智鼠故事 
C57BL/6JCya-Rab33bem1flox/Cya 条件性基因敲除小鼠
复苏/繁育服务
产品名称：
Rab33b-flox
产品编号：
S-CKO-04656
品系背景：
C57BL/6JCya
* 使用本品系发表的文献需注明：Rab33b-flox mice (Strain S-CKO-04656) were purchased from Cyagen.
交付类型
周龄
性别
基因型
数量
只
基本信息
品系名称
C57BL/6JCya-Rab33bem1flox/Cya
品系编号
CKOCMP-19338-Rab33b-B6J-VA
产品编号
S-CKO-04656
基因名
Rab33b
品系背景
C57BL/6JCya
基因别称
--
NCBI号
修饰方式
条件性基因敲除
品系说明
该品系是基于策略设计时的数据库信息制作而成，建议您在购买前查询最新的数据库和相关文献，以获取最准确的表型信息。
小鼠表型
质控标准
精子检测
① 冷冻前验证精子活力观察
② 冷冻验证每批次进行复苏验证
品系状态
在研小鼠
环境标准
SPF
供应地区
中国
品系详情
Rab33b位于小鼠的3号染色体，采用基因编辑技术，通过高通量电转受精卵方式，获得Rab33b基因条件性敲除小鼠，性成熟后取精子冻存。
Rab33b-flox小鼠模型是由赛业生物（Cyagen）采用基因编辑技术构建的条件性敲除小鼠。Rab33b基因位于小鼠3号染色体上，由两个外显子组成，其中ATG起始密码子在1号外显子，TGA终止密码子在2号外显子。条件性敲除区域（cKO区域）位于2号外显子，包含约711个碱基对的编码序列。删除该区域会导致小鼠Rab33b基因功能的丧失。
Rab33b-flox小鼠模型的构建过程包括使用BAC克隆RP23-173C17作为模板，通过PCR生成同源臂和cKO区域，然后将其构建成靶向载体。随后，将核糖核蛋白（RNP）和靶向载体共同注入受精卵。出生后，对小鼠进行PCR和测序分析进行基因型鉴定。
基因研究概述
Rab33b，也称为Ras相关的GTP结合蛋白家族成员，是一种位于高尔基体的蛋白质，在膜转运和自噬过程中发挥着重要作用。Rab33b属于Rab蛋白家族，这个家族的小GTP结合蛋白在蛋白分泌和内吞途径的囊泡运输中扮演着关键角色。Rab33b的氨基酸序列与Rab33A蛋白有55.3%的相似性，并且两者在效应结构域上有独特的氨基酸序列[4]。Northern blot分析显示，rab33B在哺乳动物组织中广泛表达，而rab33A的表达则局限于大脑和免疫系统[4]。免疫荧光研究表明，Rab33B与高尔基体特异性标志物α-甘露糖苷酶II共定位。免疫电镜分析进一步将Rab33B的定位细化为高尔基体中间囊泡。这些结果提示Rab33B可能在细胞内高尔基体运输中发挥作用[4]。
Rab33b在自噬和膜转运中的具体功能正逐渐被揭示。研究表明，Rab33b在自噬过程中与Atg16L1相互作用，而Atg16L1是Atg5-Atg16L1二聚体复合物的一部分，该复合物在自噬体的形成中起关键作用[5]。Rab33b与Atg16L1的相互作用受Atg5的调节，Atg5的存在对于Rab33B与Atg5-Atg16L1复合物的核苷酸依赖性相互作用至关重要[5]。此外，Rab33b还参与了细胞内的膜转运过程，与多种内体相关蛋白和标记物共定位，表明其在细胞内膜运输和血管生成中也发挥着作用[3]。
Rab33b的突变与几种疾病有关，最显著的是与Smith-McCort dysplasia（SMC）的关联。SMC是一种罕见的常染色体隐性遗传的骨软骨发育不良，其特征包括脊柱和长骨的发育异常。研究发现，RAB33B基因的突变会导致SMC的发生，进一步强调了Rab33b在骨骼发育中的重要作用[7]。此外，RAB33B基因的突变也与骨吸收缺陷和蛋白质糖基化异常有关，这表明Rab33b在维持骨骼稳态和蛋白质修饰中也发挥着关键作用[2]。
在细胞功能方面，Rab33b还与细胞骨架蛋白KRT8的磷酸化有关，过度的机械负荷激活的PKN（蛋白激酶N）会磷酸化KRT8，从而抑制Rab33B的转运，抑制自噬体的形成，并导致椎间盘退变[1]。此外，Rab33b的表达与猪精子冻存能力有关，表明Rab33b可能在生殖细胞的功能中也发挥着作用[6]。
综上所述，Rab33b是一种位于高尔基体的蛋白质，在自噬和膜转运过程中发挥着重要作用。Rab33b的突变与多种疾病有关，包括SMC、骨吸收缺陷和蛋白质糖基化异常等。Rab33b的研究有助于我们更好地理解其在细胞功能、骨骼发育和疾病发生中的作用机制。
参考文献：
1. Wang, Di, Shang, Qiliang, Mao, Jianxin, Luo, Zhuojing, Yang, Liu. 2023. Phosphorylation of KRT8 (keratin 8) by excessive mechanical load-activated PKN (protein kinase N) impairs autophagosome initiation and contributes to disc degeneration. In Autophagy, 19, 2485-2503. doi:10.1080/15548627.2023.2186099. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/36897022/
2. Dimori, Milena, Pokrovskaya, Irina D, Liu, Shijie, Lupashin, Vladimir V, Morello, Roy. 2023. A Rab33b missense mouse model for Smith-McCort dysplasia shows bone resorption defects and altered protein glycosylation. In Frontiers in genetics, 14, 1204296. doi:10.3389/fgene.2023.1204296. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/37359363/
3. Lin, Hsin-Hung, Kuo, Ming-Wei, Fan, Tan-Chi, Yu, Alice L, Yu, John. 2023. YULINK regulates vascular formation in zebrafish and HUVECs. In Biological research, 56, 7. doi:10.1186/s40659-023-00415-8. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/36843032/
4. Zheng, J Y, Koda, T, Fujiwara, T, Ikehara, Y, Kakinuma, M. . A novel Rab GTPase, Rab33B, is ubiquitously expressed and localized to the medial Golgi cisternae. In Journal of cell science, 111 ( Pt 8), 1061-9. doi:. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/9512502/
5. Chandra, Mintu, Saran, Runjhun, Datta, Sunando. 2016. Deciphering the role of Atg5 in nucleotide dependent interaction of Rab33B with the dimeric complex, Atg5-Atg16L1. In Biochemical and biophysical research communications, 473, 8-16. doi:10.1016/j.bbrc.2016.03.043. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/26975471/
6. Brym, Paweł, Wasilewska-Sakowska, Karolina, Mogielnicka-Brzozowska, Marzena, Kondracki, Stanisław, Fraser, Leyland. 2021. Gene promoter polymorphisms in boar spermatozoa differing in freezability. In Theriogenology, 166, 112-123. doi:10.1016/j.theriogenology.2021.02.018. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/33735665/
7. Dupuis, Nina, Lebon, Sophie, Kumar, Manoj, Gressens, Pierre, El Ghouzzi, Vincent. 2012. A novel RAB33B mutation in Smith-McCort dysplasia. In Human mutation, 34, 283-6. doi:10.1002/humu.22235. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/23042644/
