智鼠故事 
C57BL/6NCya-Agtr1aem1flox/Cya 条件性基因敲除小鼠
复苏/繁育服务
产品名称：
Agtr1a-flox
产品编号：
S-CKO-01102
品系背景：
C57BL/6NCya
* 使用本品系发表的文献需注明：Agtr1a-flox mice (Strain S-CKO-01102) were purchased from Cyagen.
交付类型
周龄
性别
基因型
数量
只
基本信息
品系名称
C57BL/6NCya-Agtr1aem1flox/Cya
品系编号
CKOCMP-11607-Agtr1a-B6N-VA
产品编号
S-CKO-01102
基因名
Agtr1a
品系背景
C57BL/6NCya
基因别称
AT1；AG2S；AT1a；AT2R1；Agtr1；AT2R1A；Agt1ar；Agtr-1a；Angtr-1a；1810074K20Rik
NCBI号
修饰方式
条件性基因敲除
品系说明
该品系是基于策略设计时的数据库信息制作而成，建议您在购买前查询最新的数据库和相关文献，以获取最准确的表型信息。
小鼠表型
MGI:87964 Homozygous inactivation of this gene causes hypotension and hyperreninemia, alters drinking behavior and vascular and hemodynamic responses to angiotensin II, and may lead to abnormal physiological response to xenobiotics, abnormal kidney morphology, andreduced cell numbers in specific brain areas.
质控标准
精子检测
① 冷冻前验证精子活力观察
② 冷冻验证每批次进行复苏验证
品系状态
活体
环境标准
SPF
供应地区
中国
品系详情
Agtr1a位于小鼠的13号染色体，采用基因编辑技术，通过高通量电转受精卵方式，获得Agtr1a基因条件性敲除小鼠，性成熟后取精子冻存。
Agtr1a-flox小鼠模型是由赛业生物（Cyagen）采用基因编辑技术构建的条件性敲除小鼠。Agtr1a基因位于小鼠13号染色体上，由3个外显子组成，其中ATG起始密码子在3号外显子，TGA终止密码子在3号外显子（Transcript Agtr1a-201: ENSMUST00000066412）。3号外显子被选为条件性敲除区域（cKO区域），该区域包含1080个碱基对的编码序列。删除该区域会导致小鼠Agtr1a基因功能的丧失。
Agtr1a-flox小鼠模型的构建过程包括使用BAC克隆RP23-268M12作为模板，通过PCR生成同源臂和cKO区域。然后，将RNP和靶向载体共同注入受精卵中，使其在胚胎干细胞中发生同源重组。胚胎干细胞随后被注入小鼠囊胚中，以生成嵌合小鼠。通过筛选嵌合小鼠的子代，可以筛选出携带敲除等位基因的小鼠。
对于携带敲除等位基因的小鼠，其3号外显子发生移码突变，导致100.0%的编码区域被破坏。此外，5'-loxP位点插入于2号内含子中，其大小为35881个碱基对。有效的cKO区域大小约为2.8 kb，该区域不包含任何其他已知基因。
Agtr1a-flox小鼠模型可用于研究Agtr1a基因在小鼠体内的功能。携带敲除等位基因的小鼠表现出低血压、高肾素血症、饮水行为改变、对血管紧张素II的血管和血流动力学反应异常等表型。此外，携带敲除等位基因的小鼠可能对异生物质产生异常的生理反应，肾脏形态异常，特定脑区细胞数量减少。
发表文献
Signal Transduction and Targeted Therapy
2023.05
* 使用本品系发表的文献需注明：Agtr1a-flox mice (Strain S-CKO-01102) were purchased from Cyagen.
基因研究概述
Agtr1a基因编码的是血管紧张素II受体1型（AT1R）的α亚型，是肾素-血管紧张素系统（RAS）中的关键组成部分。AT1R在调节血压、血管收缩、细胞生长和增殖等方面发挥着重要作用。Agtr1a基因的表达和功能受到多种因素的调控，包括DNA甲基化、组蛋白修饰和非编码RNA等表观遗传机制。
有研究表明，在自发性高血压大鼠（SHR）的下丘脑室旁核（PVN）中，Agtr1a基因的表达水平显著升高，这与高血压的发生发展密切相关。DNA甲基化是一种重要的表观遗传机制，可以调控基因的表达。研究发现，SHR的PVN中，Agtr1a基因启动子区域的CpG位点甲基化水平较正常血压大鼠（WKY）显著降低。此外，DNA甲基转移酶（DNMT）和甲基-CpG结合蛋白2（MeCP2）在SHR的PVN中表达水平也显著降低，而TET蛋白在SHR中的表达水平显著升高。这些结果表明，DNA低甲基化可能促进了Agtr1a基因的转录，进而导致高血压的发生[1]。
此外，有研究发现，母体高脂肪饮食（MHF）会导致后代血管功能障碍，这可能与血管紧张素II-PKC-L型钙通道（LTCC）轴的异常有关。研究发现，MHF后代大鼠的肠系膜动脉对血管紧张素II的反应性显著升高，这与Agtr1a和Prkcb基因启动子区域特定CpG位点的DNA甲基化水平降低有关。Agtr1a和Prkcb基因的表达上调导致血管平滑肌细胞内钙离子浓度升高，进而引起血管收缩和血压升高[2]。
非酒精性脂肪性肝炎（NASH）相关肝纤维化过程中，Agtr1a基因的DNA甲基化水平也发生了改变。研究发现，在NASH相关肝纤维化模型中，Agtr1a基因的甲基化水平升高，但在活化的肝星状细胞中，Agtr1a基因的表达水平也升高。这表明，Agtr1a基因的DNA甲基化可能通过上调其表达，参与了NASH相关肝纤维化的发生发展[3]。
母体运动对后代血管功能的影响也与Agtr1a基因的表观遗传调控有关。研究发现，母体运动可以上调DNMT的表达，导致Agtr1a基因启动子区域的DNA甲基化水平升高，从而抑制Agtr1a基因的表达。这有助于改善自发性高血压大鼠后代肠系膜动脉的功能[4]。
综上所述，Agtr1a基因的表观遗传调控在高血压的发生发展中发挥着重要作用。DNA甲基化、组蛋白修饰和非编码RNA等表观遗传机制可以影响Agtr1a基因的表达，进而影响血压和血管功能。深入研究Agtr1a基因的表观遗传调控机制，有助于我们更好地理解高血压的发病机制，并为高血压的治疗和预防提供新的思路和策略。
参考文献：
1. Ghosh, Krishna, Zhou, Jing-Jing, Shao, Jian-Ying, Chen, Shao-Rui, Pan, Hui-Lin. 2023. DNA demethylation in the hypothalamus promotes transcription of Agtr1a and Slc12a2 and hypertension development. In The Journal of biological chemistry, 300, 105597. doi:10.1016/j.jbc.2023.105597. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/38160798/
2. Zheng, Qiutong, He, Yun, Li, Lingjun, Tang, Jiaqi, Xu, Zhice. 2023. Perinatal Fat-Diets Increased Angiotensin II-Mediated Ca2+ through PKC-L-Type Calcium Channel Axis in Resistance Arteries via Agtr1a-Prkcb Gene Methylation. In Nutrients, 15, . doi:10.3390/nu15010245. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/36615902/
3. Asada, Kiyoshi, Aihara, Yosuke, Takaya, Hiroaki, Yamao, Junichi, Yoshiji, Hitoshi. . DNA methylation of angiotensin II receptor gene in nonalcoholic steatohepatitis-related liver fibrosis. In World journal of hepatology, 8, 1194-1199. doi:. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/27729955/
4. Shan, Meiling, Li, Shanshan, Zhang, Yanyan, Zhou, Yang, Shi, Lijun. 2022. Maternal exercise upregulates the DNA methylation of Agtr1a to enhance vascular function in offspring of hypertensive rats. In Hypertension research : official journal of the Japanese Society of Hypertension, 46, 654-666. doi:10.1038/s41440-022-01124-7. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/36539461/
