智鼠故事 
C57BL/6JCya-Cd34em1flox/Cya 条件性基因敲除小鼠
复苏/繁育服务
产品名称：
Cd34-flox
产品编号：
S-CKO-01617
品系背景：
C57BL/6JCya
* 使用本品系发表的文献需注明：Cd34-flox mice (Strain S-CKO-01617) were purchased from Cyagen.
交付类型
周龄
性别
基因型
数量
只
基本信息
品系名称
C57BL/6JCya-Cd34em1flox/Cya
品系编号
CKOCMP-12490-Cd34-B6J-VA
产品编号
S-CKO-01617
基因名
Cd34
品系背景
C57BL/6JCya
基因别称
--
NCBI号
修饰方式
条件性基因敲除
品系说明
该品系是基于策略设计时的数据库信息制作而成，建议您在购买前查询最新的数据库和相关文献，以获取最准确的表型信息。
小鼠表型
MGI:88329 Homozygotes for a null allele show decreased splenocyte number and hematopoietic defects. Homozygotes for another null allele show reduced eosinophil accumulation after allergen exposure, impaired TPA-induced hair follicle stem cell activation and reduced incidence of chemically-induced skin tumors.
质控标准
精子检测
① 冷冻前验证精子活力观察
② 冷冻验证每批次进行复苏验证
品系状态
活体
环境标准
SPF
供应地区
中国
品系详情
Cd34位于小鼠的1号染色体，采用基因编辑技术，通过高通量电转受精卵方式，获得Cd34基因条件性敲除小鼠，性成熟后取精子冻存。
Cd34-flox小鼠模型是由赛业生物（Cyagen）采用基因编辑技术构建的条件性敲除小鼠。Cd34基因位于小鼠1号染色体上，由8个外显子组成，其中ATG起始密码子在1号外显子，TGA终止密码子在8号外显子。条件性敲除区域（cKO区域）位于2号外显子和3号外显子，包含428个碱基对的编码序列。删除该区域会导致小鼠Cd34基因功能的丧失。Cd34-flox小鼠模型的构建过程包括将核糖核蛋白（RNP）和靶向载体共同注入受精卵。随后，对出生的小鼠进行PCR和测序分析进行基因型鉴定。此外，携带敲除等位基因的小鼠显示出脾细胞数量减少和造血缺陷，而携带另一种敲除等位基因的小鼠则显示出过敏原暴露后的嗜酸性粒细胞积累减少、TPA诱导的毛囊干细胞活化受损以及化学诱导的皮肤肿瘤发生率降低。该模型可用于研究Cd34基因在小鼠体内的功能。
基因研究概述
基因CD34是一种在人类中表达的细胞表面抗原，主要存在于造血干细胞、血管内皮细胞以及约30%的急性髓细胞和淋巴细胞性白血病患者中的原始细胞上。CD34基因位于1号染色体上，其编码的蛋白质是一种跨膜糖蛋白，其确切功能尚不清楚。CD34在造血干细胞的自我更新、多系分化和造血重建中发挥着重要作用。CD34基因的转录起始位点位于翻译起始位点的上游258个碱基对处，其5'非翻译区具有广泛的二级结构。CD34基因的表达受到多种因素的调控，例如核蛋白可以与CD34启动子区域直接序列特异性相互作用，激活CD34基因的转录[4]。
CD34基因在基因治疗和再生医学中具有重要的应用价值。例如，利用CRISPR/Cas9基因编辑系统可以对CD34+造血干细胞进行基因编辑，以治疗β-地中海贫血等疾病。研究表明，通过CRISPR/Cas9技术可以将正常的β-珠蛋白基因引入到患者的造血干细胞中，从而纠正由于β-珠蛋白基因突变引起的疾病[1]。此外，CD34+造血干细胞还可以作为基因治疗的载体细胞，将外源基因导入到患者体内，用于治疗各种遗传性疾病。例如，通过慢病毒载体将正常的基因导入到CD34+造血干细胞中，可以治疗X连锁慢性肉芽肿病等疾病[2]。
基因转移技术是将外源基因导入到细胞中的有效方法。除了病毒载体，非病毒载体如转座子系统也被广泛应用于基因转移研究。PiggyBac转座子系统是一种高效的基因转移工具，可以稳定地将基因导入到各种细胞类型中，包括哺乳动物细胞。研究表明，PiggyBac转座子系统可以有效地将基因导入到CD34+造血干细胞中，并且可以实现稳定的外源基因表达[3]。此外，转座子系统还可以用于生成诱导多能干细胞（iPS），通过将编码重编程因子的基因导入到体细胞中，可以将其转化为iPS细胞。
总之，CD34基因在造血干细胞的生物学过程中发挥着重要作用，并且在基因治疗和再生医学中具有重要的应用价值。利用基因编辑技术、基因转移技术和转座子系统等方法，可以有效地对CD34+造血干细胞进行基因操作，为治疗各种遗传性疾病和血液系统疾病提供了新的思路和策略。
参考文献：
1. Dever, Daniel P, Bak, Rasmus O, Reinisch, Andreas, Weinberg, Kenneth I, Porteus, Matthew H. 2016. CRISPR/Cas9 β-globin gene targeting in human haematopoietic stem cells. In Nature, 539, 384-389. doi:10.1038/nature20134. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/27820943/
2. Kohn, Donald B, Booth, Claire, Kang, Elizabeth M, Galy, Anne, Thrasher, Adrian J. 2020. Lentiviral gene therapy for X-linked chronic granulomatous disease. In Nature medicine, 26, 200-206. doi:10.1038/s41591-019-0735-5. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/31988463/
3. Di Matteo, Mario, Mátrai, Janka, Belay, Eyayu, Vandendriessche, Thierry, Chuah, Marinee K L. . PiggyBac toolbox. In Methods in molecular biology (Clifton, N.J.), 859, 241-54. doi:10.1007/978-1-61779-603-6_14. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/22367876/
4. Satterthwaite, A B, Burn, T C, Le Beau, M M, Tenen, D G. . Structure of the gene encoding CD34, a human hematopoietic stem cell antigen. In Genomics, 12, 788-94. doi:. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/1374051/
