智鼠故事 
C57BL/6JCya-Rnf2em1flox/Cya 条件性基因敲除小鼠
复苏/繁育服务
产品名称：
Rnf2-flox
产品编号：
S-CKO-04813
品系背景：
C57BL/6JCya
* 使用本品系发表的文献需注明：Rnf2-flox mice (Strain S-CKO-04813) were purchased from Cyagen.
交付类型
周龄
性别
基因型
数量
只
基本信息
品系名称
C57BL/6JCya-Rnf2em1flox/Cya
品系编号
CKOCMP-19821-Rnf2-B6J-VA
产品编号
S-CKO-04813
基因名
Rnf2
品系背景
C57BL/6JCya
基因别称
dinG；Ring1B
NCBI号
修饰方式
条件性基因敲除
品系说明
该品系是基于策略设计时的数据库信息制作而成，建议您在购买前查询最新的数据库和相关文献，以获取最准确的表型信息。
小鼠表型
MGI:1101759 Embryos homozygous for a null allele show an early growth arrest, failure to progress through gastrulation, impaired epiblast expansion, accumulation of posterior mesoderm and die before E10.5. Mice homozygous for a hypomorphic allele show posterior homeotic transformations of the axial skeleton.
质控标准
精子检测
① 冷冻前验证精子活力观察
② 冷冻验证每批次进行复苏验证
品系状态
在研小鼠
环境标准
SPF
供应地区
中国
品系详情
Rnf2位于小鼠的1号染色体，采用基因编辑技术，通过高通量电转受精卵方式，获得Rnf2基因条件性敲除小鼠，性成熟后取精子冻存。
Rnf2-flox小鼠模型是由赛业生物（Cyagen）采用基因编辑技术构建的条件性敲除小鼠。Rnf2基因位于小鼠1号染色体上，由8个外显子组成，其中ATG起始密码子在3号外显子，TAG终止密码子在8号外显子。条件性敲除区域（cKO区域）位于4号和5号外显子之间，包含377个碱基对的编码序列。删除该区域会导致小鼠Rnf2基因功能的丧失。Rnf2-flox小鼠模型的构建过程包括将基因编辑工具和靶向载体共同注入受精卵。随后，对出生的小鼠进行PCR和测序分析进行基因型鉴定。此外，对于携带敲除等位基因的小鼠，胚胎在早期生长停滞，无法通过原肠胚形成，上皮细胞扩展受损，后部中胚层积累，并在E10.5前死亡。而携带低表达等位基因的小鼠则表现出轴向骨骼的后部同源转化。该模型的构建基于现有数据库中的遗传信息，但生物过程的复杂性使得无法预测loxP插入对基因转录、RNA剪接和蛋白质翻译的影响。
基因研究概述
Rnf2，也称为Ring1B或Ding，是环指蛋白家族的成员之一，属于E3泛素连接酶。Rnf2在细胞核中发挥重要作用，主要参与组蛋白H2A的单泛素化修饰，具体在赖氨酸119位点（H2AK119）进行修饰。这一修饰过程在细胞周期的调控、基因表达的调控以及细胞命运的维持中扮演着关键角色。
Rnf2是多梳抑制复合物1（PRC1）的重要组分，PRC1是一种维持基因转录抑制状态的蛋白质复合物。PRC1通过在特定基因的启动子区域沉积H2AK119ub1来抑制基因表达，从而维持细胞的特定表型。研究发现，Rnf2在多种生物学过程中发挥着重要作用，包括胚胎发育、细胞增殖、分化和死亡等。
在胚胎发育过程中，Rnf2对于神经系统的发育至关重要。研究表明，Rnf2基因缺失会导致小鼠胚胎的神经管缺陷，表现为无脑儿或脑膨出等症状[1]。此外，Rnf2还在肠神经系统的发育中发挥重要作用，其缺失会导致肠道神经元的缺失，进而引起肠功能障碍[1]。
在肿瘤发生发展过程中，Rnf2也发挥着重要作用。研究表明，Rnf2在多种癌症中表达上调，包括肝癌、黑色素瘤、前列腺癌、乳腺癌、胰腺癌、胃癌和膀胱尿路上皮癌等[2]。Rnf2的过表达与这些癌症的发生、发展和临床特征密切相关。例如，在肝癌中，Rnf2通过抑制E-Cadherin的转录，促进上皮-间质转化（EMT）过程，从而促进肝癌的转移[3]。在乳腺癌中，Rnf2通过稳定雌激素受体α（ERα）蛋白，调节ERα的转录活性，进而影响乳腺癌的进展[4]。
Rnf2还参与Wnt信号通路的调控。研究发现，Rnf2能够促进TCF7L1蛋白的降解，从而调节Wnt信号通路的阈值、持续时间和终止[5]。TCF7L1是一种Wnt信号通路下游的转录因子，具有抑制Wnt信号通路的作用。Rnf2通过泛素化TCF7L1，促进其降解，从而解除对Wnt信号通路的抑制，促进Wnt信号通路的激活。
此外，Rnf2还与Shwachman-Diamond综合征（SDS）的发生发展密切相关。SDS是一种常染色体隐性遗传疾病，由SBDS基因突变引起。Rnf2与SBDS蛋白相互作用，并通过泛素化作用促进SBDS蛋白的降解[6]。SBDS蛋白在核糖体生物合成、核糖体RNA代谢、有丝分裂纺锤体的稳定性和细胞应激反应中发挥重要作用。Rnf2对SBDS蛋白的降解可能影响这些生物学过程，进而导致SDS的发生。
Rnf2还与p53和MDM2蛋白的稳定性调控相关。p53是一种重要的肿瘤抑制因子，其蛋白稳定性受到MDM2蛋白的调控。Rnf2能够直接与p53和MDM2蛋白结合，并通过泛素化作用促进p53的降解，同时抑制MDM2的降解[7]。Rnf2的过表达会导致p53蛋白水平的降低，进而影响p53介导的细胞凋亡过程。
在食管鳞状细胞癌（ESCC）中，Rnf2的表达水平下调。研究表明，Rnf2的下调与ESCC细胞对失巢凋亡的抵抗能力相关[8]。失巢凋亡是指细胞脱离细胞外基质后发生的细胞凋亡现象，是细胞死亡的一种重要形式。Rnf2的下调可能导致ESCC细胞对失巢凋亡的抵抗能力增强，从而促进ESCC的转移和侵袭。
在黑色素瘤的发生发展中，Rnf2发挥着双重作用。一方面，Rnf2通过单泛素化H2AK119，沉默TGFβ信号通路的负调控因子LTBP2，促进黑色素瘤的侵袭行为[9]。另一方面，Rnf2通过直接转录上调细胞周期调节因子CCND2，促进黑色素瘤细胞的增殖。此外，RNF2的磷酸化状态也影响其在黑色素瘤中的作用，磷酸化后的RNF2能够招募激活型组蛋白修饰因子，激活基因表达，进而影响黑色素瘤的进展。
综上所述，Rnf2是一种重要的E3泛素连接酶，参与组蛋白H2A的单泛质化修饰，在细胞周期的调控、基因表达的调控以及细胞命运的维持中发挥重要作用。Rnf2在胚胎发育、神经系统发育、肿瘤发生发展、Wnt信号通路调控、SDS的发生发展、p53和MDM2蛋白的稳定性调控、ESCC的转移和侵袭以及黑色素瘤的进展等方面发挥着重要作用。Rnf2的研究有助于深入理解表观遗传调控的生物学功能和疾病发生机制，为疾病的治疗和预防提供新的思路和策略。
参考文献：
1. Feng, Gang, Sun, Yuhua. 2022. The Polycomb group gene rnf2 is essential for central and enteric neural system development in zebrafish. In Frontiers in neuroscience, 16, 960149. doi:10.3389/fnins.2022.960149. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/36117635/
2. Yan, Qi, Chen, Bang-Jie, Hu, Shuang, Chen, Li-Jian, Du, Jian. 2021. Emerging role of RNF2 in cancer: From bench to bedside. In Journal of cellular physiology, 236, 5453-5465. doi:10.1002/jcp.30260. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/33400276/
3. Yao, Lei, Li, Jun, Jiang, Bo, Wang, Zhiming, Zhang, Gewen. 2023. RNF2 inhibits E-Cadherin transcription to promote hepatocellular carcinoma metastasis via inducing histone mono-ubiquitination. In Cell death & disease, 14, 261. doi:10.1038/s41419-023-05785-1. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/37037816/
4. Yuan, Lei, Li, Xin, Yang, Huijie, Li, Huixiang. 2022. The ubiquitin ligase RNF2 stabilizes ERα and modulates breast cancer progression. In Human cell, 36, 353-365. doi:10.1007/s13577-022-00810-5. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/36271315/
5. Koo, Youngmu, Han, Wonhee, Keum, Byeong-Rak, Kim, Gun-Hwa, Han, Jin-Kwan. 2023. RNF2 regulates Wnt/ß-catenin signaling via TCF7L1 destabilization. In Scientific reports, 13, 19750. doi:10.1038/s41598-023-47111-x. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/37957244/
6. Sera, Yukihiro, Sadoya, Miki, Ichinose, Takashi, Imanaka, Tsuneo, Yamaguchi, Masafumi. 2022. SBDS interacts with RNF2 and is degraded through RNF2-dependent ubiquitination. In Biochemical and biophysical research communications, 598, 119-123. doi:10.1016/j.bbrc.2022.02.014. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/35158210/
7. Wen, W, Peng, C, Kim, M O, Bode, A M, Dong, Z. 2013. Knockdown of RNF2 induces apoptosis by regulating MDM2 and p53 stability. In Oncogene, 33, 421-8. doi:10.1038/onc.2012.605. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/23318437/
8. Tian, Tian, Lu, Yunxin, Lin, Jinfei, Yang, Han, Deng, Wuguo. 2022. CPT1A promotes anoikis resistance in esophageal squamous cell carcinoma via redox homeostasis. In Redox biology, 58, 102544. doi:10.1016/j.redox.2022.102544. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/36427397/
9. Rai, Kunal, Akdemir, Kadir C, Kwong, Lawrence N, Ernst, Jason, Chin, Lynda. 2015. Dual Roles of RNF2 in Melanoma Progression. In Cancer discovery, 5, 1314-27. doi:10.1158/2159-8290.CD-15-0493. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/26450788/
