Tlr12-KO 基因敲除小鼠

Tlr12，也称为Toll样受体12，是一种在哺乳动物中发现的基因，其编码的蛋白质在先天免疫系统中发挥重要作用。Tlr12属于Toll样受体（TLRs）家族，是一类模式识别受体（PRRs），主要识别病原体相关分子模式（PAMPs），并诱导宿主保护性免疫反应。TLRs在抗感染免疫中起着关键作用，通过识别病原体的分子结构，激活信号传导途径，并启动免疫应答。

Tlr12的表达与某些寄生虫感染有关。例如，研究表明，在利什曼原虫感染的情况下，Tlr12的表达增加，并且在利什曼原虫感染的巨噬细胞中发挥作用。研究发现，TLR11/TLR12的表达在利什曼原虫感染的巨噬细胞中增加，而使用抗利什曼原虫药物miltefosine可以抑制这一表达。此外，脂多糖（LPG）的升高和LPG或TLR2的阻断可以防止TLR11/TLR12的表达增加。LPG-TLR2相互作用通过MyD88和TIRAP介导的信号传导增强ERK-1/2的激活，并增加IL-10的产生，从而促进TLR11/TLR12的表达。研究还发现，在病毒性利什曼原虫中，profilin的表达高于非病毒性利什曼原虫。此外，沉默TLR11或TLR12可以减少寄生虫的负荷，并增加IFN-γ的产生，但减少IL-4的产生，表明TLR11和TLR12在利什曼原虫感染中具有促进利什曼原虫生长的作用[1]。

此外，TLR1/TLR2异源二聚体的刺激可以激活先天免疫信号传导途径。研究表明，NEDD4结合蛋白1（N4BP1）是一种抑制细胞因子产生的蛋白质，它可以被caspase-8切割并失活。在小鼠中，N4BP1的缺失可以增加TLR1/TLR2、TLR7或TLR9刺激后特定细胞因子的产生，但不影响TLR3或TLR4的刺激。N4BP1在野生型巨噬细胞中不抑制TLR3或TLR4的响应，因为N4BP1在TRIF和caspase-8依赖性切割后被失活。研究还发现，在caspase-8缺陷型巨噬细胞中，对TLR3和TLR4刺激的细胞因子产生受损可以通过共删除N4BP1得到缓解。因此，caspase-8缺陷型巨噬细胞中N4BP1的持续存在会损害它们产生强烈细胞因子响应的能力。肿瘤坏死因子（TNF）也像TLR3或TLR4激动剂一样，通过caspase-8依赖性切割N4BP1，从而允许TRIF非依赖性TLRs产生更高水平的炎症细胞因子。综上所述，N4BP1是细胞因子反应的强抑制剂；揭示了N4BP1通过caspase-8切割作为炎症过程中的信号整合点；并为FADD和caspase-8突变引起的免疫缺陷提供了解释[2]。

N4BP1在调节先天免疫信号传导和炎症中发挥重要作用。N4BP1可以与多泛素链结合，并通过与ncIKKs的协调作用限制IKKα/β信号传导的持续时间。研究还发现，在巨噬细胞中，N4BP1的缺失可以延长TRIF非依赖性TLR激活后炎症基因转录的激活时间。此外，N4BP1在抑制TLR诱导的细胞因子产生方面具有重要作用，其抑制能力取决于其与多泛素链的结合能力。研究表明，N4BP1和ncIKKs在限制先天免疫反应过度激活方面发挥重要作用[3]。

在脑损伤后，不同的胶质细胞表现出一种共同的炎症性基因表达特征。研究表明，脑损伤后，不同的胶质细胞共享大量与炎症相关的基因，包括Cxcr3和Tlr1/2下游的炎症程序。这些研究结果表明，胶质细胞在脑损伤后的炎症反应中发挥着重要作用，并提示靶向这些炎症通路可能有助于改善脑损伤后的恢复[4]。

在野生小鼠中，自然发生的Tlr11和Tlr12多态性与弓形虫感染无关。研究分析了野生小鼠（Apodemus sylvaticus）中Tlr11和Tlr12的遗传多样性，并测试了Tlr11和Tlr12基因型或单倍型与弓形虫感染之间的关联。研究发现，虽然Tlr11和Tlr12在野生小鼠中是多态性的，但Tlr11或Tlr12基因型或单倍型与弓形虫感染没有显著关联。这表明，在自然宿主群体中，Tlr11和Tlr12的自然发生多态性在介导对弓形虫的定性抗性方面可能只发挥较小的作用[5]。

在人类非小细胞肺癌（NSCLC）中，CD8+TRMs具有独特的基因表达特征和先天样表型。研究表明，CD8+TRMs在NSCLC的肿瘤微环境中积累，并表现出独特的基因表达特征。研究还发现，JAML可以促进肿瘤相关CD8+TRMs的表达，并抑制肿瘤的进展。此外，研究发现，CD8+TRMs和JAML的表达与NSCLC患者的良好临床预后相关。这表明，CD8+TRMs在肿瘤免疫监测中发挥着重要作用，并且JAML可以促进CD8+TRMs的先天样功能，发挥抗肿瘤作用[6]。

在实验性弓形虫感染的小鼠中，核酸感受TLRs和TLR11/TLR12异源二聚体的联合作用赋予了对弓形虫的抵抗力。研究发现，携带UNC93B1基因突变的小鼠（3d小鼠）对弓形虫感染高度敏感。进一步研究表明，寄生虫RNA和DNA通过TLR7和TLR9激活先天免疫反应，而TLR11和TLR12作为异源二聚体是感知和响应弓形虫profilin所必需的。因此，TLR7/TLR9/TLR11缺陷型小鼠对弓形虫感染高度敏感，与3d小鼠的表型一致。人类缺乏功能性的Tlr11和Tlr12基因，因此人类细胞对寄生虫RNA和DNA的反应产生高水平的前炎症细胞因子，而对弓形虫profilin没有反应，这表明在人类弓形虫感染中，核酸感受TLRs起着更重要的作用[7]。

在老龄女性小鼠中，肠道通透性、肠道炎症和肠道免疫系统反应与肠道微生物群组成的年龄相关变化相关。研究发现，随着年龄的增长，老年小鼠的肠道微生物群多样性增加，而某些细菌的丰度发生变化。这些细菌丰度的变化与结肠炎症标志物的升高和肠道屏障基因表达的下调相关。这表明，老龄小鼠肠道微生物群的失衡可能对肠道免疫系统的衰老、炎症和肠漏病的发生起重要作用[8]。

综上所述，Tlr12在先天免疫系统中发挥重要作用，参与调节对病原体的免疫反应。Tlr12的表达与利什曼原虫感染有关，沉默Tlr12可以减少寄生虫的负荷。TLR1/TLR2异源二聚体的刺激可以激活先天免疫信号传导途径，而N4BP1在调节先天免疫反应和炎症中发挥重要作用。在脑损伤后，不同的胶质细胞表现出一种共同的炎症性基因表达特征。在野生小鼠中，自然发生的Tlr11和Tlr12多态性与弓形虫感染无关。在人类NSCLC中，CD8+TRMs具有独特的基因表达特征和先天样表型，并发挥抗肿瘤作用。在实验性弓形虫感染的小鼠中，核酸感受TLRs和TLR11/TLR12异源二聚体的联合作用赋予了对弓形虫的抵抗力。在老龄女性小鼠中，肠道通透性、肠道炎症和肠道免疫系统反应与肠道微生物群组成的年龄相关变化相关。这些研究结果有助于深入理解Tlr12在免疫反应和疾病发生中的作用，为开发新的免疫治疗策略和预防疾病提供新的思路和策略。