智鼠故事 
C57BL/6JCya-Rad9aem1flox/Cya 条件性基因敲除小鼠
复苏/繁育服务
产品名称：
Rad9a-flox
产品编号：
S-CKO-04682
品系背景：
C57BL/6JCya
* 使用本品系发表的文献需注明：Rad9a-flox mice (Strain S-CKO-04682) were purchased from Cyagen.
交付类型
周龄
性别
基因型
数量
只
基本信息
品系名称
C57BL/6JCya-Rad9aem1flox/Cya
品系编号
CKOCMP-19367-Rad9a-B6J-VA
产品编号
S-CKO-04682
基因名
Rad9a
品系背景
C57BL/6JCya
基因别称
Rad9
NCBI号
修饰方式
条件性基因敲除
品系说明
该品系是基于策略设计时的数据库信息制作而成，建议您在购买前查询最新的数据库和相关文献，以获取最准确的表型信息。
小鼠表型
MGI:1328356 Embryos homozygous for a knock-out allele are consistently smaller and display abnormal embryonic development and midgestational lethality associated with increased apoptosis and reduced cellular proliferation. Mutant mouse embryonic fibroblasts are not viable.
质控标准
精子检测
① 冷冻前验证精子活力观察
② 冷冻验证每批次进行复苏验证
品系状态
在研小鼠
环境标准
SPF
供应地区
中国
品系详情
Rad9a位于小鼠的19号染色体，采用基因编辑技术，通过高通量电转受精卵方式，获得Rad9a基因条件性敲除小鼠，性成熟后取精子冻存。
Rad9a-flox小鼠模型由赛业生物（Cyagen）构建，采用基因编辑技术进行条件性基因敲除。该模型用于研究Rad9a基因在小鼠体内的功能。Rad9a基因位于小鼠19号染色体上，由11个外显子组成，其中ATG起始密码子在1号外显子，TGA终止密码子在11号外显子。条件性敲除区域（cKO区域）位于6至11号外显子，覆盖了编码区域的61.53%。删除该区域会导致小鼠Rad9a基因功能的丧失。
Rad9a-flox小鼠模型的构建过程包括将核糖核蛋白（RNP）和靶向载体共同注入受精卵。随后，对出生的小鼠进行PCR和测序分析进行基因型鉴定。携带敲除等位基因的小鼠胚胎在发育过程中出现异常，并伴随有细胞凋亡增加和细胞增殖减少，导致中孕期死亡。突变小鼠胚胎成纤维细胞不存活。
基因研究概述
基因Rad9a是细胞周期调控和DNA损伤应答中的重要蛋白质，作为9-1-1复合物的一个组成部分，Rad9a与Rad1和Hus1形成异源三聚体，参与DNA损伤修复和细胞周期的检查点控制。9-1-1复合物在细胞周期的S和G2/M期表达，并在DNA损伤时与单链DNA结合，激活ATR（Ataxia Telangiectasia and Rad3-related）激酶，进而激活下游的检查点激酶Chk1和Chk2，使细胞周期停滞，以防止损伤的DNA在细胞分裂前被复制或传递给子细胞。Rad9a在DNA损伤应答中发挥着至关重要的作用，参与维持基因组稳定性和预防癌症发生。
Rad9a的功能不仅限于DNA损伤应答，还参与细胞分化和发育过程。在哺乳动物中，Rad9a对于精子发生和睾丸发育至关重要。在小鼠模型中，Rad9a的缺失导致精子发生过程中精子细胞分化完全受阻，并且突变小鼠的睾丸管出现畸形，导致睾丸发育异常[1]。此外，Rad9a还参与早期胚胎发育，特别是在受精后的染色体解压缩过程中发挥关键作用。Rad9a的缺失导致受精卵的染色体解压缩延迟，进而导致胚胎发育停滞[5]。
Rad9a的表达异常与多种癌症的发生和发展密切相关。在结直肠癌中，Rad9a的表达上调与不良预后相关，并且Rad9a通过影响AKT激酶的磷酸化状态促进肿瘤的发生和发展[2]。在膀胱尿路上皮癌中，Rad9a的表达也与患者预后相关，并且可以用来预测患者的化疗敏感性[8]。此外，Rad9a还参与前列腺癌的发生和发展，其表达上调与肿瘤的转移相关。Rad9a通过转录激活前梯度2（AGR2）基因，促进前列腺癌细胞的迁移和生长[3]。
在前列腺癌中，Rad9a的表达水平与患者对二甲双胍的抗药性相关。二甲双胍是一种常用的降糖药物，同时也具有抗肿瘤作用。然而，一些肿瘤细胞对二甲双胍产生抗药性。研究发现，Rad9a的表达水平与前列腺癌细胞对二甲双胍的抗药性相关，并且Rad9a可能通过上调调节性T细胞的比例来影响肿瘤的免疫微环境，从而降低二甲双胍的治疗效果[4]。
除了Rad9a，其同源基因Rad9b也参与DNA损伤应答和细胞周期的检查点控制。Rad9b与Rad9a具有相似的功能，并且可以与Claspin蛋白相互作用，影响Claspin在细胞内的定位，进而影响DNA损伤应答的激活[6]。
Rad9a的表观遗传修饰也与其功能相关。在儿童癌症患者中，Rad9a基因的内含子2区域发生超甲基化，导致Rad9a蛋白的表达上调，这可能参与肿瘤的发生和发展[7]。超甲基化是一种常见的表观遗传修饰，可以影响基因的表达。Rad9a基因的超甲基化可能导致其表达上调，进而影响DNA损伤应答和细胞周期的检查点控制，促进肿瘤的发生和发展。
综上所述，Rad9a是一种重要的蛋白质，参与DNA损伤应答、细胞周期调控和肿瘤的发生和发展。Rad9a的功能异常与多种癌症的发生和发展密切相关，并且可能成为新的治疗靶点。进一步研究Rad9a的功能和调控机制，有助于深入理解肿瘤的发生和发展机制，为癌症的治疗和预防提供新的思路和策略。
参考文献：
1. Huang, Lin, Wang, Zhen-Bo, Qi, Shu-Tao, Wang, Wei-Hua, Sun, Qing-Yuan. . Rad9a is required for spermatogonia differentiation in mice. In Oncotarget, 7, 86350-86358. doi:10.18632/oncotarget.13405. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/27861152/
2. Yang, Ting, Liu, Yan-Li, Guo, Hai-Long, Chen, Peng-Cheng, Xu, Da-Peng. 2024. Unveiling an anoikis-related risk model and the role of RAD9A in colon cancer. In International immunopharmacology, 140, 112874. doi:10.1016/j.intimp.2024.112874. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/39116498/
3. Broustas, Constantinos G, Hopkins, Kevin M, Panigrahi, Sunil K, Virk, Renu K, Lieberman, Howard B. . RAD9A promotes metastatic phenotypes through transcriptional regulation of anterior gradient 2 (AGR2). In Carcinogenesis, 40, 164-172. doi:10.1093/carcin/bgy131. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/30295739/
4. Chen, Jiahong, Huang, Yaqiang, Tang, Zhenfeng, Zhong, Weide, Yuan, Xia. 2021. Genome-Scale CRISPR-Cas9 Transcriptional Activation Screening in Metformin Resistance Related Gene of Prostate Cancer. In Frontiers in cell and developmental biology, 8, 616332. doi:10.3389/fcell.2020.616332. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/33575255/
5. Huang, Lin, Meng, Tie-Gang, Ma, Xue-Shan, Zhao, Yong, Sun, Qing-Yuan. 2018. Rad9a is involved in chromatin decondensation and post-zygotic embryo development in mice. In Cell death and differentiation, 26, 969-980. doi:10.1038/s41418-018-0181-9. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/30154445/
6. Sierant, Megan L, Archer, Nicole E, Davey, Scott K. . The Rad9A checkpoint protein is required for nuclear localization of the claspin adaptor protein. In Cell cycle (Georgetown, Tex.), 9, 548-56. doi:. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/20081369/
7. Galetzka, Danuta, Böck, Julia, Wagner, Lukas, Schmidberger, Heinz, Prawitt, Dirk. 2022. Hypermethylation of RAD9A intron 2 in childhood cancer patients, leukemia and tumor cell lines suggest a role for oncogenic transformation. In EXCLI journal, 21, 117-143. doi:10.17179/excli2021-4482. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/35221838/
8. Dong, Ying, Xu, Chaojie, Su, Ganglin, Mou, Shuanzhu, Mei, Hongbing. 2023. Clinical value of anoikis-related genes and molecular subtypes identification in bladder urothelial carcinoma and in vitro validation. In Frontiers in immunology, 14, 1122570. doi:10.3389/fimmu.2023.1122570. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/37275895/
