智鼠故事 
C57BL/6JCya-Spicem1flox/Cya 条件性基因敲除小鼠
复苏/繁育服务
产品名称：
Spic-flox
产品编号：
S-CKO-05219
品系背景：
C57BL/6JCya
* 使用本品系发表的文献需注明：Spic-flox mice (Strain S-CKO-05219) were purchased from Cyagen.
交付类型
周龄
性别
基因型
数量
只
基本信息
品系名称
C57BL/6JCya-Spicem1flox/Cya
品系编号
CKOCMP-20728-Spic-B6J-VA
产品编号
S-CKO-05219
基因名
Spic
品系背景
C57BL/6JCya
基因别称
Prf；Spi-C
NCBI号
修饰方式
条件性基因敲除
品系说明
该品系是基于策略设计时的数据库信息制作而成，建议您在购买前查询最新的数据库和相关文献，以获取最准确的表型信息。
小鼠表型
MGI:1341168 Homozygote null mice have prenatal lethality with incomplete penetrance, absent red pulp macrophages, decreased phagocytosis of senescent red blood cell, and enlargement of spleens with age due to an increase in splenic iron levels.
质控标准
精子检测
① 冷冻前验证精子活力观察
② 冷冻验证每批次进行复苏验证
品系状态
活体
环境标准
SPF
供应地区
中国
品系详情
Spic位于小鼠的10号染色体，采用基因编辑技术，通过高通量电转受精卵方式，获得Spic基因条件性敲除小鼠，性成熟后取精子冻存。
Spic-flox小鼠模型是由赛业生物（Cyagen）利用基因编辑技术构建的条件性基因敲除小鼠模型。Spic基因位于小鼠10号染色体上，包含6个外显子，其中ATG起始密码子位于2号外显子，TGA终止密码子位于6号外显子。条件性敲除区域（cKO区域）位于4号外显子，包含113个碱基对的编码序列。删除该区域会导致小鼠Spic基因的功能丧失。
Spic-flox小鼠模型的构建过程包括使用基因编辑技术将cKO区域进行条件性敲除。为了构建该模型，赛业生物（Cyagen）使用BAC克隆RP23-199P5作为模板，通过PCR扩增同源臂和cKO区域。随后，将构建好的靶向载体注入受精卵中。出生的小鼠通过PCR和测序分析进行基因型鉴定，以确认是否成功构建了Spic-flox小鼠模型。
需要注意的是，Spic-flox小鼠模型具有一些特殊的表型特征。同型合子纯合子小鼠在胚胎期具有不完全的致死性，缺乏红髓巨噬细胞，对衰老红细胞的吞噬作用减弱，并且随着年龄的增长，脾脏会因铁含量增加而增大。
Spic-flox小鼠模型可用于研究Spic基因在小鼠体内的功能。通过敲除4号外显子，可以导致基因发生移码突变，并覆盖15.56%的编码区域。此外，该模型的cKO区域不包含其他已知基因，使得研究更加专注于Spic基因的功能。
基因研究概述
Spic，即ETS家族的转录因子成员，在多种生物学过程中发挥着重要作用。Spic在胚胎干细胞（ESCs）的调控中具有关键作用，尤其是在维持其多能性方面。Spic的激活可以促进ESCs中胆碱/一碳（1C）代谢基因的表达，例如Bhmt、Bhmt2和Dmgdh，从而影响组蛋白甲基化水平，如H3R17me2和H3K4me3，这对于维持ESCs的表观遗传状态至关重要[1]。此外，Spic还参与调节B细胞发育，通过RAG介导的DNA双链断裂激活SPIC-BCLAF1转录因子复合物，从而抑制PU.1转录因子的活性，促进早期B细胞的成熟[3]。
Spic在沙门氏菌的致病性中也发挥着重要作用。沙门氏菌通过其III型分泌系统（T3SS）分泌SpiC蛋白，该蛋白可以抑制巨噬细胞的吞噬体-溶酶体融合，从而促进细菌在宿主细胞内的存活和复制。SpiC蛋白可以靶向哺乳动物Hook3蛋白的功能，从而改变细胞内转运[2]。此外，Spic还参与沙门氏菌的SPI-2 T3SS蛋白的分泌，这些蛋白对于沙门氏菌的致病性至关重要[5]。Spic的缺失会导致沙门氏菌的游动能力和在巨噬细胞内的复制能力降低，这与葡萄糖代谢有关[4]。此外，Spic还参与沙门氏菌鞭毛的合成，影响细菌的游动能力和致病性[8]。
Spic在肝细胞中的作用也得到了研究。TLR8激动剂selgantolimod（SLGN）可以调节肝细胞中Kupffer细胞的分化状态，并通过IL-6依赖性机制抑制HBV进入肝细胞。SLGN处理Kupffer细胞后，上调了单核细胞标记基因（如S100A12）的表达，并下调了与Kupffer细胞特征相关的基因（如SPIC）的表达[6]。此外，Spic在沙门氏菌疫苗研究中也具有重要作用。通过构建waaJ和spiC双缺失的沙门氏菌菌株，可以获得一种具有高免疫原性和安全性、易于区分的疫苗候选株[7]。
Spic在红细胞生成过程中也发挥着重要作用。在红细胞生成过程中，Spic表达于岛状巨噬细胞中，这些细胞构成了红细胞生成岛（EBI）的微环境。Spic的表达可以区分不同类型的岛状巨噬细胞，例如EKLF/Klf1表达的岛状巨噬细胞和Maf/Nr1h3表达的岛状巨噬细胞[9]。
综上所述，Spic在多种生物学过程中发挥着重要作用，包括维持ESCs的多能性、调节B细胞发育、沙门氏菌的致病性、肝细胞中的HBV感染、沙门氏菌疫苗研究和红细胞生成。Spic的研究有助于深入理解这些生物学过程和疾病的发生机制，为疾病的治疗和预防提供新的思路和策略。
参考文献：
1. Mirzadeh Azad, Fatemeh, Struys, Eduard A, Wingert, Victoria, Stunnenberg, Hendrik G, Atlasi, Yaser. 2023. Spic regulates one-carbon metabolism and histone methylation in ground-state pluripotency. In Science advances, 9, eadg7997. doi:10.1126/sciadv.adg7997. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/37595034/
2. Shotland, Yoram, Krämer, Helmut, Groisman, Eduardo A. . The Salmonella SpiC protein targets the mammalian Hook3 protein function to alter cellular trafficking. In Molecular microbiology, 49, 1565-76. doi:. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/12950921/
3. Soodgupta, Deepti, White, Lynn S, Yang, Wei, Payton, Jacqueline E, Bednarski, Jeffrey J. . RAG-Mediated DNA Breaks Attenuate PU.1 Activity in Early B Cells through Activation of a SPIC-BCLAF1 Complex. In Cell reports, 29, 829-843.e5. doi:10.1016/j.celrep.2019.09.026. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/31644907/
4. Wang, Yaonan, Liu, Guifeng, Zhang, Jian, Geng, Shizhong, Jiao, Xin'an. 2020. WbaP is required for swarm motility and intramacrophage multiplication of Salmonella Enteritidis spiC mutant by glucose use ability. In Microbiological research, 245, 126686. doi:10.1016/j.micres.2020.126686. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/33429286/
5. Yu, Xiu-Jun, Ruiz-Albert, Javier, Unsworth, Kate E, Liu, Mei, Holden, David W. . SpiC is required for secretion of Salmonella Pathogenicity Island 2 type III secretion system proteins. In Cellular microbiology, 4, 531-40. doi:. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/12174087/
6. Roca Suarez, Armando Andres, Plissonnier, Marie-Laure, Grand, Xavier, Testoni, Barbara, Zoulim, Fabien. 2024. TLR8 agonist selgantolimod regulates Kupffer cell differentiation status and impairs HBV entry into hepatocytes via an IL-6-dependent mechanism. In Gut, 73, 2012-2022. doi:10.1136/gutjnl-2023-331396. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/38697771/
7. Zhang, Jun-Feng, Shang, Ke, Wei, Bai, Cha, Se-Yeoun, Kang, Min. 2021. Evaluation of Safety and Protective Efficacy of a waaJ and spiC Double Deletion Korean Epidemic Strain of Salmonella enterica Serovar Gallinarum. In Frontiers in veterinary science, 8, 756123. doi:10.3389/fvets.2021.756123. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/34869728/
8. Uchiya, Kei-ichi, Sugita, Asami, Nikai, Toshiaki. 2009. Involvement of SPI-2-encoded SpiC in flagellum synthesis in Salmonella enterica serovar Typhimurium. In BMC microbiology, 9, 179. doi:10.1186/1471-2180-9-179. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/19706157/
9. Mukherjee, Kaustav, Bieker, James J. 2021. Transcriptional Control of Gene Expression and the Heterogeneous Cellular Identity of Erythroblastic Island Macrophages. In Frontiers in genetics, 12, 756028. doi:10.3389/fgene.2021.756028. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/34880902/
