智鼠故事 
C57BL/6JCya-Krt14em1flox/Cya 条件性基因敲除小鼠
复苏/繁育服务
产品名称：
Krt14-flox
产品编号：
S-CKO-18046
品系背景：
C57BL/6JCya
* 使用本品系发表的文献需注明：Krt14-flox mice (Strain S-CKO-18046) were purchased from Cyagen.
交付类型
周龄
性别
基因型
数量
只
基本信息
品系名称
C57BL/6JCya-Krt14em1flox/Cya
品系编号
CKOCMP-16664-Krt14-B6J-VB
产品编号
S-CKO-18046
基因名
Krt14
品系背景
C57BL/6JCya
基因别称
CK-14; K14; Krt-1.14; Krt1-14
NCBI号
修饰方式
条件性基因敲除
品系说明
该品系是基于策略设计时的数据库信息制作而成，建议您在购买前查询最新的数据库和相关文献，以获取最准确的表型信息。
小鼠表型
MGI:96688 Homozygotes for targeted null mutations develop extensive skin blistering after birth and die by 2 days of age. If keratin 16 is also expressed in skin, development is normal but later alopecia, chronic skin ulcers and stratified epithelial defects occur.
质控标准
精子检测
① 冷冻前验证精子活力观察
② 冷冻验证每批次进行复苏验证
品系状态
活体
环境标准
SPF
供应地区
中国
品系详情
Krt14位于小鼠的11号染色体，采用基因编辑技术，通过高通量电转受精卵方式，获得Krt14基因条件性敲除小鼠，性成熟后取精子冻存。
Krt14-flox小鼠模型由赛业生物（Cyagen）利用基因编辑技术构建而成。该模型选用了C57BL/6JCya小鼠品系，通过基因编辑技术对Krt14基因进行了条件性敲除。Krt14基因位于小鼠11号染色体上，包含8个外显子，ATG起始密码子位于1号外显子，TAA终止密码子位于8号外显子。在构建过程中，赛业生物（Cyagen）选择了2号至7号外显子作为条件性敲除区域（cKO区域），该区域包含814个碱基对的编码序列。通过基因编辑技术，删除了cKO区域，导致小鼠Krt14基因功能丧失。为了构建该模型，赛业生物（Cyagen）利用BAC克隆RP24-68P2作为模板，通过PCR技术产生了同源臂和cKO区域，并构建了靶向载体。在出生后，对小鼠进行PCR和测序分析进行基因型鉴定。携带敲除等位基因的小鼠表现出出生后广泛的皮肤水泡形成，并在2天内死亡。如果皮肤中也表达Keratin 16，小鼠的发育正常，但之后会出现脱发、慢性皮肤溃疡和分层上皮缺陷。敲除2号至7号外显子导致基因移码，覆盖了编码区域的56.06%。5'-loxP位点插入的1号内含子大小为1209个碱基对，3'-loxP位点插入的7号内含子大小为546个碱基对。有效cKO区域的大小约为2.5千碱基对。构建策略基于现有数据库中的遗传信息。由于生物过程的复杂性，loxP插入对基因转录、RNA剪接和蛋白质翻译的影响风险无法在现有技术水平下预测。该模型可用于研究Krt14基因在小鼠体内的功能。
基因研究概述
KRT14，也称为Keratin-14，是一种角蛋白，属于中间丝蛋白家族，主要在表皮基底层角质形成细胞中表达。角蛋白是细胞骨架的重要组成部分，负责维持细胞形态和细胞器的稳定性。KRT14与另一种角蛋白KRT5形成异源二聚体，共同构成基底层角质形成细胞的中间丝，为细胞提供机械支撑和细胞粘附功能。
KRT14在多种生理和病理过程中发挥重要作用。首先，KRT14与表皮细胞的分化密切相关。在正常皮肤中，KRT14与KRT5的表达局限于基底层角质形成细胞，而在皮肤损伤或疾病状态下，KRT14的表达会发生变化。例如，在皮肤炎症性疾病如银屑病中，KRT14的表达水平会升高，导致角质形成细胞的增殖、迁移和炎症反应加剧[2]。此外，KRT14在伤口愈合过程中也发挥重要作用。研究表明，KRT14的表达与伤口闭合、再上皮化、角质形成细胞增殖和分化、真皮肉芽组织形成以及免疫细胞浸润等过程密切相关[4]。
KRT14的异常表达与多种皮肤疾病的发生发展密切相关。例如，KRT14的突变会导致表皮松解性大疱症（EBS）的发生。EBS是一种罕见的遗传性皮肤病，患者皮肤和粘膜容易发生水疱和糜烂。研究表明，KRT14的突变会导致中间丝结构异常，影响细胞骨架的稳定性，从而导致皮肤脆性和水疱形成[5,6,7]。此外，KRT14的异常表达还与乳腺癌的转移密切相关。研究发现，KRT14的表达水平与乳腺癌的转移潜能呈正相关。EZH2是一种表观遗传调控因子，其活性异常与多种癌症的发生发展密切相关。研究表明，EZH2的H3K27me3修饰功能可以通过抑制KRT14启动子区域SP1的结合，促进KRT14的转录，进而增强乳腺癌的转移潜能[1]。
此外，KRT14的表达还与黑色素瘤的转移相关。研究发现，KRT14在黑色素瘤细胞中的表达水平升高，且与黑色素瘤的转移潜能呈正相关。进一步研究表明，KRT14的表达与细胞外基质受体相互作用和肌动蛋白细胞骨架的调节密切相关，这些通路在黑色素瘤的转移过程中发挥重要作用[3]。
综上所述，KRT14作为一种重要的角蛋白，在皮肤发育、炎症反应、伤口愈合以及皮肤疾病的发生发展中发挥重要作用。KRT14的异常表达与多种皮肤疾病的发生发展密切相关，包括表皮松解性大疱症、银屑病、乳腺癌和黑色素瘤等。深入研究KRT14的功能和调控机制，有助于揭示皮肤疾病的发生发展机制，为皮肤疾病的治疗和预防提供新的思路和策略。
参考文献：
1. Verma, Ayushi, Singh, Akhilesh, Singh, Manish Pratap, Singh, Anup Kumar, Datta, Dipak. 2022. EZH2-H3K27me3 mediated KRT14 upregulation promotes TNBC peritoneal metastasis. In Nature communications, 13, 7344. doi:10.1038/s41467-022-35059-x. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/36446780/
2. Wang, Zhen, Zhou, Hong, Zheng, Huaping, Li, Wei, Li, Jiong. 2020. Autophagy-based unconventional secretion of HMGB1 by keratinocytes plays a pivotal role in psoriatic skin inflammation. In Autophagy, 17, 529-552. doi:10.1080/15548627.2020.1725381. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/32019420/
3. Xie, Renjian, Li, Bifei, Jia, Lee, Li, Yumei. 2022. Identification of Core Genes and Pathways in Melanoma Metastasis via Bioinformatics Analysis. In International journal of molecular sciences, 23, . doi:10.3390/ijms23020794. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/35054979/
4. Qiang, Lei, Yang, Seungwon, Cui, Yan-Hong, He, Yu-Ying. 2020. Keratinocyte autophagy enables the activation of keratinocytes and fibroblastsand facilitates wound healing. In Autophagy, 17, 2128-2143. doi:10.1080/15548627.2020.1816342. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/32866426/
5. Khani, Pouria, Farokh Forghani, Siamak, Ataei Kachoei, Zohreh, Zekri, Ali, Ghazi, Farideh. 2020. Analysis of KRT5 and KRT14 gene mutations and mode of inheritance in Iranian patients with clinical suspicion of Epidermolysis bullosa simplex. In Medical journal of the Islamic Republic of Iran, 34, 43. doi:10.34171/mjiri.34.43. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/32884918/
6. Dettwiler, M, Leuthard, F, Bauer, A, Leeb, T, Welle, M M. 2020. A nonsense variant in the KRT14 gene in a domestic shorthair cat with epidermolysis bullosa simplex. In Animal genetics, 51, 829-832. doi:10.1111/age.12979. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/32657488/
7. Yiasemides, E, Trisnowati, N, Su, J, Varigos, G, Murrell, D F. 2008. Clinical heterogeneity in recessive epidermolysis bullosa due to mutations in the keratin 14 gene, KRT14. In Clinical and experimental dermatology, 33, 689-97. doi:10.1111/j.1365-2230.2008.02858.x. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/18713255/
