智鼠故事 
C57BL/6JCya-Mmachcem1flox/Cya 条件性基因敲除小鼠
复苏/繁育服务
产品名称：
Mmachc-flox
产品编号：
S-CKO-13501
品系背景：
C57BL/6JCya
* 使用本品系发表的文献需注明：Mmachc-flox mice (Strain S-CKO-13501) were purchased from Cyagen.
交付类型
周龄
性别
基因型
数量
只
基本信息
品系名称
C57BL/6JCya-Mmachcem1flox/Cya
品系编号
CKOCMP-67096-Mmachc-B6J-VA
产品编号
S-CKO-13501
基因名
Mmachc
品系背景
C57BL/6JCya
基因别称
1810037K07Rik; CblC
NCBI号
修饰方式
条件性基因敲除
品系说明
该品系是基于策略设计时的数据库信息制作而成，建议您在购买前查询最新的数据库和相关文献，以获取最准确的表型信息。
小鼠表型
MGI:1914346 Homozygous null mice exhibit embryonic lethality before implantation while cultured embryos show delayed blastocyst formation and inability to hatch from the zona and generate giant cells in outgrowth assays. Female heterozygotes show high plasma levels of homocysteine and methylmalonic acid.
质控标准
精子检测
① 冷冻前验证精子活力观察
② 冷冻验证每批次进行复苏验证
品系状态
活体
环境标准
SPF
供应地区
中国
品系详情
Mmachc位于小鼠的4号染色体，采用基因编辑技术，通过高通量电转受精卵方式，获得Mmachc基因条件性敲除小鼠，性成熟后取精子冻存。
Mmachc-flox小鼠模型是由赛业生物（Cyagen）采用基因编辑技术构建的条件性敲除小鼠。Mmachc基因位于小鼠4号染色体上，由4个外显子组成，其中ATG起始密码子在1号外显子，TGA终止密码子在4号外显子。条件性敲除区域（cKO区域）位于第2号到4号外显子，包含759个碱基对的编码序列。删除该区域会导致小鼠Mmachc基因功能的丧失。Mmachc-flox小鼠模型的构建过程包括将基因编辑技术产生的靶向载体注入受精卵。随后，对出生的小鼠进行PCR和测序分析进行基因型鉴定。此外，纯合子小鼠在植入前会出现胚胎死亡，而培养的胚胎则会表现出延迟的囊胚形成和无法从透明带孵化以及在外突实验中产生巨型细胞。雌性杂合子小鼠则表现出高血浆同型半胱氨酸和甲基丙二酸水平。该模型可用于研究Mmachc基因在小鼠体内的功能。
基因研究概述
MMACHC，也称为甲基丙二酰辅酶A变位酶CblC（Methylmalonyl-CoA mutase cobalamin deficiency C, cblC），是一种位于1p34.1染色体上的基因，编码一个重要的酶，参与细胞内的维生素 B12 代谢。MMACHC 基因突变会导致维生素 B12 代谢障碍，进而引发多种临床疾病，其中最常见的是甲基丙二酸血症合并高同型半胱氨酸血症（cblC 病）。这种疾病是一种罕见的常染色体隐性遗传疾病，表现为血液和尿液中甲基丙二酸和高同型半胱氨酸的积累，以及继发的叶酸和一碳代谢紊乱。由于缺乏活性 CblC，细胞无法利用维生素 B12，导致血液中维生素 B12 水平正常甚至升高，但细胞却无法利用[3]。
MMACHC 基因突变导致的功能障碍会影响多种生物学过程，包括细胞分化、发育、代谢和疾病发生。例如，在新生儿或儿童早期，cblC 病患者通常表现出严重的多系统病理，包括视网膜变性、视力受损和血管变化等治疗抵抗的眼部表型。然而，研究发现，在缺乏 MMACHC 表达的视网膜细胞中，并没有出现眼部表型，这表明局部 MMACHC 缺乏可能不是导致视网膜表型的主要原因[4]。此外，MMACHC 基因突变还与超促性腺性腺功能减退症有关，这是一种以神经发育迟缓、癫痫、共济失调和脑白质营养不良为特征的遗传性疾病。研究发现，在一个家族中，患者表现出超促性腺性腺功能减退症和神经症状，而基因检测发现 MMACHC 基因存在复合杂合突变[5]。
为了更准确地诊断和治疗 cblC 病，研究者们开发了多种基因检测方法。例如，Wang 等人开发了一种基于高分辨率熔解曲线分析（PCR-HRM）的快速筛查方法，可以覆盖 MMACHC 基因的所有编码外显子，并验证了中国患者中发现的 14 种致病性 MMACHC 基因变异。该方法的准确性高、通量高、成本低、速度快，适用于大样本筛查[1]。此外，Hu 等人使用 Sanger 测序分析了 126 个 cblC 病家系的 MMACHC 基因变异，共检测到 31 种不同的变异，其中最常见的变异包括 c.609G>A、c.658_660delAAG、c.567dupT 和 c.80A>G 等[2]。这些研究结果有助于更全面地了解 MMACHC 基因变异的谱系，并为临床诊断和治疗提供参考。
总之，MMACHC 基因是一个重要的基因，其突变会导致维生素 B12 代谢障碍，引发多种临床疾病。研究 MMACHC 基因的功能和变异对于理解维生素 B12 代谢的生物学功能和疾病发生机制具有重要意义。未来的研究可以进一步探索 MMACHC 基因在其他疾病中的作用，并为相关疾病的治疗和预防提供新的思路和策略。
参考文献：
1. Wang, Chao, Liu, Yang, Cai, Fengying, Cai, Chunquan, Shu, Jianbo. 2020. Rapid screening of MMACHC gene mutations by high-resolution melting curve analysis. In Molecular genetics & genomic medicine, 8, e1221. doi:10.1002/mgg3.1221. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/32198913/
2. Hu, Shuang, Mei, Shiyue, Liu, Ning, Kong, Xiangdong. 2018. Molecular genetic characterization of cblC defects in 126 pedigrees and prenatal genetic diagnosis of pedigrees with combined methylmalonic aciduria and homocystinuria. In BMC medical genetics, 19, 154. doi:10.1186/s12881-018-0666-x. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/30157807/
3. Hannibal, Luciana, Jacobsen, Donald W. 2022. Intracellular processing of vitamin B12 by MMACHC (CblC). In Vitamins and hormones, 119, 275-298. doi:10.1016/bs.vh.2022.02.001. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/35337623/
4. Kiessling, Eva, Nötzli, Sarah, Todorova, Vyara, Grimm, Christian, Froese, D Sean. 2021. Absence of MMACHC in peripheral retinal cells does not lead to an ocular phenotype in mice. In Biochimica et biophysica acta. Molecular basis of disease, 1867, 166201. doi:10.1016/j.bbadis.2021.166201. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/34147638/
5. Shi, Changhe, Shang, Dandan, Sun, Shilei, Song, Bo, Xu, Yuming. 2015. MMACHC gene mutation in familial hypogonadism with neurological symptoms. In Gene, 574, 380-4. doi:10.1016/j.gene.2015.08.029. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/26283149/
