智鼠故事 
C57BL/6JCya-Tifaem1flox/Cya 条件性基因敲除小鼠
复苏/繁育服务
产品名称：
Tifa-flox
产品编号：
S-CKO-05586
品系背景：
C57BL/6JCya
* 使用本品系发表的文献需注明：Tifa-flox mice (Strain S-CKO-05586) were purchased from Cyagen.
交付类型
周龄
性别
基因型
数量
只
基本信息
品系名称
C57BL/6JCya-Tifaem1flox/Cya
品系编号
CKOCMP-211550-Tifa-B6J-VA
产品编号
S-CKO-05586
基因名
Tifa
品系背景
C57BL/6JCya
基因别称
T2bp
NCBI号
修饰方式
条件性基因敲除
品系说明
该品系是基于策略设计时的数据库信息制作而成，建议您在购买前查询最新的数据库和相关文献，以获取最准确的表型信息。
小鼠表型
质控标准
精子检测
① 冷冻前验证精子活力观察
② 冷冻验证每批次进行复苏验证
品系状态
活体
环境标准
SPF
供应地区
中国
品系详情
Tifa位于小鼠的3号染色体，采用基因编辑技术，通过高通量电转受精卵方式，获得Tifa基因条件性敲除小鼠，性成熟后取精子冻存。
Tifa-flox小鼠模型由赛业生物（Cyagen）采用基因编辑技术构建的条件性敲除小鼠。Tifa基因位于小鼠3号染色体上，由三个外显子组成，其中ATG起始密码子在3号外显子，TGA终止密码子也在3号外显子。条件性敲除区域（cKO区域）位于3号外显子，包含555个碱基对的编码序列。删除该区域会导致小鼠Tifa基因功能的丧失。
构建过程包括将核糖核蛋白（RNP）和靶向载体共同注入受精卵。随后，对出生的小鼠进行PCR和测序分析进行基因型鉴定。此外，cKO区域的删除不会导致阅读框移位，覆盖了100.0%的编码区域。2号内含子的大小为5039 bp，有效cKO区域的大小约为2.9 kb。
该策略基于现有数据库中的遗传信息设计。由于生物过程的复杂性，现有的技术无法预测loxP插入对基因转录、RNA剪接和蛋白质翻译的影响。
Tifa-flox小鼠模型可用于研究Tifa基因在小鼠体内的功能。
基因研究概述
TIFA，即TRAF-interacting protein with a forkhead-associated domain，是一种与TRAF（肿瘤坏死因子受体相关因子）相互作用的蛋白质，其FHA结构域允许其与TRAF6结合。TIFA在细胞信号传导中发挥着重要作用，尤其是在炎症和免疫反应的调节方面。TIFA通过与TRAF6相互作用，可以激活IkappaB激酶（IKK），进而激活NF-κB信号通路，导致炎症相关基因的表达。此外，TIFA还可以促进细胞增殖、迁移和存活，与多种癌症的发生和发展有关。
在结直肠癌中，Fusobacterium nucleatum通过释放ADP-heptose激活ALPK1/TIFA/TRAF6信号通路，进而增强NF-κB信号传导，导致炎症细胞因子IL-8的表达增加，以及抗凋亡基因BIRC3和TNFAIP3的表达上调，从而促进CRC细胞的存活和降低5-氟尿嘧啶的化疗敏感性[1]。在细菌感染中，ADP-β-D-manno-heptose（ADP-Hep）可以进入宿主细胞质，激活NF-κB信号传导，从而激活炎症反应。ADP-Hep直接结合ALPK1的N端结构域，刺激其激酶结构域，使TIFA磷酸化和激活。ADP-Hep（而不是HBP）单独或在细菌感染过程中诱导Alpk1依赖性炎症[2]。
在急性肾损伤中，TIFA表达显著上调，并定位于肾脏组织中LTL阳性细胞。TIFA的敲低可以减少线粒体损伤和细胞凋亡，表明TIFA通过激活线粒体损伤参与细胞焦亡，可能是治疗脓毒症诱导的肾损伤的治疗靶点[3]。在细菌防御系统中，T4-like噬菌体的基因tifA通过直接结合内切核糖核酸酶ToxN和RNA，形成高分子量核糖核蛋白复合物，抑制ToxN的活性，从而抑制细菌防御的ToxIN毒素-抗毒素（TA）系统[4]。
在胶质瘤中，TIFA表达上调，与胶质瘤的预后不良相关。TIFA通过E2F1促进糖酵解，从而促进胶质瘤的进展。敲低TIFA可以减少胶质瘤细胞和动物中的E2F1、GLUT1、HK2和LDHA的表达，表明TIFA可能是一种对抗胶质瘤的有益的治疗策略[5]。
在肺动脉高压中，TIFA蛋白表达与IL-1β、TNF-α、平均肺动脉压和肺血管阻力显著相关，TIFA蛋白表达可以独立预测肺动脉高压的存在，表明TIFA蛋白可能参与肺动脉高压的发病机制[6]。在肺腺癌中，TIFA表达上调，与患者生存率降低相关。敲低TIFA可以抑制细胞增殖和迁移，促进细胞周期阻滞和细胞凋亡，表明TIFA可能作为肺腺癌的预测生物标志物[7]。
在缺氧再灌注中，TIFA表达上调，与TLR4和MyD88依赖性信号传导相关。TIFA通过与TRAF6结合，促进TRAF6的寡聚化和泛素化，激活TAK1和IKK，导致NF-κB激活和HMGB1释放[8]。
在幽门螺杆菌感染中，NOD1和ALPK1/TIFA信号传导通路参与调节NF-κB依赖性反应。尽管NOD1和ALPK1/TIFA通路在调节NF-κB依赖性反应中的相对作用仍需明确，但它们可能协同而非冗余地工作[9]。
TIFA通过促进TRAF6的寡聚化和泛素化激活IKK，进而激活NF-κB信号通路，导致炎症相关基因的表达。此外，TIFA还可以促进细胞增殖、迁移和存活，与多种癌症的发生和发展有关。TIFA在结直肠癌、急性肾损伤、细菌防御、胶质瘤、肺动脉高压、肺腺癌和缺氧再灌注等多种生物学过程中发挥着重要作用，是治疗多种疾病的重要靶点。
参考文献：
1. Martin-Gallausiaux, Camille, Salesse, Laurène, Garcia-Weber, Diego, Arrieumerlou, Cécile, Lapaque, Nicolas. 2023. Fusobacterium nucleatum promotes inflammatory and anti-apoptotic responses in colorectal cancer cells via ADP-heptose release and ALPK1/TIFA axis activation. In Gut microbes, 16, 2295384. doi:10.1080/19490976.2023.2295384. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/38126163/
2. Zhou, Ping, She, Yang, Dong, Na, Zamyatina, Alla, Shao, Feng. 2018. Alpha-kinase 1 is a cytosolic innate immune receptor for bacterial ADP-heptose. In Nature, 561, 122-126. doi:10.1038/s41586-018-0433-3. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/30111836/
3. Li, Yiming, Zhang, Jing, Zhai, Pan, Liu, Chang, Peng, Zhiyong. 2022. The potential biomarker TIFA regulates pyroptosis in sepsis-induced acute kidney injury. In International immunopharmacology, 115, 109580. doi:10.1016/j.intimp.2022.109580. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/36586274/
4. Guegler, Chantal K, Teodoro, Gabriella I C, Srikant, Sriram, Ghose, Dia A, Laub, Michael T. . A phage-encoded RNA-binding protein inhibits the antiviral activity of a toxin-antitoxin system. In Nucleic acids research, 52, 1298-1312. doi:10.1093/nar/gkad1207. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/38117986/
5. Liu, Zhibing, He, Miaolong, Yu, Zeshun, Wang, Xiuwen, Ning, Fangling. 2024. TIFA enhances glycolysis through E2F1 and promotes the progression of glioma. In Cellular signalling, 125, 111498. doi:10.1016/j.cellsig.2024.111498. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/39481822/
6. Chang, Hao-Chih, Wei, Tong-You Wade, Wu, Pei-Yu, Chen, Chen-Huan, Sung, Shih-Hsien. 2021. TIFA protein expression is associated with pulmonary arterial hypertension. In Scientific reports, 11, 14140. doi:10.1038/s41598-021-93582-1. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/34238983/
7. Men, Wanfu, Li, Wenya, Zhao, Jungang, Li, Yu. 2018. TIFA Promotes Cell Survival and Migration in Lung Adenocarcinoma. In Cellular physiology and biochemistry : international journal of experimental cellular physiology, biochemistry, and pharmacology, 47, 2097-2108. doi:10.1159/000491478. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/29975933/
8. Ding, Ning, Zhang, Yong, Loughran, Patricia A, Tsung, Allan, Billiar, Timothy R. 2013. TIFA upregulation after hypoxia-reoxygenation is TLR4- and MyD88-dependent and associated with HMGB1 upregulation and release. In Free radical biology & medicine, 63, 361-7. doi:10.1016/j.freeradbiomed.2013.05.029. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/23722163/
9. Ying, Le, Ferrero, Richard L. . Role of NOD1 and ALPK1/TIFA Signalling in Innate Immunity Against Helicobacter pylori Infection. In Current topics in microbiology and immunology, 421, 159-177. doi:10.1007/978-3-030-15138-6_7. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/31123889/
