological chemistry, 287, 26764-76. doi:10.1074/jbc.M112.386599. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/22674574/
3. Annala, Matti, Kivinummi, Kati, Tuominen, Joonas, Visakorpi, Tapio, Nykter, Matti. . Recurrent SKIL-activating rearrangements in ETS-negative prostate cancer. In Oncotarget, 6, 6235-50. doi:. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/25749039/
4. Kodigepalli, Karthik M, Anur, Pavana, Spellman, Paul, Sims, Peter J, Nanjundan, Meera. 2013. Phospholipid Scramblase 1, an interferon-regulated gene located at 3q23, is regulated by SnoN/SkiL in ovarian cancer cells. In Molecular cancer, 12, 32. doi:10.1186/1476-4598-12-32. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/23621864/
5. Ma, Fang, Ding, Meng-Ge, Lei, Yi-Yu, Feng, Yu-Hua, Liu, Xian-Ling. 2020. SKIL facilitates tumorigenesis and immune escape of NSCLC via upregulating TAZ/autophagy axis. In Cell death & disease, 11, 1028. doi:10.1038/s41419-020-03200-7. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/33268765/
6. Lu, Zhe, Zhang, Yuyanan, Yan, Hao, Zhang, Dai, Yue, Weihua. 2022. ATAD3B and SKIL polymorphisms associated with antipsychotic-induced QTc interval change in patients with schizophrenia: a genome-wide association study. In Translational psychiatry, 12, 56. doi:10.1038/s41398-022-01825-0. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/35136033/
7. Mistry, Devendra S, Tsutsumi, Rie, Fernandez, Marina, Lawson, Mark A, Webster, Nicholas J G. 2011. Gonadotropin-releasing hormone pulse sensitivity of follicle-stimulating hormone-beta gene is mediated by differential expression of positive regulatory activator protein 1 factors and corepressors SKIL and TGIF1. In Molecular endocrinology (Baltimore, Md.), 25, 1387-403. doi:10.1210/me.2011-0032. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/21659477/
8. Hagerstrand, Daniel, Tong, Alexander, Schumacher, Steven E, Beroukhim, Rameen, Hahn, William C. 2013. Systematic interrogation of 3q26 identifies TLOC1 and SKIL as cancer drivers. In Cancer discovery, 3, 1044-57. doi:10.1158/2159-8290.CD-12-0592. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/23764425/
9. Ye, Tao, Zhang, Ning, Wu, Wenyu, Huang, Wenqi, Tang, Dongxin. 2019. SNHG14 promotes the tumorigenesis and metastasis of colorectal cancer through miR-32-5p/SKIL axis. In In vitro cellular & developmental biology. Animal, 55, 812-820. doi:10.1007/s11626-019-00398-5. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/31471872/
10. Bisserier, Malik, Milara, Javier, Abdeldjebbar, Yassine, Sassi, Yassine, Hadri, Lahouaria. 2019. AAV1.SERCA2a Gene Therapy Reverses Pulmonary Fibrosis by Blocking the STAT3/FOXM1 Pathway and Promoting the SNON/SKI Axis. In Molecular therapy : the journal of the American Society of Gene Therapy, 28, 394-410. doi:10.1016/j.ymthe.2019.11.027. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/31879190/
