智鼠故事 
C57BL/6NCya-Klbem1flox/Cya 条件性基因敲除小鼠
复苏/繁育服务
产品名称：
Klb-flox
产品编号：
S-CKO-17031
品系背景：
C57BL/6NCya
* 使用本品系发表的文献需注明：Klb-flox mice (Strain S-CKO-17031) were purchased from Cyagen.
交付类型
周龄
性别
基因型
数量
只
基本信息
品系名称
C57BL/6NCya-Klbem1flox/Cya
品系编号
CKOCMP-83379-Klb-B6N-VA
产品编号
S-CKO-17031
基因名
Klb
品系背景
C57BL/6NCya
基因别称
betaKlotho
NCBI号
修饰方式
条件性基因敲除
品系说明
该品系是基于策略设计时的数据库信息制作而成，建议您在购买前查询最新的数据库和相关文献，以获取最准确的表型信息。
小鼠表型
MGI:1932466 Homozygous null mice display increased bile acid synthesis and excretion, resistance to gallstone formation, and slightly decreased body weight. Mice homozygous for a knock-out allele or a conditional allele activated in adipose tissue exhibit resistanceto FGF21-induced metabolic disruptions.
质控标准
精子检测
① 冷冻前验证精子活力观察
② 冷冻验证每批次进行复苏验证
品系状态
活体
环境标准
SPF
供应地区
中国
品系详情
Klb位于小鼠的5号染色体，采用基因编辑技术，通过高通量电转受精卵方式，获得Klb基因条件性敲除小鼠，性成熟后取精子冻存。
Klb-flox小鼠模型是由赛业生物（Cyagen）利用基因编辑技术构建的条件性敲除小鼠。该模型构建的目的是研究Klb基因在小鼠体内的功能。Klb基因位于小鼠5号染色体上，由5个外显子组成，其中ATG起始密码子在1号外显子，TAA终止密码子在5号外显子。条件性敲除区域（cKO区域）位于2号外显子，包含505个碱基对的编码序列。删除该区域会导致小鼠Klb基因功能的丧失。
Klb-flox小鼠模型的构建过程包括使用BAC克隆RP23-364B3作为模板，通过PCR技术生成同源臂和cKO区域。随后，将核糖核蛋白（RNP）和靶向载体共同注入受精卵中。出生的小鼠将进行PCR和测序分析，以确定基因型。对于携带敲除等位基因的小鼠，它们表现出增加的胆酸合成和排泄，对胆结石形成的抵抗力增加，以及略微降低的体重。对于携带敲除等位基因或条件性等位基因在脂肪组织中激活的小鼠，它们表现出对FGF21诱导的代谢紊乱的抵抗力增加。
Klb-flox小鼠模型可用于研究Klb基因在小鼠体内的功能。通过构建条件性敲除模型，研究人员可以研究Klb基因在胆酸合成和排泄、胆结石形成、体重调节以及代谢紊乱等方面的作用。此外，该模型还可以用于研究Klb基因在其他生物学过程和疾病发生发展中的作用。
基因研究概述
KLB基因，也称为Klotho beta，是一种在哺乳动物中发现的基因，编码β-Klotho蛋白。β-Klotho蛋白是一种单次跨膜蛋白，主要在肾脏、大脑和脂肪组织中表达。β-Klotho蛋白是成纤维细胞生长因子21（FGF21）的共受体，与FGF21受体（FGFR）结合，共同介导FGF21信号通路。FGF21-KLB-FGFR信号通路在肝脏中调节多种代谢系统，包括糖代谢、脂代谢和能量代谢。β-Klotho蛋白的表达和功能异常与多种代谢性疾病的发生发展密切相关，包括肥胖、非酒精性脂肪肝（NAFLD）和非酒精性脂肪性肝病（MAFLD）。
在肥胖和NAFLD患者中，KLB基因的某些单核苷酸多态性（SNP）与疾病的发生发展相关。例如，KLB基因的rs7670903位点的A等位基因与较高的体重指数（BMI）相关，G等位基因的频率在肥胖伴NAFLD患者中更高[1]。此外，KLB基因的rs17618244位点的G>A变异与儿童NAFLD患者肝脏损伤的严重程度相关，表现为脂滴和炎症细胞浸润增加[4]。这些研究表明，KLB基因的SNP可能与肥胖和肝脏炎症有关，并可能参与NAFLD的发病机制。
除了与肥胖和NAFLD相关外，β-Klotho蛋白还参与调节胰岛素分泌和血糖稳态。β-Klotho蛋白在胰腺β细胞中通过调节糖酵解和葡萄糖刺激的胰岛素分泌（GSIS）来促进胰岛素分泌[2]。β-Klotho蛋白的缺失会导致小鼠胰岛素分泌缺陷和葡萄糖不耐受，而腺病毒介导的KLB恢复可以改善2型糖尿病小鼠的胰岛素分泌和葡萄糖稳态[2]。
此外，β-Klotho蛋白还参与调节肿瘤微环境和免疫反应。TIGIT是一种免疫检查点蛋白，与PD-1共同调节T细胞的免疫反应。研究发现，TIGIT和PD-1的共抑制可以改善抗肿瘤CD8+ T细胞反应[3]。β-Klotho蛋白可以抑制TIGIT的信号传导，从而增强T细胞的免疫反应[3]。
综上所述，KLB基因编码的β-Klotho蛋白在多种生物学过程中发挥重要作用，包括代谢、免疫和肿瘤发生。KLB基因的SNP与肥胖、NAFLD和其他代谢性疾病的发生发展相关。β-Klotho蛋白的缺失会导致胰岛素分泌缺陷和葡萄糖不耐受，而β-Klotho蛋白的恢复可以改善2型糖尿病小鼠的胰岛素分泌和葡萄糖稳态。此外，β-Klotho蛋白还参与调节肿瘤微环境和免疫反应。因此，KLB基因和β-Klotho蛋白的研究对于深入理解多种疾病的发病机制和开发新的治疗方法具有重要意义。
参考文献：
1. Ji, Fang, Liu, Ye, Hao, Jun-Gui, Shen, Gui-Fang, Yan, Xue-Bing. 2019. KLB gene polymorphism is associated with obesity and non-alcoholic fatty liver disease in the Han Chinese. In Aging, 11, 7847-7858. doi:10.18632/aging.102293. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/31548436/
2. Geng, Leiluo, Liao, Boya, Jin, Leigang, Lian, Qizhou, Xu, Aimin. 2022. β-Klotho promotes glycolysis and glucose-stimulated insulin secretion via GP130. In Nature metabolism, 4, 608-626. doi:10.1038/s42255-022-00572-2. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/35551509/
3. Guan, Xiangnan, Hu, Ruozhen, Choi, Yoonha, Johnston, Robert J, Patil, Namrata S. 2024. Anti-TIGIT antibody improves PD-L1 blockade through myeloid and Treg cells. In Nature, 627, 646-655. doi:10.1038/s41586-024-07121-9. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/38418879/
4. Dongiovanni, Paola, Crudele, Annalisa, Panera, Nadia, Nobili, Valerio, Alisi, Anna. 2019. β-Klotho gene variation is associated with liver damage in children with NAFLD. In Journal of hepatology, 72, 411-419. doi:10.1016/j.jhep.2019.10.011. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/31655133/
