Adam11-3xV5 tag-P2A-iCreERT2-T2A-3xNLS-3xHA tag小鼠

复苏/繁育服务
产品名称

Adam11-3xV5 tag-P2A-iCreERT2-T2A-3xNLS-3xHA tag

产品编号

C002205

品系全称

C57BL/6Cya-Adam11em1(3xV5 tag-P2A-iCreERT2-T2A-3xNLS-3xHA tag)/Cya

品系背景

C57BL/6Cya

表达组织/细胞举例

小脑皮质中的篮状细胞、大脑皮质、脑干核团及脊髓中的神经元和其他Adam11阳性细胞

品系状态

使用本品系发表的文献需注明: Adam11-3xV5 tag-P2A-iCreERT2-T2A-3xNLS-3xHA tag mice (Catalog C002205) were purchased from Cyagen.
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基本信息

基因
Adam11
基因别称
Mdc
染色体号
Chr 11 (Mouse)

品系介绍

Adam11(a disintegrin and metallopeptidase domain 11)基因编码ADAM11蛋白,属ADAM(解整合素-金属蛋白酶)家族,为I型跨膜蛋白;因其催化基序关键位点缺失,ADAM11通常被认为不具金属蛋白酶活性,而在中枢神经系统中参与神经元黏附及突触前蛋白的定位 [1,2]。Adam11在CNS各区域神经元中广泛表达,其中小脑皮质丰度较高 [1];在蛋白水平,ADAM11富集于小脑皮质篮状细胞轴突末端(pinceau结构),浦肯野细胞中表达较弱,大脑皮质、脑干核团及脊髓等区域亦有表达 [2]。此外,视网膜、外周神经系统神经节、肝脏与睾丸,以及表达水平较低的肾脏等组织亦可检测到Adam11表达 [1]。
Adam11-3xV5 tag-P2A-iCreERT2-T2A-3xNLS-3xHA tag小鼠是通过基因编辑技术构建的,将小鼠内源性Adam11基因的终止密码子替换为3xV5 tag-P2A-iCreERT2-T2A-3xNLS-3xHA tag表达元件。在未经他莫昔芬(tamoxifen)处理的情况下,iCreERT2重组酶主要存在于细胞质中;经过他莫昔芬处理后,iCreERT2重组酶进入细胞核并发挥其重组作用。当Adam11-3xV5 tag-P2A-iCreERT2-T2A-3xNLS-3xHA tag小鼠与含有loxP位点的小鼠杂交后,子代小鼠经tamoxifen诱导后,预计将在Adam11阳性细胞中发生由Cre重组酶介导的loxP位点间的序列重组。
参考文献
Rybnikova E, Kärkkäinen I, Pelto-Huikko M, Huovila AP. Developmental regulation and neuronal expression of the cellular disintegrin ADAM11 gene in mouse nervous system. Neuroscience. 2002;112(4):921-934. doi:10.1016/S0306-4522(02)00124-0.
Kole MJ, Qian J, Waase MP, Klassen TL, Chen TT, Augustine GJ, Noebels JL. Selective loss of presynaptic potassium channel clusters at the cerebellar basket cell terminal pinceau in Adam11 mutants reveals their role in ephaptic control of Purkinje cell firing. J Neurosci. 2015;35(32):11433-11444. doi:10.1523/JNEUROSCI.1346-15.2015.

构建方案

通过基因编辑技术,将小鼠内源性Adam11基因的终止密码子替换为3xV5 tag-P2A-iCreERT2-T2A-3xNLS-3xHA tag表达元件。
图1. Adam11-3xV5 tag-P2A-iCreERT2-T2A-3xNLS-3xHA tag小鼠基因编辑打靶示意图。
图1. Adam11-3xV5 tag-P2A-iCreERT2-T2A-3xNLS-3xHA tag小鼠基因编辑打靶示意图。