Zfp35-flox 基因敲除小鼠

Zfp35，也称为Zfp-35，是一种小鼠锌指基因，编码一个含有18个锌指结构域的蛋白质，以及一个富含酸性残基的N端区域。该基因的2.4 kb mRNA主要在成年小鼠的睾丸中表达，与其它器官相比具有选择性。Zfp35的表达在性反转小鼠的睾丸、未成年的XY动物的睾丸、XY成年睾丸的生殖细胞部分以及通过原位杂交到成年XY睾丸的切片中进行分析。研究显示，Zfp35的表达在精子细胞的粗线期阶段显著增加，这一阶段是减数分裂前期的特定阶段。这些实验表明，Zfp35可能在控制精子发生这一特定阶段的基因活性方面发挥作用[1]。

Zfp35的基因组组织包括三个外显子，其中第一个内含子位于5'非翻译区，第三个外显子包含了所有18个锌指结构域。这些特征与其他锌指基因相似。研究还表明，Zfp35在胎盘哺乳动物中保守，是相关哺乳动物锌指基因亚家族的成员。Zfp35基因位于小鼠染色体18的B3至C区域[2]。

小鼠锌指蛋白基因ZF-12是Zfp-35的同源基因，ZF-12基因与Zfp-35基因在B3至C或旁边染色体18上有连锁。ZF-12基因包含四个外显子和三个内含子，所有内含子剪接位点均显示共有的GT/AG序列。ZF-12基因的第二外显子中发现了单核苷酸多态性（SNPs），并且3'-非翻译区（3'-UTR）的长度有差异。研究还评估了ZF-12基因5'-侧翼区域的约1.2 kb，以检测基础启动子活性。构建了一系列5'-侧翼区域缺失突变体，与荧光素酶基因相连。通过测量在转染细胞中瞬时表达的荧光素酶活性，发现调节元件足以在转录起始位点-762至+70 bp范围内进行基础表达，并且在-824至-762 bp范围内存在一个负调节区域[3]。

ZNF75是一种新型的人类锌指基因，属于Kruppel型，定位在X染色体长臂的Xq26区域。通过使用一个代表C2H2型两个相邻手指之间连接的简并寡核苷酸进行杂交，从特异性Xq24-qter区域的文库中分离出一个cosmid克隆。相关cosmid片段的序列显示有五个连续的锌指结构域，都属于Kruppel家族。识别了一个阅读框，至少在第一个锌指之前75个氨基酸开始，在最后一个锌指之后11个氨基酸结束；与其他ZF基因的比较表明，这个基因组片段代表基因的羧基端外显子。在锌指区域与许多锌指基因，包括小鼠Zfp-35和人类ZFN7 cDNA克隆，有大约55%的同源性。通过使用一组半合子细胞和染色体原位杂交将基因定位在Xq26，这是一个之前未知的锌指基因区域[4]。

综上所述，Zfp35是一种在小鼠睾丸中特异性表达的锌指基因，可能在精子发生的特定阶段控制基因活性。Zfp35的基因组组织和其他锌指基因相似，并且在胎盘哺乳动物中保守。ZF-12基因是Zfp-35的同源基因，位于同一染色体区域，并且具有相似的结构和表达特征。ZNF75是一种新型的人类锌指基因，与Zfp-35有同源性，并且定位在X染色体上的一个新区域。这些研究为理解锌指基因在基因表达调控和生物发育中的作用提供了重要信息。