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Ckm-iCre-Tg小鼠

Name: Ckm-iCre-Tg小鼠_骨骼肌特异性Cre工具鼠_购买_构建_现货-赛业生物
Brand: 赛业生物 (Cyagen)
SKU: C002148

复苏/繁育服务

产品名称

Ckm-iCre-Tg

产品编号

C002148

品系全称

C57BL/6Cya-Tg(Ckm-iCre)/Cya

品系背景

C57BL/6Cya

表达组织/细胞举例

骨骼肌、心肌以及其他Ckm阳性细胞

品系状态

使用本品系发表的文献需注明： Ckm-iCre-Tg mice (Catalog C002148) were purchased from Cyagen.

交付类型

周龄

性别

基因型

数量

小计：

询价

Cre工具鼠模型

基本信息

验证数据

基因

Ckm

基因别称

NCBI ID

12715 (Mouse)

染色体号

Chr 7 (Mouse)

MGI ID

MGI:88413

更多详情

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品系介绍

Ckm（creatine kinase, muscle）编码肌型肌酸激酶（CKM），是一种主要定位于细胞质的能量代谢酶。Ckm在成年小鼠骨骼肌和心肌中高表达，也可在乳腺等组织中检测到较高表达。CKM催化磷酸肌酸与ADP之间的可逆磷酸基团转移，促进ATP的快速再生，维持肌肉收缩过程中能量的供需平衡。因此，Ckm是研究肌肉能量代谢等肌肉细胞相关生物学过程的重要基因^[1-2]。

Ckm-iCre-Tg小鼠是通过转基因（TG）技术将“Mouse Ckm promoter-Kozak-iCre-WPRE-BGH pA”基因表达元件整合到小鼠基因组中，以构建小鼠模型。iCre（improved Cre）为密码子优化后的Cre重组酶，本文中Cre重组酶即指iCre。当Ckm-iCre-Tg小鼠与含有loxP位点的小鼠杂交后，子代小鼠预计将在Ckm阳性细胞中发生由Cre重组酶介导的loxP位点间的序列重组。

参考文献

Wallimann T, Tokarska-Schlattner M, Schlattner U. The creatine kinase system and pleiotropic effects of creatine. Amino Acids. 2011;40(5):1271-1296.

Kitzenberg D, Colgan SP, Glover LE. Creatine kinase in ischemic and inflammatory disorders. Clin Transl Med. 2016;5(1):31.

构建方案

通过转基因（TG）技术将“Mouse Ckm promoter-Kozak-iCre-WPRE-BGH pA”基因表达元件整合到小鼠基因组中。

图1. Ckm-iCre-Tg小鼠基因编辑打靶示意图。

1. 检测方法

将Ckm-iCre-Tg小鼠与条件性表达tdTomato荧光蛋白的Rosa26-LSL-tdTomato小鼠交配，产生双基因杂合子代小鼠。Cre重组酶介导表达终止元件（LSL）的删除将导致tdTomato蛋白在Cre阳性细胞中的表达。当子代小鼠发育到5周龄时，采集小鼠脑（brain）、肺（lung）、肝脏（liver）、心脏（heart）、脾脏（spleen）、肾脏（kidney）、腹股沟白色脂肪组织（inguinal white adipose tissue，iWAT）、股四头肌（quadriceps）、腓肠肌（gastrocnemius，GAS）、胫骨前肌（tibialis anterior，TA）组织，并通过免疫荧光（IF）分析tdTomato蛋白的分布，以确定Cre重组酶的表达情况。

2. 基因型

Cre+: TG-Ckm-iCre[TG/?]; Rosa26-LSL-tdTomato[CKI/+]；

Cre-: Rosa26-LSL-tdTomato[CKI/+]。

3. 检测结果

（1）Cre重组酶在腓肠肌、胫骨前肌、股四头肌和心肌中的表达情况

检测结果显示，在Cre+小鼠的腓肠肌、胫骨前肌和股四头肌的肌肉细胞中存在明显的tdTomato橙色荧光，表明在此类细胞中发生Cre重组酶介导的tdTomato表达。而Cre+小鼠的心肌细胞中存在少量的tdTomato橙色荧光信号（<10%），表明在此类细胞中Cre重组酶介导的tdTomato有较低表达。