Tdh-flox 基因敲除小鼠

基因Tdh，全称thermostable direct hemolysin，是编码热稳定直接溶血素的基因，存在于霍乱弧菌属的某些菌株中，尤其是副溶血性弧菌。副溶血性弧菌是引起全球范围内由海鲜引起的细菌性胃肠炎的主要原因，常与食用生或未煮熟的海鲜相关。然而，并非所有副溶血性弧菌的菌株都具有致病性。

Tdh基因编码的热稳定直接溶血素（TDH）被认为是副溶血性弧菌的主要毒力因子之一。TDH具有多种生物学活性，包括致命毒性、细胞毒性和肠毒性。TDH还能引起特殊的β型溶血现象，称为神奈川现象（KP），在Wagatsuma琼脂上产生特殊的溶血环。除了TDH，副溶血性弧菌还产生与TDH相关的溶血素（TRH），由trh基因编码。TRH与TDH在结构上相似，但毒力略低。研究发现，一些临床菌株不含tdh和/或trh基因，但仍然具有高度的细胞毒性，表明副溶血性弧菌可能存在其他毒力因子。

为了研究tdh和trh基因在副溶血性弧菌中的可能作用，研究人员对意大利2002年至2011年间从临床、环境和食品样本中分离的tdh-/trh+副溶血性弧菌进行了基因序列分析。结果显示，所有分离株都存在trh2变体，且临床分离株的trh2序列与其他欧洲国家分离株完全一致。此外，通过比较意大利和世界其他地区临床分离株的trh2序列，发现欧洲、亚洲和美国临床分离株在特定位置存在相同的氨基酸差异，而意大利的环境和食品来源分离株中只有35.5%具有相同的氨基酸序列。这表明环境来源分离株的trh2序列可能存在差异，这些差异可能有助于区分潜在致病菌株和非致病菌株。此外，研究发现所有tdh-/trh+副溶血性弧菌分离株都扩增了T3SS2β基因，而T3SS2α基因的PCR检测均为阴性，这与tdh-/trh+临床分离株的结果一致。对编码T3SS2效应蛋白的vopC基因进行部分测序和比较发现，意大利tdh-/trh2分离株的vopC序列与其他国家分离株存在差异。这些结果提示，trh基因序列的变异可能与副溶血性弧菌的致病性有关，并且T3SS2系统在副溶血性弧菌的致病过程中发挥重要作用[1]。

除了副溶血性弧菌，其他霍乱弧菌属的菌株也可能携带tdh基因。研究发现，所有从患者分离的霍利斯弧菌（Vibrio hollisae）菌株都携带tdh基因，而其他霍乱弧菌属的菌株中只有少数携带tdh基因。此外，非霍利斯弧菌的tdh基因在系统发育上与霍利斯弧菌的tdh基因存在较大差异，这表明非霍利斯弧菌的tdh基因可能参与了横向基因转移[2]。

综上所述，Tdh基因编码的热稳定直接溶血素（TDH）是副溶血性弧菌的重要毒力因子，具有多种生物学活性。研究发现，Tdh基因在副溶血性弧菌中的存在与致病性密切相关，但并非所有致病菌株都携带tdh基因。此外，副溶血性弧菌还产生与TDH相关的溶血素（TRH），由trh基因编码。trh基因序列的变异可能与副溶血性弧菌的致病性有关。研究还发现，T3SS2系统在副溶血性弧菌的致病过程中发挥重要作用。