KP小鼠

KRAS基因编码的K-Ras蛋白是RAS/MAPK信号通路的重要组成部分，负责将细胞外的信号传递到细胞核，从而调控细胞生长、增殖、成熟和分化等过程。KRAS基因是最常见的突变致病型原癌基因之一，KRAS突变在人类癌症中非常常见，约30%的癌症患者都存在KRAS突变，其中90%的胰腺癌，50%的结肠癌，25%的肺癌中和20～30%非小细胞肺癌中均存在KRAS突变 ^[1]。这些突变主要表现为单碱基错义突变，其中超过80%的突变发生在第12个氨基酸残基（G12），包括G12C、G12D和G12V。KRAS G12D突变是胰腺癌和结直肠癌最常见的KRAS突变，也广泛存在于肺癌和直肠癌中 ^[1-2]。KRAS通常像一个开关一样工作，可以在“开”和“关”状态之间切换，当它处于开启状态时，会向细胞传递进行生长和分裂的信号。G12D突变损害该酶的内在活性和GTP酶激活蛋白（GAP）刺激的GTP水解活性，从而增强KRAS的激活，导致细胞不受控制的生长和分裂，促进肿瘤的发生。

TP53基因（在小鼠等模式生物中称为Trp53）是一种高度保守的肿瘤抑制基因，其表达受到包括转录调控、翻译调控及翻译后修饰在内的多层级精密调控。该基因编码的p53蛋白作为关键转录因子，在维持基因组稳定性中发挥核心作用。当细胞遭遇DNA损伤、癌基因激活等应激刺激时，p53可通过诱导细胞周期阻滞、凋亡或衰老等机制，有效阻止异常细胞的增殖 ^[3]。值得注意的是，TP53在几乎所有组织中均有广泛表达，这一特征与其在细胞稳态调控中的基础性地位相符 ^[4]。在人类肿瘤中，TP53是最常发生突变的基因之一，超过50%的恶性肿瘤都存在TP53基因异常。这些突变不仅导致其抑癌功能丧失，还可能赋予突变体显性负效应或功能获得性特性 ^[5]。其中，DNA结合域的R172H突变（对应人类TP53中的R175H位点）作为典型的热点突变，在多种恶性肿瘤中高频出现，是研究p53功能异常的重要模型 ^[6]。

KP小鼠（LSL-Kras G12D（KI/+）；LSL-Trp53 R172H（KI/+））是通过LSL-Kras G12D （KI/+）小鼠与LSL-Trp53 R172H小鼠交配获得的双基因杂合模型。该模型在Kras和Trp53基因的编码区与启动子之间均插入了LoxP-Stop-LoxP终止序列。由于这些序列的存在，在没有Cre重组酶的条件下，突变蛋白不表达。当KP小鼠与组织特异性表达Cre重组酶的小鼠交配后，Cre介导的重组会导致转录终止序列（LoxP-Stop-LoxP）缺失，进而表达致癌蛋白。该模型是研究肿瘤免疫治疗的宝贵工具。